Leber视神经萎缩分子生物学检测

目的 探讨线粒体DNA1778突变与Leber视神经萎缩(Leber shereditary optic neuropathy,LHON)之间的关系. 方法采用突变特异性引物PCR(mutation specific primer PCR)及PCR RFLP(MaeⅢ)检测临床可疑LHON患者及有关亲属，两种方法结果均阳性者则收集其临床资料。 结果 10例11778突变阳性者中1例为携带者，9例为LHON病人,患者中男性6例，女性3例，起病年龄12-25岁，双眼起病间隔0-6个月，随访0-12年,视力为指数/眼前-0.1(除一例生育小孩后发病的患者有视力恢复),接受过视野、视诱发电位和色觉检查的患者结果均异常，而视网膜电图检查结果及全身情况多正常。 结论 10例受试者的两种分子生物学检测结果都显示线粒体DNA11778突变。携带者状态和视力恢复现象的存在表明线粒体DNA突变虽是LHON的主要病因，但其他因素如内分泌失调也可影响其发病。(中华眼底病杂志,1998,14:156-158)     

四种DNA提取法在遗传性眼病DNA库中的比较

目的通过对低渗溶血法、盐酸胍法、氯化钠法、NP-40法提取人类基因组DNA的比较，以得到一种最稳定、可靠、实用的DNA提取方法，应用于遗传性眼病DNA库的建立。方法用四种方法提取眼遗传性疾病患者的血液基因组DNA，紫外分光光度测定，用琼脂糖凝胶电泳和PCR扩增鉴定提取的基因组DNA。结果低渗溶血法提取基因组DNA量最多，纯度最高，PCR扩增效果最好，有利于遗传性眼病DNA库的建立。结论低渗溶血法是一种实用、可靠、稳定的提取方法，在眼遗传性疾病家系DNA库建立上值得推广应用。     

突变特异性引物PCR检测线粒体DNA11778突变

突变特异性引物ＰＣＲ检测线粒体ＤＮＡ１１７７８突变郭莉陈又昭贾小云张清炯郭向明【关键词】聚合酶链反应点突变ＤＮＡ突变分析中国图书资料分类法分类号Ｒ４４６．１Ｒ３４２．３Ｌｅｂｅｒ遗传性视神经萎缩（Ｌｅｂｅｒ′ｓｈｅｒｅｄｉｔａｒｙｏｐｔｉｃｎｅｕｒｏ...     

先天性鼻泪管阻塞的综合治疗

目的　先天性鼻泪管阻塞是婴幼儿常见的眼病 ,其处理历来存在争议。本文的研究目的是探讨应用滴抗菌素眼液加泪囊挤压按摩、泪道加压冲洗及鼻泪管探通术的综合治疗方法对先天性鼻泪管阻塞患儿的临床应用价值及其治疗效果。方法我们回顾性分析了 4 83例 54 7眼 ,从 1997年 1月～ 2 0 0 0年 12月在中山眼科中心小儿眼科门诊治疗的先天性鼻泪管阻塞的病例资料 ,首诊平均年龄为 11.8个月。根据患者的年龄和症状 ,分别采用滴抗菌素眼液加泪囊挤压按摩 ,泪道加压冲洗及鼻泪管探通的综合治疗方法进行处理 ,并观察随访 3个月以上 ,症状消失作为治愈的指标。结果　综合治疗方法对先天性鼻泪管阻塞总的治愈率为 97.3 % .其中 6.1%病例用滴抗菌素眼液加泪囊挤压按摩法治愈 ;8.2 %病例用泪道加压冲洗法治愈 ;83 %的病例用鼻泪管探通术治愈。共有 15例患儿在治疗中发生并发症。结论　综合治疗方法对先天性鼻泪管阻塞患儿是安全有效的处理方法。     

膝骨性关节炎临床治疗进展

膝关节骨性关节炎(Knee Osteoarthritis,KOA)是多种致病因素作用下使软骨细胞及细胞基质合成与分解的动态平衡被打破,导致关节软骨的软化、纤维化、溃疡、减少,软骨下骨质硬化,骨赘形成和软骨下囊肿形成。KOA多发于40岁以上人群,女性大于男性。临床上多以综合非手术治疗、对症及对因治疗、手术治疗,作为KOA的治疗方案。本文就各种治疗措施一一综述。1非手术治疗     

PCR扩增技术在新生儿结膜炎中的诊断应用

目的 探讨PCR扩增技术在新生儿结膜炎临床诊断中的价值。方法 采用PCR扩增技术和直接涂片镜检两种方法，分别检测1997年9月～2002年10月到中山大学中山眼科中心就诊的200例新生儿结膜炎息儿的结膜标本中的淋球菌、沙眼衣原体和解脲支原体。结果 PCR扩增检测出18例淋球菌阳性(9％)，65例沙眼衣原体阳性(32．5％)，8例解脲支原体阳性(4％)；直接涂片镜检法检出14例淋球菌阳性(7％)，47例沙眼衣原体阳性(23．5％)，5例解脲支原体阳性(2．5％)。PCR扩增的阳性率比直接涂片镜检高。结论 PCR扩增技术是一种快速、简便、灵敏的检测新生儿结膜炎常见致病病原体的方法，与传统直接涂片镜检法比较，具有一定的优势。     

烯醇化酶同工酶电泳测定及其在视网膜母细胞瘤诊断中的意义

烯醇化酶是一种糖酵解酶,为二聚体蛋白质,由来自不同基因位点的3个亚基α、β、γ组成,现已发现有5种同工酶:αα、αβ、ββ、αγ、γγ.α亚基广泛分布于各种组织,β亚基分布于心肌和骨骼肌中,而γ亚基为神经组织所特有,存在于神经元和神经内分泌细胞中.     

快速筛选杂合性突变克隆

目的：建立一种快速、简便、可靠的筛选杂合性突变克隆的方法。方法：采用加热裂解，直接PCR扩增插入目的片段，并与常规酶切法相比较。结果：加热裂解，直接PCR扩增是一种快速、简便、行之有效的筛选鉴定方法，可节省时间和提高效率。     

p53和MDM2在3种RP小鼠视网膜中的表达

目的 了解凋亡相关基因p53和MDM2与视网膜色素变性（retinitis pigmentosa,RP)发病的关系。方法 以RP模式动物rds小鼠，rd小鼠，C3H小鼠及正常对照C3B小鼠为材料，提取不同发病时间（出生后7，12，17，23，29，37和50d)视网膜的总RNA，以β-actin和L19核糖体蛋白基因为内对照，RT－PCR分析小鼠发病过程中视网膜p53和MDM2的表达。结果 在C3B小鼠视网膜中，p53和MDM2的表达完全同步。出生后7d，高表达；7－12d期间，表达量迅速下降；12－50d期间，表达水平低，但基本稳定；p53和MDM2在rds小鼠的表达水平低，但基本上是同步，稳定表达。在rd小鼠中，p53的表达变化不大，但MDM2的表达则与p53不同步，类似于C3B小鼠MDM2的表达。在C3H小鼠的视网膜，p53和MDM2的表达也不同步。7－23d期间，p53的表达基本稳定；自23d后逐步下降，其中23－29d期间，p53的表达下降最快。而MDM2的表达总体变化不大。结论：在这3种RP模式动物中，虽然凋亡相关基因和MDM2存在着表达差异，但其发病过程中视网膜细胞的变性死亡可能是通过p53非依赖型途径进行的。