大鼠胚胎神经干细胞两种不同分离、传代方法的比较

目的体外培养大鼠胚胎神经干细胞(NSCs),比较不同分离、传代方法对其生长的影响。方法取怀孕15d的大鼠,分别用机械分离法和含0.01%EDTA的胰蛋白酶消化法分离海马区细胞,均以1×106/mL的活细胞密度接种到无血清的NSCs培养基中培养,分离纯化至P5代。以含10%胎牛血清(FBS)和2%多聚赖氨酸的DMEM/F12诱导分化,免疫细胞化学鉴定。结果机械分离组获得的活细胞及培养后的神经干细胞球数目明显多于胰蛋白酶消化组,其细胞贴壁率却高于胰蛋白酶消化组。取神经干细胞球及诱导分化后的细胞作免疫细胞化学染色鉴定,细胞分别呈Nestin、β-tubulin-Ⅲ、GFAP和O4阳性反应。结论大鼠胚胎海马区有NSCs存在,离体培养时能分裂增殖,并能被诱导分化。机械分离法和胰蛋白酶消化法各有利弊,可以根据实验情况交叉采用两种不同的分离方法,以稳定高效地培养出NSCs。     

横窦和窦汇的浅表解剖学标志

目的为神经外科手术准确定位横窦的下缘和窦汇确定出一个可靠的浅表解剖学标志。方法对10例经10%甲醛溶液固定的尸头标本进行逐步解剖,测量各相关解剖结构到横窦下缘的距离。结果实验所收集的数据表明在定位横窦下缘和窦汇时,上项线及枕外隆凸尖不是一个可靠的浅表解剖学标志。而以半脊肌附着点作为浅表解剖学标志比以上项线作为浅表解剖标志更准确、可靠。本组10例标本中,无1例的半脊肌附着点超过横窦下部边界3mm,并且它可以作为一个可靠的浅表解剖学标志用以定位接近中线部分的横窦。结论这些发现可以帮助神经外科医生在治疗后颅窝和颅颈接合处病变而进行的各种中线入路手术时更准确的定位横窦。     

细胞粘附分子CD44s、CD44v5在垂体腺瘤中的表达及其意义

目的研究垂体腺瘤(pituitary adenoma)中细胞粘附分子(CD44)的表达,探讨CD44蛋白在垂体腺瘤侵袭性生长中的意义.方法用免疫组化(SP)的方法检测38例垂体腺瘤中CD44s、CD44v5蛋白的表达.结果20例侵袭性垂体腺瘤中CD44s、CD44v5阳性率分别为75%、35%.18例非侵袭性垂体腺瘤中CD44s、CD44v5阳性率分别为27.8%、22.2%.CD44s在侵袭性垂体腺瘤中表达的阳性率明显高于非侵袭性垂体腺瘤,其差异具有显著性(P＜0.01),CD44v5在侵袭性垂体腺瘤中和非侵袭性垂体腺瘤中的表达率均较低,无显著性差异(P＞0.05).结论CD44s在侵袭性垂体腺瘤中呈高表达,与垂体腺瘤的侵袭性生长有关,在垂体腺瘤的侵袭性生长过程中起重要作用.CD44v5在垂体腺瘤中的表达较低,与垂体腺瘤生长方式无关.     

注重细节建立人性化质控体系提高医疗质量

通过对89家综合性医院医疗质量控制情况的调查，发现当前医疗机构医疗质控中存在诸多问题。针对问题提出了建立人性化质控体系的目标、方法、步骤，以及时质控进行细化和量化等，在医院应用并取得了较好的效果。     

X刀治疗大鼠C6脑胶质瘤诱发凋亡及抑癌基因p16蛋白的表达

 目的　为了探讨经X刀照射诱导C6脑胶质瘤凋亡及其抑癌基因p16蛋白的表达。方法　建立大鼠C6脑胶质瘤模型 ,经X刀照射后 ,采用TUNEL法检测细胞凋亡 ,免疫组化SABC方法检测抑癌基因p16蛋白表达的变化。结果　治疗组凋亡阳性细胞数明显高于对照组 (P <0 .0 5 ) ;p16基因在蛋白水平表达率也高于对照组 (P <0 .0 5 )。结论　X线可诱导C6脑胶质瘤细胞发生凋亡 ,抑癌基因 p16在辐射诱导凋亡中起重要的作用。     

全反式维甲酸治疗大鼠C6脑胶质瘤的实验研究

[目的]探讨全反式维甲酸治疗大鼠C6脑胶质瘤的疗效及其机制。[方法]建立大鼠C6脑胶质瘤模型,腹腔注射全反式维甲酸后,MRI检测胶质瘤的体积变化,免疫组化检测胶质纤维酸性蛋白（GFAP）的表达并观察生存期。[结果]治疗组较对照组肿瘤体积明显减小（P〈0.05）;生存期延长（P〈0.05）;GFAP表达增加（P〈0.05）。GFAP的表达同肿瘤体积呈负相关（P〈0.05）。[结论]全反式维甲酸治疗可延长荷瘤鼠生存期,其机制与上调GFAP的表达有关。     

