叶绿酸联合赛特铂对人SMMC-7721肝癌细胞株影响的初步研究

目的:探讨叶绿酸(CHL)联合赛特铂(JM216)对人SMMC-7721肝癌细胞凋亡及增殖的作用。方法:选用CHL(1×10-5 mol/L)及不同浓度JM216(10、20和40mg/L),1×10-5 mol/L的CHL分别联合不同浓度JM216作用于SMMC-7721肝癌细胞24、48和72h后,用MTT比色法观察其对肝癌细胞的生长抑制作用,并观察细胞形态变化;用流式细胞术分析药物作用48h时肝癌细胞的周期分布和凋亡情况。结果:CHL组、不同浓度JM216组和联合组细胞生长抑制率均高于对照组,联合组1和联合组2以及联合组3的细胞生长抑制率均高于相应浓度的JM216组。CHL组SMMC-7721细胞周期中G0/G1期比例为(55.94±3.49)%,高于对照组的(50.52±2.56)%,差异有统计学意义,P<0.05;而JM216组SMMC-7721细胞周期中S期比例为(45.12±1.42)%,高于对照组的(27.60±1.27)%,差异有统计学意义,P<0.05。CHL组和JM216组细胞凋亡率分别为(13.48±1.63)%和(15.51±2.09)%,均高于对照组的(1.61±0.47)%,差异有统计学意义,P<0.05;联合组细胞凋亡率为(30.22±3.20)%,高于JM216组和对照组,差异均有统计学意义,P<0.05。结论:CHL和JM216均可抑制肝癌SMMC-7721细胞的生长并诱导其凋亡,且联用后作用增强。     

血浆尾加压素Ⅱ水平与高血压左心室肥厚的相关性分析

目的探讨原发性高血压血浆尾加压素Ⅱ(U-Ⅱ)水平与左心室肥厚(LVH)的关系。方法选取我院高血压门诊原发性高血压患者106例,应用心脏彩色超声心动图检测患者左心室质量指数(LVMI),根据左心室质量指数将高血压患者分为高血压伴左心室肥厚组(EH-LVH)和高血压非左室肥厚组(EH-NLVH),采用放射免疫法检测血浆U-Ⅱ水平。同时选择同期健康体检者50例作为正常对照组。结果 EH-LVH组血浆U-Ⅱ水平(4.8±1.5)μmol/L,明显高于正常对照组(2.0±1.3)μmol/L,差异有统计学意义(P<0.05)。EH-NLVH组(1.8±1.6)μmol/L,与正常对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。直线相关分析显示血浆U-Ⅱ水平与LVMI呈正相关(r=0.518,P<0.01)。结论血浆U-Ⅱ水平与高血压合并左心室肥厚显著相关,血浆U-Ⅱ可能是高血压左心室肥厚疾病发生发展的主要因素之一。     

Klotho基因多态性与高血压及其早期肾损害的关系

目的探讨原发性高血压及其早期肾损伤患者Klotho基因G-395A多态性与血清Klotho蛋白水平的关系。方法选择高血压患者120例,根据是否合并早期肾损害分为高血压组68例(A组)、高血压并早期肾损害组52例(B组),同时选择70例健康者作为对照组。采用等位基因特异性引物PCR技术检测Klotho基因G-395A多态性,酶联免疫吸附测定法测定血清Klotho蛋白水平。结果三组基因型分布符合Hardy-Weiberg平衡。A、B组G、A等位基因高于对照组(P均<0.05);B组GG、GA基因型高于对照组(P均<0.05)。三组Klotho蛋白水平分别为(10.71±2.23)、(9.82±2.57)、(11.99±2.19)pg/mL,两两比较P均<0.05。A、B、对照组GG、GA、AA基因型患者血清Klotho蛋白水平两两比较均有统计学意义(P均<0.05)。结论 Klotho基因多态性可能与高血压及其早期肾损害的发生有关。血清Klotho蛋白浓度增加可能是高血压及其早期肾损害的保护性因素。     

