胶质瘤的细胞起源

神经胶质瘤是成人最常见的原发性脑肿瘤,可能起源自胶质组织。虽然关于胶质瘤的分子机制和信号通路的认知在过去10年里有很大提高,但高级别胶质瘤仍是预后不良的致命性疾病。目前治疗失败的原因很大程度上与胶质瘤细胞的异质性有关。导致异质性的原因之一是其具有大量遗传变异;而另一个影响因素可能是形成胶质瘤的起源细胞类型。胶质瘤的起源细胞仍未确定,需要更多关于这一问题的知识,才能完整理解神经胶质瘤的生物学特征。通过发育生物学和胶质瘤动物模型的实验研究发现具有形成胶质瘤能力的最可能候选细胞是星形胶质细胞,神经干细胞和少突胶质前体细胞。不同起始细胞类型的胶质瘤,其预后和治疗反应可能会显著不同。因此,有必要深入研究胶质瘤的细胞起源。     

重复经颅磁刺激治疗脑卒中后中枢性疼痛的临床疗效研究

目的观察重复性经颅磁刺激（rTMS）对于脑卒中后中枢性疼痛的治疗作用。方法将47例脑卒中患者随机分为假刺激对照组、低频rTMS治疗组（1Hz）和高频rTMS治疗组（20Hz）。治疗前后3组均进行基础疼痛视觉模拟评分（VAS）,Mc—Gill疼痛问卷量表（MPQ）评分。结果治疗20天后,假刺激对照组无改善,低频rTMS治疗组部分患者有改善,总体较治疗前差异无显著性,高频rTMS治疗组改善明显,与治疗前比较差异有显著性（P〈0．05）。结论高频rTMS对脑卒中后中枢性疼痛有明显的缓解作用。     

中枢神经系统血管母细胞瘤的蛋白质组学分析

背景与目的:中枢神经系统血管母细胞(centralnervoussystemhemangioblastoma,CNSHB)的治疗较难,至今病因不明。本研究应用蛋白质组学方法分析HB与正常脑组织的蛋白质表达谱的差异,分离鉴定与HB发病的蛋白质,为研究HB的组织学起源与发病机制提供依据。方法:收集5例血管母细胞瘤与5例正常脑组织标本。提取标本的总蛋白质。通过双向凝胶电泳(2-DE)分离蛋白,确定血管母细胞瘤与正常脑组织的差异表达蛋白质点。应用基质辅助激光解离-飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)鉴定并对鉴定蛋白质进行生物信息学分析。结果:通过双向凝胶电泳,建立了约含600个蛋白质点的血管母细胞瘤及正常脑组织的高分辨率蛋白质表达图谱。两者相比具有较高的同源性。应用ImageMaster2D图像分析软件共发现115个差异蛋白质点。经MALDI-TOF-MS分析后成功鉴定了87个蛋白质点共计47种蛋白质。其中HB组较正常对照组表达上调46个蛋白质点,下调41个蛋白质点。鉴定蛋白质的功能涉及转运、蛋白质折叠与代谢、三羧酸循环、细胞分化、干细胞相关蛋白质等数个方面。对鉴定所得蛋白质Vimentin、14-3-3蛋白进行免疫组化染色可重复本研究的结果。结论:中枢神经系统血管母细胞瘤可能是一种起源于间叶脑组织的肿瘤。其发生是一个多因子参与、多步骤的复杂过程。多种蛋白质如Vimentin及14-3-3蛋白参与了血管母细胞瘤的发病并起到重要的作用。     

快速聚集无血清悬浮培养法诱导BALB/c小鼠胚胎干细胞分化为大脑皮质椎体神经元

目的以往的研究多集中于胚胎干细胞(ESCs)经外部因素的诱导而转化为神经元,本研究拟探讨一种新的诱导ESCs定向分化方法——快速聚集无血清悬浮培养法(SFEBq)。方法 BALB/c小鼠囊胚内细胞团(ICM)消化成单个细胞,培养传代并鉴定后,应用改进的SFEBq诱导小鼠胚胎干细胞(mESCs)向神经细胞选择分化,并应用免疫荧光染色和流式细胞仪检测Bf1+和Emx1+神经前体细胞的比例,RT-PCR检测不同分化阶段的细胞标志基因表达。结果①分离培养得到的mESCs生长状态良好;②SFEBq使mESCs自主发生神经细胞,无需外部诱因,细胞种植量为3 000个/孔时,细胞Bf1+和Emx1+相对表达量最高;③mESCs按照一个先神经元-后胶质细胞的顺序有效分化,与体内胚胎神经组织发育先后顺序一致,且诱导的神经前体细胞可分化为皮质椎体神经元。结论建立了一种改良的高效ESCs诱导转化的神经元的SFEBq。     

体外三维培养胚胎干细胞形成脑垂体和视杯样器官

胚胎发育过程中的器官形成是一个复杂过程,不仅涉及到细胞间复杂的信号分子网络,而且与细胞间的空间作用力有关.尽管这一过程十分复杂,但仍可通过体外三维细胞培养重现这一过程的部分环节.结合复习文献,文中详细介绍了最近2个体外三维培养胚胎干细胞自发形成视杯和脑垂体样器官的研究,并比较总结了这2项研究的异同点,从而揭示局部自主模式如何推动器官生成.因此,体外细胞三维培养通过模拟体内细胞的生存和功能环境,为更好的理解细胞的结构、功能以及细胞-亚器官-器官间的相互关系提供了有力的实验工具和研究方法.     

雷帕霉素对胶质瘤干细胞的特异性凋亡作用

目的探索磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)抑制剂雷帕霉素对胶质瘤干细胞的特异性凋亡作用。方法应用磁式分选系统将胶质瘤细胞分为CD133+和CD133-细胞。应用MTT法检测雷帕霉素对两种胶质瘤细胞的生长抑制作用。Annex-in V-FITC和碘化丙锭(PI)双染检测细胞凋亡。流式细胞仪检测细胞周期。Western blot检测PI3K蛋白表达。结果雷帕霉素以浓度依赖方式抑制胶质瘤细胞的生长,且对CD133+细胞的生长抑制作用显著强于CD133-细胞。比起CD133-细胞,雷帕霉素对CD133+细胞具有更强的凋亡作用。结论雷帕霉素对胶质瘤干细胞具有特异性的抗肿瘤效应,可能与胶质瘤干细胞具有较强的PI3K活性有关。