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体基因转染骨髓间充质干细胞后基因表达情况及其对C6胶质瘤细胞作用的体外研究

目的 探讨转染肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)基因的骨髓间充质干细胞(BMSC)基因表达情况及其功能.方法 实验分三组,即转染TRAIL基因组、转染空载体组及空白对照组.用脂质体法将TRAIL转入绿色荧光蛋白(GFP)-BMSC中,反转录PCR法检测BMSC的TRAILmRNA水平,Western blot、免疫荧光法检测TRAIL蛋白的表达;将携带有TRAIL的GFP-BMSC同大鼠C6胶质瘤细胞共培养,通过四甲基偶氮唑蓝比色法检测其对肿瘤细胞的旁观者效应,Hochest-PI双染色法观察TRAIL转染的BMSC对C6细胞凋亡的影响.结果 免疫荧光检测显示,转染TRAIL 24、48 h的GFP-BMSC细胞质和细胞膜有TRAIL蛋白的表达,24h比48 h荧光强,空白对照组及空载体组细胞未见表达.反转录PCR、Western blot显示转染TRAIL基因组细胞TRAIL mRNA及蛋白高表达,空白对照组及空载体组未见表达.转染TRAIL的GFP-BMSC明显抑制C6细胞存活,抑制率为(62.7±0.1)％,高于空载体组的(16.7±0.1)％(P＜0.05),同时转染TRAIL基因的BMSC可促进C6细胞的凋亡.结论 转染TRAIL的BMSC能够稳定表达目的基因,且能促进大鼠C6胶质瘤细胞凋亡,具有明显的旁观者效应.     

5-脂氧合酶及Ki-67在星形细胞瘤中的表达及其相关性研究

目的：研究5-脂氧合酶（5-LOX）和Ki-67在星形细胞瘤中的表达及相关性。方法：免疫组织化学法检测60例星形细胞瘤（低度恶性33例,高度恶性27例）中5-LOX和Ki-67的表达,逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）方法检测5-LOX和Ki-67的mRNA水平,另取14例行脑外伤内减压术的脑组织作为对照。结果：对照组中5-LOX和Ki-67不表达或低表达,星形细胞瘤中5-LOX阳性表达率66．7％（40／60）,Ki-67阳性表达率71．7％（43／60）;高度恶性组5-LOX和Ki-67的阳性表达率高于低度恶性组（P〈0．01）;5-LOX和Ki-67表达呈正相关（γ=0．875,P〈0．01）。星形细胞瘤5-LOX和Ki-67的mRNA含量高于正常脑组织（P〈0．01）,高度恶性组5-LOX和Ki-67的mRNA含量高于低度恶性组（P〈0．01）,5-LOX和Ki-67在星形细胞瘤中的mRNA水平呈正相关（γ=0．781,P〈0．01）。结论：5-LOX和Ki-67的表达与星形细胞瘤恶性程度有关,二者在星形细胞瘤发生发展过程中有协同作用。     

侵袭性垂体腺瘤中CD44与Ki-67表达的相关性

目的探讨细胞粘附分子CD44、细胞增值核抗原Ki-67在侵袭性垂体腺瘤中的表达及意义并探讨二者之间的关系。方法用免疫组化法检测CD44s、CD44v5、Ki-67在20例侵袭性垂体腺瘤和18例非侵袭性垂体腺瘤中的表达。结果CD44s和Ki-67在侵袭性垂体腺瘤组中表达高于非侵袭性垂体腺瘤组(P<0.01),且二者在垂体腺瘤中的表达呈正相关。CD44v5在侵袭性和非侵袭性垂体腺瘤中表达无明显差异(P>0.05)。结论CD44s和Ki-67与垂体腺瘤的侵袭性生长行为有关,二者协同作用,在侵袭性垂体腺瘤的发生、发展中起重要作用,可作为侵袭性垂体腺瘤诊断和判断预后的重要生物学指标。     

武当山何首乌及其混伪品的鉴定研究进展

通过对武当山何首乌作用情况的调查,发现何首乌混伪品５种;将头花千金藤误作何首乌钐,极易发生中毒,就彻底纠正;将凝胶电泳、ＵＶ、ＩＲ光谱技术应用于何首乌及其混伪品鉴别之中,编制出鉴别检索表,使鉴定方法更趋完善;“人形雌雄何首乌”属无稽之谈,植物块根不可能分化出人体五官、性别特征;经考证,古时的何首乌混淆品宕芋,即为现今的冀蓼;探讨何首乌种混淆的历史渊源,分析将“雌雄”引用于中药名称中的利与弊,防止产