左旋精氨酸—一氧化氮途径在全身性癫痫中的作用及机制

实验用SD大鼠，腹腔注射青霉素诱发全身性癫痫，以大脑皮层的痫样放电频率为主要指标，侧脑室给药，以探讨左旋精氡酸—一氧化氮(L-Arg-NO)途径在全身性癫痫中的作用及机制。其结果如下：(1)侧脑室分别注入0．01，0．1，0．3和1.0mol／L的L-Arg各10μl，均能明显地抑制痫样放电频率，初效应大多在给药后3min出现，7min时达高峰，药效一般维持11～12min。L-Arg的抑制放电效应与剂量呈正相关。     

转基因杂交水牛染色体核型分析

目的:分析转基因水牛(“海医一号”)染色体核型。方法:取水牛耳源静脉血,按人类外周血染色体标本制备方法进行。结果:水牛染色体核型为２ｎ＝４９(４９,ＸＸ)。结论:转基因杂交水牛核型变化与常规杂交育种相同。     

18S rRNA基因siRNA表达质粒的构建和鉴定

目的:构建和鉴定水牛18S rRNA干扰真核表达载体,为进一步研究18S rRNA功能奠定基础.方法:人工设计合成水牛18S rRNA-sh565干扰序列,经基因重组定向克隆插入到真核表达载体pGPH1/GFP/Neo,随机挑选2个克隆菌提取质粒并进行酶切和测序鉴定.结果:质粒酶切和测序结果显示,siRNA寡核苷酸按正确方向和序列插入质粒.结论:成功构建pGPH1/GFP/Neo-buffalo-18S rRNA-sh565干扰表达质粒.     

人类卵巢卵泡刺激素β基因cDNA分离克隆及意义

目的：探讨人类卵巢卵泡刺激素（follicle stimulating hormone,FSH)β基因表达。方法：通过RT－PCR技术，分离，扩增人类卵巢组织FSHβ基因cDNA，并进一步克隆，测序，结果：测序结果与垂体组织克隆FSHcNDA序无相一。结论：人类卵巢组织自身转录FSHβ，提示有必要深入开展垂体一性腺轴的基因表达谱研究。     

转基因水牛人FSHβ基因突变的研究

目的:检测转基因水牛人FSHβcDNA序列基因。方法:分离提取转基因水牛外周血DNA,PCR扩增,T-A克隆测序,DNAclub软件分析。结果:水牛基因组整合人FSHβcDNA序列并发生一位点缺失C44(无意义链)或G347(有意义链),突变位于人FSHβ-Seatbelt结构域。结论:转基因水牛整合人FSHβcDNA序列发生点缺失,导致阅读框架发生移码,其功能有待进一步研究。     

奶水牛β-酪蛋白启动子的克隆及其序列分析

目的:克隆水牛乳腺β-酪蛋白启动子。方法:分离提取水牛乳腺组织DNA,PCR扩增目的片段,T-A克隆,核酸自动测序。结果:所克隆的DNA片段包含CAAT、TATA信号区,孕酮调节区等,100%同源于黑白花奶牛β酪蛋白启动子序列。结论:所克隆DNA片段是奶水牛β-酪蛋白基因上游调控序列。     

miR-29b微RNA定位序列的素数组合规律

目的：探讨miR-29b微RNA定位序列的编码机制。方法：按照碱基堆积力和微RNA非编码性质,对碱基进行四进制数字编码：AUGC／0123;并且运用公式：N mod 4^n=R对微RNA序列进行模数运算和结构分析。结果：发现miR-29b微RNA的定位序列-aguguu具有素数组合规律。结论：微RNA细胞内分子邮编可能按照素数组合规律编码。     

奶水牛乳腺表达人FSHβ基因的载体构建

目的:构建奶水牛乳腺表达人FSHβ基因载体。方法:利用限制性内切酶和T4DNA连接酶方法将转基因构件(水牛β酪蛋白启动子、hFSHβ、SV40PolyA)插入pLXIN载体中,通过转化大肠杆菌,筛选阳性克隆。结果:通过酶切鉴定及测序分析表明pLXIN插入转基因构件。结论:奶水牛乳腺表达人FSHβ基因的载体为:pLXIN-hFSHβ。     

端粒的合成与调控

端粒与细胞衰老和肿瘤发生密切相关。本文综述端粒合成的两种途径:端粒酶途径和重组途径,并说明两种途径均受端粒蛋白调控。提出端粒蛋白有望成为继端粒酶之后新的肿瘤诊断和治疗靶点。