腺病毒介导的HSV—tk基因治疗大鼠脑胶质瘤实验研究

目的：带有ＨＳＶ－ｔｋ基因的重组腺病毒（ＡｄＨＣＭＶ－ｔｋ）结合核苷类似物（ＮＡ）治疗大鼠Ｃ６脑胶质瘤。方法：用Ｘ－ｇａｌ染色测定ＡｄＨＣＭＶ－ｌａｃＺ转染大鼠Ｃ６胶质瘤细胞的效率。用ＡｄＨＣＭＶ－ｔｋ／ＡＣＶ、ＧＣＶ离体及活体治疗大鼠Ｃ６胶质瘤。结果：ＡｄＨＣＭＶ－ｌａｃＺ感染Ｃ６细胞效率达１００％，ＡｄＨＣＭＶ－ｔｋ感染Ｃ６细胞，在病毒感染复数为１０００时，ＧＣＶ和ＡＣＶ半致死剂量分别为３μｇ／ｍｌ和２０μｇ／ｍｌ，Ａｄ－ＨＣＭＶ－ｔｋ／ＡＣＶ治疗大鼠Ｃ６胶质瘤模型，大鼠生存期超过９０天，而对照组分别为１７．０±１．６天（生理盐水组）、１４．５±１．３天（ＡｄＨＣＭＶ－ｌａｃＺ组），Ｐ＜０．００１。结论：重组腺病毒对靶细胞感染效率可达１００％，ＡｄＨＣＭＶ－ｔｋ用ＧＣＶ的杀伤Ｃ６胶质瘤细胞比ＡＣＶ强，而ＨＳＶ－ｔｋ／ＡＣＶ用腺病毒介导治疗大鼠脑肿瘤疗效显著。     

抗大肠癌噬菌体人单链抗体的初步鉴定及序列分析

目的 :对抗大肠癌细胞的单克隆噬菌体单链抗体进行初步鉴定和测序分析。方法 :采用细胞ELISA ,免疫组化 ,DNA序列测定和计算机分析方法 ,对 5个单克隆噬菌体抗体 (CH2 73,CH2 0 5 ,CH2 0 9,CHA12 ,CH72 3)进行初步鉴定和序列分析。结果 :5个抗体均对人大肠癌细胞、人胚肾上皮细胞和其它某些人肿瘤细胞反应 ,也与人正常肝细胞有弱阳性反应 ,但不与鼠源性的癌细胞和正常细胞反应。细胞免疫组化进一步证实了ELISA结果的正确性。大肠癌免疫组化对大肠癌组织有特异性的结合反应 ,而不与正常大肠组织反应。测序结果为CH2 73ScFv全长 732bp ;V ,D ,J分别属于VH3 30 D1 2 6 JH3 linker V1 13 JL2 ,GenBank序号为AY0 2 8777和AY0 2 8996 ;CH2 0 5全长 36 6bp ,V ,D ,J分别VH1 4 6 D6 13 JH3,GenBank序号为AF35 936 5 ;CH2 0 9,CHA12和CH72 3的ScFv基因完全相同 ,全长 72 3bp ,其VH DH JH与CH2 73ScFv基因中的VH DH JH 完全一致 ,V ,D ,J分别属于VH3 30 D1 2 6 JH3 linker L2 Jκ2 ,GenBank序号为AF36 3774。结论 :噬菌体抗体具有结合人大肠癌组织和细胞的活性 ,为进一步开发临床应用人源抗肿瘤抗体和小分子抗体片段奠定基础     

神经外科麻醉对体感诱发电位的影响

目的探讨神经外科手术麻醉对体感诱发电位（SEP）的影响,以期为麻醉和手术处理提供依据。方法随机抽取我科17例全麻手术病人,分成颅内疾病手术组（A组）与脊柱、脊髓疾病手术组（B组）,于术前、麻醉（诱导完成）、术始、术中、术毕和术后6个时程连续监测SEP的潜伏期、波幅及波形并记录。结果麻醉后SEP潜伏期延长5.96%,波幅下降24.00%,未出现波形消失的情况。结论麻醉抑制SEP,表现为潜伏期延长和波幅下降,但未出现波形消失的情况。     

