一种合成多肽——PLNG自由穿膜现象初探

目的 研究人工设计合成的多肽PLNG在不同作用环境条件下的跨膜运动现象。方法 体外培养不同组织来源的鼠细胞及CHO细胞、BEL细胞,用免疫荧光观察不同浓度、不同温度、不同反应时间条件下,PLNG的穿膜能力及PLNG对不同类型的细胞（CHO细胞、BEL细胞、成年大鼠肝细胞、幼大鼠肝细胞、成年大鼠心肌细胞、幼大鼠心肌细胞、成年大鼠神经细胞、幼大鼠神经细胞）的穿膜特性。结果 PLNG在不同作用环境条件下对细胞膜都有穿透作用,且进入细胞的量近乎相同。结论 实验观察到PLNG具有广谱的穿膜能力,这种穿膜能力在一定范围内对温度、时间及PLNG浓度不敏感;而且这种穿膜能力不受组织特异性的限制。     

盐析法浓缩鱿鱼鱼油中多烯脂肪酸的研究

目的 浓缩鱼油中多烯脂肪酸。方法 盐析法。结果 皂化液于不同温度放置,可得到含ω（DHA）为20％－28％、ω（EPA）为12％－19％的浓缩鱼油。结论 皂化液放置温度越低,多烯脂肪酸中DHA、EPA含量越高,提取率越低。用本法可得到不同档次的鱼油产品,为工业生产浓缩鱼油提供依据。     

当前高校科学研究存在问题分析

高校是进行科学研究的主要场所,但是当前高校的科技建设却由于种种原因存在各种各样的问题,严重影响了科学技术的发展,为了改变这种局面,高校应当加强师资队伍建设,培养科研人员进行科学研究的意识,建立和完善相应规章制度,从而促进高校科学研究的顺利进行.     

利用cDNA微阵列进行宫颈鳞癌的分子筛查

目的使用cDNA微阵列筛选浸润性宫颈鳞癌的淋巴结转移相关基因。方法应用包含18 432个基因的cDNA微阵列测定IB期宫颈鳞癌的全基因序列,包括已知功能的人类转录子和表达序列标签ESTs,分为正常组、淋巴转移组、无淋巴转移三组宫颈组织。为了证实不同的基因表达,选择3个基因进行了冰冻组织的RT-PCR检测和石蜡组织的免疫组化检测。结果经统计学分析,与无淋巴转移浸润性宫颈鳞癌组织比较,有淋巴转移的癌组织有677个基因大于2倍差异,其中上调494个(72.97%),下调183个(27.03%),表达序列标签EST为61个(9.01%),这些基因涉及代谢、发育、信号传导、分化、DNA结合转录和离子通道等。6倍差异基因14个,其中只有nel(chicken)like-2下调,其余为上调基因。RT-PCR和免疫组化的结果与cDNA微阵列结果一致。结论利用cDNA微阵列检测基因的表达状态可以预测宫颈鳞癌淋巴结转移和宫颈癌的预后情况。Cx43的低表达、ETV5和整合素alpha 2的高表达可能会成为评估浸润性宫颈鳞癌恶性程度的重要指标。这些分子有利于预测浸润性宫颈鳞癌的预后及其相应的分子治疗。     

α-硫辛酸与维生素C和维生素E的抗氧化作用比较

维生素C和维生素E以及α-硫辛酸是三种重要的维生素类物质,必须由食物供给[1-3].20世纪初,维生素C防治坏血病成为光辉的一页;20世纪中叶,维生素E又成为防癌抗衰老的新秀;近年来发现α-硫辛酸也具有许多重要生理作用[4-8];但它们三者的共同特点是都具有很强的抗氧化活性.虽然它们的抗氧化途径各不相同,抗氧化效果也有很大差别,却都能有效清除体内自由基对细胞的毒性作用,从而起到保护细胞的作用.本研究是从它们提高细胞抗氧化能力和协助细胞从氧化损伤状态下恢复这两个方面来研究,旨在为进一步探讨三种物质的抗氧化机制奠定基础,也为一些需要长时间暴露在环境空气中进行的细胞实验积累有益资料,并为需要在高氧环境下进行的临床治疗研究提供参考数据.     