miR-146a通过调节IPr1基因对结核分枝杆菌感染的AEC Ⅱ型细胞活性作用机制

目的 探讨miR-146a通过调节IPr1基因观察对结核分枝杆菌（Mtb）感染的肺泡II型上皮细胞(AEC II)活性的作用机制。方法 采用Mtb感染AECⅡ细胞。将AECⅡ细胞分为结核组（感染Mtb）、 NC组（模型+转染miR-146a NC）、转染组（模型+转染miR-146a mimics）。RT-PCR检测AECⅡ细胞miR-146a、Ipr1基因表达;CCK8检测AECⅡ细胞增殖;流式细胞仪检测AECⅡ细胞凋亡;双荧光素酶报告测定Ipr1与miR-146a靶向关系。结果 DIO荧光染色的Mtb在感染人AECⅡ细胞12 h内会进入细胞质基质中,并围绕细胞核分布,表明建立的结核分枝杆菌感染模型成功;结核组与NC组AECⅡ细胞中miR-146a、Ipr1基因表达比较无差异（P＞0.05）,与NC组相比,转染组AECⅡ细胞中miR-146a、Ipr1基因表达水平升高（P＜0.05）;结核组与NC组AECⅡ细胞在不同时间点的OD值比较均无差异（P＞0.05）,与NC组相比,转染组AECⅡ细胞在不同时间点的OD值均升高（P＜0.05）;结核组AECⅡ细胞凋亡率与NC组相比无差异（P>0.05）,与NC组相比,转染组AECⅡ细胞凋亡率显著降低（P＜0.001）。双荧光素酶报告结果显示,转染miR-146a后野生型Mtb感染的AECⅡ细胞中Ipr1活性升高（P＜0.05）,突变型Mtb感染的AECⅡ细胞中Ipr1活性无明显变化（P＞0.05）,表明Ipr1是miR-146a的靶基因。结论 过表达的miR-146a可增加Mtb感染的AECⅡ细胞活性,降低凋亡,研究机制认为可能与通过激活Ipr1水平相关。Ipr1是miR-146a靶基因,可通过激活表达而发挥减少Mtb对AECⅡ细胞活性的损伤     

高血压早期肾损害患者血清Klotho蛋白及基因多态性的相关性

目的探讨原发性高血压并早期肾功能损害患者血清Klotho蛋白水平及与Klotho基因F352V多态性的相关性。方法原发性高血压患者根据是否合并早期肾损害分为高血压组（A组）68例,高血压并早期肾损组（B组）52例,健康对照组70例。酶联免疫吸附法测定血清Klotho蛋白水平,应用等位基因特异性引物PCR技术检测Klotho基因F352V多态性。结果 Klotho基因F352V多态性FF、FV和VV在3组的分布频率有显著差异（χ2=21.633,P〈0.001）。高血压组V等位基因频率高于对照组,差异有统计学意义（χ2=6.389,P=0.011）。高血压并早期肾损组各基因型分布频率与对照组比较差异有统计学意义（χ2=18.666,P〈0.001）,V等位基因频率高于对照组,差异有统计学意义（χ2=20.763,P〈0.001）。高血压组和高血压并早期肾损组等位基因分布差异也有统计学意义（χ2=4.849,P=0.028）。3组各基因型的血清Klotho蛋白浓度差异均有统计学意义（F值分别为21.754、27.295和22.139,均P〈0.01）,FF、FV和VV三种基因型血清Klotho蛋白浓度两两比较差异均具有统计学意义（P〈0.05）。结论血清Klotho蛋白浓度增加可能是高血压及早期肾损害的保护性因素。Klotho基因多态性可能与高血压及早期肾损害的发生有关,VV基因型易患高血压,FF基因型可能对高血压及早期肾损害有保护作用。