运用低密度表达谱芯片检测原发胶质母细胞瘤中相关基因表达

我们应用选取目前胶质瘤相关基因调节通路中的95个基因制成的低密度表达谱芯片（MFC）通过高通量实时定量逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）技术对胶质母细胞瘤中的基因表达进行分析，以期进一步阐明胶质母细胞瘤的发病机制，并希望能找到一种更简单、有效的能高通量检测肿瘤组织基因表达的方法。     

2O72例颅脑创伤患者用血状况调查

目的 掌握华东六省一市颅脑创伤(TBI)患者用血状况,为临床合理输血和及时救治患者提供理论依据.方法 组织华东六省一市77家医院神经外科医生对经治的14 948例颅脑创伤患者严格填写<颅脑创伤流行病学调查表>,收集2004年颅脑创伤住院患者输血与疾病的诊断、治疗及预后等相关因素的信息,获得的数据用SPSS13.0进行统计分析.结果 14 948例患者中经输血治疗2 072例,其中男性1 663例(80.26%),女性409例(19.74%),平均年龄(41.56±17.36)岁,15～44岁的占56.00%.平均每人输血1 114.03ml,54%的患者输血量在400～800 ml.术中输血(70.08%)和失血性休克(23.75%)为输血主要原因.合并伤越重、颅内受损越重、颅脑手术越复杂者输血概率越大;颅脑损伤程度越重,输血量越多(Χ2=103.44,P＜0.005);输血越多,引起感染等并发症的概率越大(Χ2=1 593.98,P＜0.001),预后越差(Χ2=62.42,P＜0.005).结论 对颅脑患者早期应积极控制出血性休克,预防各种感染、休克等并发症,术中严格控制出血,术后及时纠正贫血.     

丹参-红花药对配伍前后对大鼠肝药酶亚型CYP1A2、CYP2E1和CYP3A4活性的影响

目的 研究丹参、红花药对配伍前后对大鼠肝药酶亚型CYP1A2、CYP2E1和CYP3A4活性的影响。方法 分别选用咖啡因、氯唑沙宗和咪达唑仑作为CYP1A2、CYP2E1和CYP3A4的探针药物。将大鼠随机分为4组,即空白对照组、丹参（1.2 g生药/kg）组、红花（0.4 g生药/kg）组、丹参（1.2 g生药/kg）+红花（0.4 g生药/kg）组,按上述剂量ig给药7 d。于末次给药后30 min,尾iv探针药物咖啡因、氯唑沙宗和咪达唑仑溶液,在不同的时间点取血进行检测;以甲硝唑为内标,采用HPLC法检测探针药物咖啡因、氯唑沙宗和咪达唑仑的量,评价各药物组对大鼠CYP3A4、CYP2E1和CYP1A2活性的影响。结果 与空白对照组比较,丹参组咖啡因、氯唑沙宗和咪达唑仑的清除率（CL）有所增强,曲线下面积（AUC）减少,其半衰期（t_1/2）有减少趋势,但差异均不显著;红花组咖啡因和氯唑沙宗的CL有所降低,但差异不显著,咪达唑仑的CL显著降低（P<0.01）,氯唑沙宗的AUC增加,但差异不显著,咖啡因和咪达唑仑的AUC明显增加（P<0.05、0.01）;丹参+红花组咖啡因和氯唑沙宗的CL明显降低（P<0.05）,曲线下面积（AUC）明显增加（P<0.05）,其t_1/2有延长趋势,但差异不显著。结论 丹参、红花配伍后对CYP450亚型CYP1A2和CYP2E1有抑制作用,这可能是丹参、红花配伍协同增效的作用机制之一。     