NOD鼠甲状腺炎动物模型T细胞克隆的建立

目的为了阐明实验性免疫性甲状腺炎的诱发机制,本研究以甲状腺球蛋白(thyroglobulin,Tg)为抗原,树突状细胞(dendritic cells,DCs)为抗原提呈细胞(antigen-presenting cells,APCs),建立了T细胞克隆。方法NOD鼠饲养于无菌环境中喂养0.05%碘化钠8周后,每2周采血,用酶联免疫吸附试验(ELISA)测Tg水平,然后每只小鼠用100μg Tg的剂量混于完全弗氏佐剂(complete Freund adjuvant,CFA)中免疫小鼠2次,用增殖实验优化Tg的含量,寻找DCs摄取提呈Tg的最适抗原量,然后将免疫后鼠的脾细胞作为T细胞与同基因鼠的与抗原孵育过的DCs培养。结果建立了3个Tg特异性的T细胞克隆,这些细胞克隆在体外培养时间>2年以上,流式细胞仪检测其表型均为CD4+,而且分泌干扰素(IFN)-γ,不分泌白细胞介素(IL)-4。结论DCs起APCs的作用,在T细胞系及T细胞克隆的建立中起极为重要的作用。否则,T细胞即使在Tg及IL-2存在的培养环境中也仅能存活数天,此实验结论将为研究实验性免疫性甲状腺炎的诱发机制提供理论依据和实验手段。     

补气类中草药对缺氧性肝细胞生长作用的影响

目的观察补气类中草药对缺氧性肝细胞生长作用的影响,为进一步研究其促细胞生长机制奠定基础。方法用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法、活细胞观察法分析细胞生长情况,并进行统计学处理。结果4种补气药(人参、党参、黄芪、西洋参)对正常肝细胞均有明显促生长作用(P<0.05),尤以人参效果最好。而对于缺氧性肝细胞则西洋参促生长效果最好(P<0.05);人参、党参效果虽优于黄芪,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论不同补气药对正常肝细胞与缺氧性肝细胞的促生长作用不同:人参对正常肝细胞效果最好,西洋参对缺氧性肝细胞效果最好。     

RGD肽类似物的合成及活性测定

 目的合成RGD(精氨酸-甘氨酸-天门冬氨酸)肽类似物-AoGDw(ω-氨基辛酸-甘氨酸-天门冬氨酸-色氨酸),研究其结构对血小板聚集功能的影响。方法采用固相法合成AoGDW,经Sephadex G-10纯化,RP-HPLC(反相高效液相色谱法)、质谱和氨基酸组成分析对其进行鉴定,并采用比浊法测定其抗血小板聚集的活性及稳定性。结果获得了纯度为98.3%的目的肽、质谱和氨基酸组成分析结果均与理论值一致。AoGDW及对照组抑制血小板聚集的IC₅₀分别为(4.7l±2.51)和(61.82±8.08)μmol·L^-1在血浆中孵育3 h,仍保持100%的活性。结论AoGDW具有更强的抗血小板聚集的活性及稳定性,说明与RGD序列紧邻的氨基酸残基对其功能有重要的影响。     

核转录因子—κB在大鼠肝脏缺血再灌注损伤中的作用

目的 研究核转录因子NF－κB在大鼠肝脏缺血再灌注损伤中的作用。方法 采用快速提取法提取肝组织中细胞核蛋白,再用凝胶滞留电泳分析测定核转录因子NF－κB与其靶基因特异DNA序列的结合活性。结果 肝脏缺血再灌注时,NF－κB与其特异调节基因序列的结合活性明显升高,且有一定的时间相关性。结论 说明NF－κB与其特异调节基因序列的结合活性与肝脏缺血再灌注时肝损伤程度有直接关系。