抑制COX-2/PGE2通路对胶质瘤细胞免疫抑制因子表达的影响

目的 探讨celecoxib对脑胶质瘤细胞环氧化酶(COX)-2表达的影响,以及对免疫抑制因子前列环素E2( PGE2)、转化生长因子(TGF)-B、血管内皮生长因子(VEGF)等的影响.方法 利用Western印迹检测不同浓度celecoxib作用后,C6细胞COX-2蛋白表达水平;RT-PCR检测celecoxib对C6细胞TGF-β、VEGF mRNA表达的影响;酶联免疫法(ELISA)检测celecoxib作用后C6细胞上清PGE2、TGF-β、VEGF分泌水平.结果 celecoxib可呈浓度依赖性下调C6细胞COX-2蛋白表达水平;celecoxib作用后,C6细胞TGF-β、VEGF mRNA的表达水平明显下调(P＜0.01),相应细胞上清中PGE2、TGF-β、VEGF分泌水平亦明显下降(P＜0.01).结论 celecoxib可通过抑制COX-2蛋白活性,降低肿瘤局部微环境中的PGE2水平,并进一步下调TGF-β、VEGF的表达,从而改善胶质瘤微环境中免疫抑制状态.     

幼鼠癫痫模型海马神经元NMDA受体表达与MMP-3表达相关性

目的 探讨幼鼠癫痫模型海马神经元N-甲基-D-天冬氨酸受体（NMDAR）表达与基质金属蛋白酶-3（MMP-3）表达的相关性。方法 将60只2~4周龄SPF级C57/BL6小鼠随机分为正常组、癫痫组、MMP-3抑制剂组、NMDAR抑制剂组,每组15只。采用匹罗卡品建立幼鼠癫痫模型;采用RT-PCR检测海马神经元NMDAR2A、NMDAR2B、MMP-3 mRNA表达;采用尼氏染色观察海马区神经元形态;采用Western blot检测海马区P-糖蛋白（P-gp）、钙调蛋白激酶Ⅱ（CAMKⅡ）蛋白表达。结果 幼鼠癫痫模型海马区NMDAR2A/B、MMP-3 mRNA以及P-gp、CAMKⅡ蛋白较正常组显著增加（P<0.05）。注射NMDA受体抑制剂或MMP-3抑制剂可显著降低幼鼠癫痫模型NMDAR2A/B、MMP-3 mRNA及P-gp、CAMKⅡ蛋白表达,且明显改善海马区神经元结构。结论 幼鼠癫痫模型海马神经元MMP-3表达与MNDAR表达可能具有相关性。     

脑源性神经营养因子真核表达载体转染人脐带间充质干细胞

背景：干细胞移植是神经损伤修复领域的研究热点,目前多数研究集中于神经干细胞和骨髓于细胞移植研究,而脐带间充质干细胞相关研究目前国内刚刚起步,后者较前者具有来源广泛,伦理限制少等优势。目的：构建脑源性神经营养因子真核表达载体,并将其转染至人脐带间充质干细胞中,建立稳定表达脑源性神经营养因子的细胞模型。方法：应用反转录PCR获得脑源性神经营养因子的基因序列,然后将脑源性神经营养因子的基因序列插入到pcDNAⅢ载体的多克隆位点,构建脑源性神经营养因子蛋白表达载体,并转染脐带间充质干细胞;Western Blot体外检测携带脑源性冲经营养因子基因的脐带间充质于细胞的脑源性神经营养因子蛋白表达水平：取培养好的PC12细胞和胎鼠皮质神经元加入含脑源性神经营养因子的脐带间充质干细胞培养基,检测脑源性神经营养因子蛋白的生物活性。结果与结论：成功构建脑源性神经营养因子真核表达载体,该载体能在脐带间充质干细胞中高水平表达脑源性神经营养因子蛋白,表达的脑源性神经营养因子蛋白体外检测具有生物活性。可见脐带间充质干细胞有可能作为脑源性神经营养因子真核表达载体用于神经损伤修复研究。     