71例腹主动脉瘤的基线CT特征与病变进展的相关性

目的 评估与腹主动脉瘤(AAA)进展相关的基线CT特征,为AAA的临床治疗路径提供参考。方法 选取2012年1月至2021年12月至少行两次增强CT扫描的83例AAA患者的临床及影像资料进行分析,两次扫描间隔3个月以上。测量瘤体的直径、面积、长度、曲度、血栓面积等基线CT特征,并根据瘤体直径计算AAA的年进展速度。将有进展的AAA分为缓慢进展组(进展速度≤0.25 cm/y)和快速进展组(进展速度>0.25 cm/y)。采用独立样本t检验或Mann-Whitney U非参数检验进行组间比较;运用单变量与多变量线性回归分析,确定与AAA进展有关的基线CT特征。结果 71例患者存在病变进展,其中缓慢进展组35例,快速进展组36例。快速进展组的基线瘤体长度显著大于缓慢进展组(P=0.03)。多因素相关性分析结果显示,瘤体面积(β=0.048,P=0.020)、长度(β=0.051,P=0.007)与进展速度呈独立正相关,瘤体曲度(β=-0.005,P=0.034)、血栓面积(β=-0.034,P=0.013)与进展速度呈独立负相关。结论 AAA患者基线CT特征中瘤体面积、长度、曲度、血...     

华东地区颅脑交通伤临床及流行病学特点

目的调查与研究华东地区的颅脑交通伤流行病学,为颅脑交通伤的预防与治疗提供科学依据。方法从2004年华东六省一市颅脑创伤住院患者数据库中整群抽取颅脑交通伤患者,用SPSS 13.0统计软件包分析。结果 7 369例颅脑交通伤患者中男女之比为2.72:1。平均年龄(39.28±16.51)岁。25～44岁年龄组所占比例最大,为43.7%。受伤人员中行人所占比例最大,为33.3%。以每年1月份发生颅脑交通伤最多,占13.90%。一天中有一半以上的颅脑交通伤发生在上午7～10时及下午5～9时,分别占23.7%和31.5%。所有住院患者中死亡858例(11.6%),存活6511例(88.4%)。Logistic回归分析显示年龄、颅脑损伤严重度、首送医院、省份、交通伤发生的季度和医院等级等都是影响患者住院期间死亡的重要因素。结论我国应加大颅脑交通伤高发时间段,也就是一天中的早晚上下班高峰以及一年中的第一季度尤其是1月份的道路交通管理,加强中青年男性的道路安全教育,加大对高龄人群的道路交通保护。     

腺病毒载体基因转移系统的建立及其在脑肿瘤中的高效表达

构建了含有CMV启动子调控的HSV－tk基因的重组质粒pAdCMVtk，将其与缺陷型腺病毒Ad5大框架pJM17一起共转染病毒包装细胞293细胞，获得有感染能力但复制缺陷的重组腺病毒AdCMVtk，以其感染大鼠C5脑胶质瘤细胞后用PCR方法证实HSV-tk基因能被腺病毒有效转入靶细胞。用带报告基因LacZ的腺病毒感染大鼠C5脑胶质瘤细胞，经x-gal染色，证明腺病毒载体的基因转移效率可达100％。     

反转录病毒介导基因转移治疗脑肿瘤的安全性研究 Ⅰ.具有复制能力野生型反转录病毒检测

目的：检测反转录病毒介导的脑肿瘤基因治疗过程中具有复制能力野生型反转录病毒（RCR）。方法：RCR检测主要方法有：DNA聚合酶链式反应（PCR），反转录PCR（RT／PCR），Southern杂交以及neo基因和lacZ基因的补救分析。结果：建立了RCR的检测系统，从DNA水平、RNA水平和病毒活体水平对产HSV－TK病毒包装细胞（TK／VPC），C6转TK基因细胞和实验动物血液可能存在的RCR野生型病毒进行检测，结果均没有检测到野生型反转录病毒。结论：采用的反转录病毒基因转移系统没有产生野生型病毒，为临床试验的安全进行提供了保证。