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神经营养因子-3 cDNA的克隆以及在酿酒酵母中的分泌性表达 总被引:1,自引:0,他引:1
从原代培养人许旺细胞申提取总RNA,用RT-PCR方法获取了编码带向导肽和成熟的NT-3两个cDNA片段,经DNA序列测定表明其顺序与文献报道一致。将这两个cDNA片段克隆到大肠-酵母穿梭质粒pVT102U/α上。用酵母整体细胞法将重组质粒转化酵母宿主细胞,经筛选后,获得分泌性表达。这两种cDNA片段的表达产物经SDS-PAGE电泳鉴定,大小都在15ku左右,说明带前导肽的NT-3在酵母细胞中获得了正确的加工。将这两种部分纯化的NT-3样品经鼠胚背根神经节生物活性分析,表明具有明显的促进细胞存活和突起生长的作用。人神经营子-3%在酿酒酵母系统获得有生物活性的表达。 相似文献
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人脑源性神经营养因子cDNA克隆及在酵母中的表达 总被引:3,自引:1,他引:2
目的:克隆和表达人脑源性神经营养因子(hBDNF)。方法和结果:从原代培养人雪旺细胞中提取总RNA,用RT-PCR法获取了编码带前导肽的和成熟的hBDNF2个cDNA片段,经DNA测序表明其顺序与文献报道一致。将这2个cDNA片段分别插入到大肠-酵母穿梭质粒pVT102U/α上。用酵母整体细胞法将重组质粒转化酵母宿主细胞,经筛选后,获得分泌性表达。表达产物经SDS-PAGE电泳鉴定,大小都在150 相似文献
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