125I-UdR对C6胶质瘤细胞DNA靶点放疗作用的实验研究

目的探讨5-^125I-2′脱氧尿苷(^125I-UdR)对C6胶质瘤细胞DNA靶点放疗作用及其作用机制。方法体外培养C6胶质瘤细胞，行克隆形成和生长抑制分析，并建立C6／Wistar脑胶质瘤模型，实验组、对照组和空白组分别于肿瘤局部注射^125I-UdR、^127I-UdR和生理盐水，5d后处死动物，测量肿瘤质量和直径，行流式细胞仪分析、增殖细胞核抗原(PCNA)免疫组织化学染色和大鼠生存分析。结果^125I-UdR各实验组生长曲线抑制，克隆形成、肿瘤大小和质量较对照组和空白组明显降低；PCNA指数、增殖指数、肿瘤S期细胞比例明显降低；凋亡指数增高。^125I-UdR实验组较对照及空白组生存时间延长。结论^125I-UdR可抑制C6胶质瘤细胞增殖，诱导凋亡，具有进一步临床应用的前景和价值。     

反义C-myb寡核苷酸对脑胶质瘤细胞生长抑制作用的初步观察

目的：研究原癌基因Ｃ－ｍｙｂ反义寡核苷酸在裸鼠体内诱导脑胶质瘤细胞凋亡及抑制生长的作用。方法：采用人工合成反义、正义二组硫代脱氧寡核酸（ＳＯＮ）,Ｃ６脑胶质瘤瘤体内直接注入法,用游标卡尺检测肿瘤的生长抑制率,ＨＥ染色方法检测细胞的凋亡状况。结果：Ｃ－ｍｙｂ反义ＳＯＮ组脑胶质瘤细胞的生长明显减慢,瘤细胞凋亡增加。结论：Ｃ－ｍｙｂ反义ＳＯＮ能够诱导Ｃ６脑胶质瘤细胞的凋亡,激发脑胶质瘤细胞的特异性免疫反应,同时能明显抑制肿瘤细胞的生长。     

人骨髓基质细胞移植治疗脑出血的实验研究

目的 探索人骨髓基质细胞( hBMSCs)静脉移植治疗脑出血的实验效果及其可能机制.方法 选用成年雄性Wistar大鼠80只,随机分为对照组及3个移植不同数量(1×106/ml,3×106/ml,6×106/ml)细胞的治疗组.经尾静脉注射hBMSCs治疗大鼠脑出血.计算分析神经学缺陷程度分数、尾状核组织损失的百分率以及TUJ1 、BrdU、mAb1281、突触素免疫组化结果.结果 脑出血后14d,3个治疗组的神经功能明显改善(P＜0.05);尾状核组织损失面积明显减小(P＜0.05);TUJ1、BrdU、突触素的阳性细胞染色面积明显增加(P＜0.05);mAb1281阳性染色细胞大量出现在脑出血区(P＜0.05).结论 经尾静脉移植hBMSCs,能明显改善脑出血大鼠的神经功能,这与脑出血区尾状核组织损失较小、神经元及神经突触再生有关.     

C-myb、PKCa在脑胶质瘤侵袭作用中的相关性研究

目的研究脑胶质瘤侵袭性生长过程中,C-myb的作用及其与蛋白激酶Ca之间的相互关系.方法Wistar大鼠35只,随机分为实验组(30只)和对照组(5只).实验组每只大鼠于右侧大脑皮质运动区种植C6胶质瘤细胞10μl(3×107个/μl),对照组则注入10μl生理盐水,于术后10天将大鼠全部处死取材,进行大体观察、HE染色及免疫组织化学检查,并将实验组侵袭性量化为0～Ⅳ级,分别检查对照组和实验组肿瘤侵袭性中,各组C-myb、PKCa的表达,并对其进行评分.结果1.实验组大鼠均可见肿瘤生长,其中28只表现为侵袭0～Ⅳ级;2.C-myb表达越强,脑胶质瘤侵袭的级别越高,呈正相关(P＜0.01);3.肿瘤区C-myb与PKCa表达在肿瘤各级中均为高度一致;4.在肿瘤0～Ⅳ级侵袭中,瘤周区及边缘区的C-myb、PKCa二者表达评分密切相关(P＜0.05);5.对照组中,C-myb、PKCa均为阴性表达.结论本组资料表明,C-myb是脑胶质瘤侵袭性的重要癌其因,脑胶质瘤的侵袭性生长是临床术后复发的根本原因.