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目的构建pEGFP-N1-GGF2质粒,观察其在大鼠脑组织中的表达。方法采用RT-PCR方法从人胚胎脑组织总RNA中扩增出人GGF2全长序列.并克隆到增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因真核表达载体pEGFP-N1上,构建pEGFP-N1-GGF2质粒.通过脂质体将pEGFP-NI-GGF2质粒转染大鼠脑组织.荧光显微镜下观察GGF2融合蛋白在大鼠脑内表达的时间和空间分布特征。结果成功构建了pEGFP-N1-GGF2表达载体,荧光显微镜观察可见,pEGFP-N1-GGF2表达载体转染6h大鼠脑内即可见GGF2融合蛋白表达.3d时融合蛋白表达最多,7d时表达量稍有下降但仍高,14d时表达量已明显下降。GGF2融合蛋白在脑内的表达以针道为中心向周围扩散.荧光信号可达皮层深部。结论脂质体介导的pEGFP-NI-GGF2质粒能够在大鼠脑内表达GGF2融合蛋白。 相似文献
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患者男,48岁。因反复稀便2~6次/d,白天及餐后为主。伴肠鸣、脐周隐痛、便后缓解。患者发病10个月伴消瘦明显,于2006年1月9日由外院转入本院。入院体检:一般情况尚可,全身浅表淋巴结未触及,心肺(-)。腹软,肝脾肋下未触及,全腹未及包块,下肢无水肿。血常规、肝、肾功能、电解质、各种肝炎病毒标志物、甲状腺素、促甲状腺素、肿瘤标志物均正常。多次粪常规及病原体检查阴性,心电图、胸片、胸部CT均正常。胃镜及二次结肠镜无明显异常,小肠X线钡剂检查(-),B超及上腹部CT提示腹膜后腹主动脉及肠系膜上动脉间实质性占位,肝胆胰脾肾均正常。 相似文献
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重组乙型肝炎病毒变异s基因的表达及其抗原性的分析 总被引:2,自引:1,他引:2
目的 构建乙型肝炎病毒(HBV)变异s基因真核表达载体。研究变异所致乙肝表面抗原(HBsAg)免疫学性状的改变。方法 利用Dra Ⅲ和XhoI双酶切含有突变位点的HBV DNA 1.2拷贝的质粒P.38Ⅱ,获得904bp带有突变点的HBV-S基因片段。将其置换含有HBV DNA(adr亚型)S和S2片段的真核表达载体pCMV-S2.S的相应片估,从而构建s基因nt587G→A突变的真核表达载体CMV-S2.S 145R;并转染人肝癌细胞系Hep G2,以获得分泌变异型HBsAg的细胞系。利用EIA及细胞免疫染色法,探讨变异抗原与抗-HBs结合力的变化。结果 构建了HBsAg的第145位甘氨酸-精氨酸突变体的真核表达载体。将其转染哺乳动物细胞后第3天,培养上清中用EIA检测用HBsAg呈阳性,A值随时间延长而上升,但变异型的A值明显低于野生型。变异型和野生型HBsAg细胞免疫化学检测均有部分细胞呈阳性,但差异不显著。结论 HBsAg第145位甘氨酸-精氨酸的突变体的真核表达载体产物具有良好的抗原性,能够与抗-HBs结合,但与野生型相比结合力明显降低。 相似文献
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肝细胞癌中乙型肝炎病毒变异 总被引:4,自引:0,他引:4
基因变异是生物适应生存环境和进化的重要手段。乙型肝炎病毒基因变异改变了其致病性及对组织的亲嗜性,导致持续感染,逃避疫苗诱导或自然产生免疫,产生抗药性等,给乙肝治疗带来了新的问题,乙型肝炎病毒是引起肝细胞癌的主要原因之一,肝细胞癌中的乙型肝炎病毒变异可能在该病的发病机理中起重要作用。 相似文献
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重组乙型肝炎病毒变异s基因疫苗诱导小鼠产生特异性体液免疫应答 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:构建乙型肝炎病毒(HBV)变异s基因真核表达载体,检测其诱导小鼠产生特异性体液免疫应答。方法:利用限制性内切酶定位克隆构建s基因nt587 G→A的真核表达载体pcMV-S2.S 145R(PR).用其转染人肝癌细胞系Hep G2后,用EIA、EILISA及免疫细胞化学法,观察其抗原性。以重组变异型s基因真核表达载体(PR)和载体pcDNA3.0分别免疫C57BL/6小鼠各5只。每只小鼠各肌肉注射纯化质粒100μg.用ELISA法检测血清抗-HBs及抗-HBs2抗体的效价。结果:体外实验证实,变异型HBs矩可与抗-HBs结合;PR免疫小鼠可诱导其产生抗-HBs抗体及抗.HBs2抗体,但抗-HBs2抗体的出现早于抗-HBs抗体约1~2wk。结论:HBV变异s基因(nt587G→A)的真核表达载体的表达产物具有良好的抗原性,能够诱导C57BL/6小鼠产生体液免疫应答。 相似文献
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目的研究女性乳头单纯蠕形螨感染所致的组织病理学改变.方法收集166例乳腺癌乳房切除标本的乳头,做半连续切片,HE染色,光镜观察.结果蠕形螨的感染率为68.07%(113/166),各年龄组差别不大.蠕形螨感染引起的病理改变是皮脂腺增生或萎缩,真皮浅层周围炎细胞浸润,乳管毛囊扩张、基底细胞增生. 结论蠕形螨的病理改变主要是皮脂腺的萎缩和基底细胞增生. 相似文献