凝血酶体外诱导模拟脑室出血后大鼠蛛网膜细胞纤维化的实验研究

目的观察凝血酶(thrombin)刺激体外培养大鼠蛛网膜细胞后纤维化程度的变化,探讨其与脑室出血(intraventricular hemorrhage,IVH)后大鼠慢性脑积水形成的关系。方法采用SD大鼠蛛网膜细胞,经不同浓度凝血酶刺激,在体外模拟脑室出血(IVH)后慢性脑积水大鼠的蛛网膜细胞纤维化的病理生理过程。细胞免疫化学法(immunocytochemistry,ICC)鉴定传代培养的SD大鼠蛛网膜细胞标志物细胞角蛋白(CK 8/18)和桥粒蛋白(Desmoplakin)的表达。qRT-PCR与Western Blot检测细胞纤维化因子(Col-I、Col-III、TGF-β1、α-SMA)的表达,观察其纤维化程度,同时检测比较各组细胞的表达差异。结果 (1)培养的蛛网膜细胞标志物Cytokeratin和Desmoplakin表达阳性。(2)凝血酶可诱导蛛网膜细胞纤维化,在50u/ml浓度下,蛛网膜细胞纤维化程度最明显。(3)实验组较对照组细胞纤维化程度明显。结论体外可以稳定培养大鼠蛛网膜细胞。凝血酶诱导的蛛网膜细胞各种纤维化指标明显高于正常组,提示纤维化模型构建成功。构建成功的纤维化蛛网膜细胞有利于下一步深入研究脑室出血后慢性脑积水的机制。     

凝血酶体外诱导模拟脑室出血后大鼠蛛网膜细胞纤维化的实验研究

目的 观察凝血酶（thrombin）刺激体外培养大鼠蛛网膜细胞后纤维化程度的变化，探讨其与脑室出血（intraventricular hemorrhage，IVH）后大鼠慢性脑积水形成的关系。方法 采用SD大鼠蛛网膜细胞，经不同浓度凝血酶刺激，在体外模拟脑室出血（IVH）后慢性脑积水大鼠的蛛网膜细胞纤维化的病理生理过程。细胞免疫化学法（immunocytochemistry ，ICC）鉴定传代培养的SD大鼠蛛网膜细胞标志物细胞角蛋白（CK 8/18）和桥粒蛋白（Desmoplakin）的表达。qRT-PCR与Western Blot检测细胞纤维化因子（Col-I、Col-III、TGF-β1、α-SMA）的表达，观察其纤维化程度，同时检测比较各组细胞的表达差异。结果 （1）培养的蛛网膜细胞标志物Cytokeratin和Desmoplakin表达阳性。（2）凝血酶可诱导蛛网膜细胞纤维化，在50u/ml浓度下，蛛网膜细胞纤维化程度最明显。（3）实验组较对照组细胞纤维化程度明显。结论 体外可以稳定培养大鼠蛛网膜细胞。凝血酶诱导的蛛网膜细胞各种纤维化指标明显高于正常组，提示纤维化模型构建成功。构建成功的纤维化蛛网膜细胞有利于下一步深入研究脑室出血后慢性脑积水的机制。     

脑积水发病机制的研究进展

脑积水是一种常见但病因复杂的神经系统疾病,以脑脊液在脑室系统及蛛网膜下腔内聚积并不断增长为 特征,既可由先天性遗传因素导致,也可由后天脑外伤、脑出血等疾病诱发。脑脊液的产生与被吸收进入静脉窦的 不平衡、脑脊液循环通路受阻或者脑室内渗透压维持功能紊乱均能导致脑脊液增多、脑室扩张。