主观性耳鸣与精神心理的双向因果效应探讨

主观性耳鸣是指人体耳外或颅内在缺乏声源刺激下发生在人体耳内或颅内部位的一种声音感受。目前耳鸣患者呈现数量增长和年轻化的趋势。探究精神心理因素对于主观性耳鸣患者的影响则是帮助患者治疗的一个重要方向。本文对精神心理因素造成患者耳鸣的作用机制及与耳鸣症状之间的相互作用进行归纳总结,提出构建主观性耳鸣与精神心理的双向因果效应的新的诊疗模式,为临床诊疗主观性耳鸣提供新的思路。     

GNA12通过激活ERK信号通路促进鼻咽癌细胞增殖和侵袭迁移

目的 探讨鸟嘌呤核苷酸结合蛋白α亚基12(G protein subunit α 12,GNA12)对鼻咽癌细胞生物学行为的影响。方法 利用GEPIA2、Human Protein Altas数据库预测GNA12在头颈部肿瘤中的表达情况,利用Keplan-Meier plotter数据库分析GNA12表达与头颈部肿瘤预后的关系。采用qRT-PCR实验检测正常鼻咽黏膜上皮细胞系(NP69)和鼻咽癌细胞系(CNE-2、5-8F、HK-1)中GNA12的表达水平。用携带si-GNA12和NC的干扰序列分别转染鼻咽癌细胞CNE-2和5-8F细胞系,构建敲低的细胞株(si-GNA12组)和对照细胞株(NC组)。采用划痕实验和Transwell实验检测细胞迁移能力,CCK-8和集落克隆实验检测细胞的增殖能力。采用Western blot实验检测上皮-间质转化中N-cadherin、E-cadherin、Snail以及Vimentin蛋白和ERK信号通路中ERK及p-ERK蛋白表达情况。结果 数据库结果显示,头颈部肿瘤组织中GNA12表达高于正常头颈部组织(P<0.05)。GNA12表达越高,...     

miR-34a通过靶向FOXM1对鼻咽癌细胞增殖和上皮间质转化的影响

  目的  研究miR-34a通过靶向FOXM1对鼻咽癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响,并从上皮间质转化方向研究侵袭和迁移的机制。  方法  体外培养人鼻咽癌细胞HNE-1、CNE-2Z,每株细胞分3组,即空白对照组(control组)、阴性对照组(miR-34a nc组)和过表达miR-34a组(miR-34a mimics组)。荧光定量PCR检测转染后各组细胞miR-34a表达水平。生物信息软件预测miR-34a和FOXM1的靶向关系,荧光定量PCR和Western blotting分析靶向关系。上调miR-34a后,CCK-8法测细胞增殖能力,Transwell、实验测细胞迁移、侵袭能力,Western blotting法测上皮间质转化相关蛋白E-cadherin、Vimentin相对表达水平。  结果  生物信息软件预测miR-34a和FOXM1可能存在靶向关系。在HNE-1、CNE-2Z细胞中,与control组和miR-34a nc组比较,miR-34a mimics组FOXM1的表达下调(HNE-1:0.570±0.041、1.127±0.129、1.125±0.145,F=23.672, P=0.001;CNE-2Z:0.689±0.114、1.966±0.164、1.924±0.087,F=99.599, P＜0.001),增殖、迁移和侵袭能力被显著抑制(P < 0.01),E-cadherin表达上调,Vimentin表达下调(P < 0.01)。Control组和miR-34a nc组差异无统计学意义(P>0.05)。  结论  miR-34q通过靶向FOXM1抑制鼻咽癌细胞的增殖、侵袭和迁移,其机制与抑制上皮间质转化有关。      

miR-4728-3p通过PI3K/AKT信号通路调控DOT1L基因抑制乳腺癌细胞增殖、侵袭和迁移

目的:探讨miR-4728-3p通过调控类端粒沉默干扰体-1(disruptor of telomeric silencing 1-like,DOT1L)基因对乳腺癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法:使用乳腺癌细胞MCF-7、MDA-MB-231及人正常乳腺细胞MCF-10A。转染MCF-7和MDA-MB-231细胞随机分为NC组(转染miR-4728-3p-NC)和敲低组(转染miR-4728-3p-inhibitor)。利用RT-qPCR技术检测不同的细胞中miR-4728-3p和DOT1L的表达量改变情况。集落克隆形成实验和EDU实验可以同时检测体内各个细胞异常增殖的情况;TUNEL荧光标记检测法和流式细胞术实验可以同时检测不同组癌细胞的凋亡变化;划痕实验和Transwell实验可以同时检测到在各个细胞内因不同处理而可能产生的细胞迁移率和侵袭力的改变;Western blot检测与细胞凋亡状态相关细胞蛋白以及与细胞通路凋亡相关细胞蛋白p-AKT和p-PI3K相对表达的含量。结果:在乳腺癌细胞MCF-7、MDA-MB-231以及SKBR3中发现miR-4728-3p和DOT1L的表达高于人正常乳腺细胞MCF-10A(P＜0.05)。转染细胞miR-4728-3p后,与NC组细胞进行实验比较,发现敲低组细胞中miR-4728-3p和DOT1L的表达量明显降低,且敲低组细胞的增殖能力明显减弱,细胞凋亡率明显升高,细胞迁移能力大大降低。敲低组的细胞凋亡活性蛋白相对表达明显发生变化。其中p-AKT与p-PI3K蛋白均被抑制激活。RT-qPCR和Western blot实验验证DOT1L是miR-4728-3p的下游靶向基因。结论:敲低miR-4728-3p可以下调DOT1L的表达从而促进乳腺癌细胞凋亡,抑制乳腺癌细胞增殖,同时使乳腺癌细胞侵袭和迁移能力减弱。