人嗅黏膜间充质干细胞的生物学特性

目的：观察及研究人嗅黏膜间充质干细胞的生物学特性。方法：分离、培养、鉴定人嗅黏膜间充质干细 胞,在透射电子显微镜、扫描电子显微镜下观察其超微结构,并在体外诱导其向脂细胞、骨细胞、神经干细胞球和神 经元分化。结果：人嗅黏膜间充质干细胞生长以梭形细胞为主,呈放射状排列,高表达表面标志CD73和CD90,不表 达CD34和CD45;在扫描电子显微镜下可见细胞表面有短而粗的微绒毛突起,在透射电子显微镜下可见到两种不同的 细胞形态;具有成脂、成骨、成神经元干细胞球和神经元分化的能力。结论：人嗅黏膜间充质干细胞具有间充质干细 胞的一般生物学特性,经诱导培养后具有多向分化潜能,可作为组织工程修复的理想的种子细胞。     

OECs无血清上清液体外诱导UB-MSCs向神经细胞分化

目的:观察大鼠嗅鞘细胞无血清上清液诱导脐血间充质干细胞向神经细胞分化的作用。方法:采用差速贴壁联合阿糖胞苷抑制法获得较高纯度的嗅鞘细胞,在最佳状态细胞无血清培养后取上清液。收集正常足月剖腹产胎儿的脐带血,经肝素抗凝,用淋巴细胞分离液分离脐血的单个核细胞,采用差速贴壁法纯化间充质干细胞,传第三代后用上述收集的嗅鞘细胞无血清上清液诱导,观察诱导分化过程,免疫组化鉴定分化结果。结果:用差速贴壁和阿糖胞苷抑制法可获得纯度高达95%的嗅鞘细胞,使用无血清嗅鞘细胞上清液培养脐血间充质干细胞后,发现能诱导脐血间充质干细胞向神经细胞形态分化,胞体呈椭圆形,伸出长突起。诱导7天后相差显微镜下可观察到神经干细胞、神经元和胶质细胞形态的细胞,与NSE、GFAP细胞免疫组化结果一致。结论:大鼠嗅鞘细胞无血清上清液有明显诱导脐血间充质干细胞分化为神经细胞的作用。     

嗅鞘细胞分泌蛋白SC1促进神经元突触形成

目的探讨嗅鞘细胞(OECs)诱导神经干细胞(NSCs)分化后,其分泌蛋白SC1对分化后神经元突触形成的作用。方法用小鼠OECs条件培养基诱导小鼠神经干细胞系C17.2分化后,用突触前膜抗体bassoon标记突触并计数,同时用Western blot检测bassoon的表达量。结果 OECs诱导组突触数目及bassoon的表达量明显高于全反式维甲酸(RA)诱导组,在RA诱导组加入小鼠SC1重组蛋白后,突触数目及bassoon的表达量与OECs诱导组接近。结论 OECs分泌蛋白SC1能促进C17.2 NSCs分化后神经元的突触形成。     

Mg-Zn-Nd-Zr镁合金浸提液对神经细胞活性和分化的影响

目的 研究Mg-Zn-Nd-Zr镁合金浸提液对神经细胞活性和分化的影响。方法 制备Mg-Zn-Nd-Zr镁合金浸提液,实验分组:对照组、稀释1倍组、稀释2倍组、稀释3倍组、稀释10倍组。通过MTT法、流式细胞术、WB、CCK-8法、RT-PCR、免疫荧光法检测Mg-Zn-Nd-Zr镁合金对神经细胞活性和分化的影响。结果 与对照组相比,各实验组的星型胶质细胞和神经干细胞细胞死亡率比较,差异无统计学意义(P＞0.05)。各组星形胶质细胞处于G₀/G₁期及G₂/M期的细胞比例,差异无统计学意义(P＞0.05),稀释10倍组中星型胶质细胞处于S期的细胞比例减少(P＜0.05)。与对照组相比,稀释10倍组和稀释3倍组中星型胶质细胞的PCNA蛋白表达量增加,而稀释2倍组和稀释1倍组中星型胶质细胞的PCNA蛋白表达量减少(P＜0.05)。与对照组相比,稀释10倍组和稀释3倍组中神经干细胞的PCNA mRNA表达增加以及Bax、bcl-2的mRNA表达减少,而稀释2倍组中神经干细胞的PCNA mRNA表达减少,稀释1倍组中神经干细胞Bax、bcl-2的mRNA表达增加(P＜0.05)。神经干细胞在稀释10倍组的浸提液中可分化为神经元及星形胶质细胞。结论 Mg-Zn-Nd-Zr镁合金浸提液对神经细胞无明显细胞毒性。在稀释10和3倍时能促进星形胶质细胞和神经干细胞的增殖,而且稀释10倍时能促进神经干细胞向神经元及星形胶质细胞分化。但稀释2倍组和稀释1倍组的星形胶质细胞和神经干细胞凋亡增加。 [引用格式:国际神经病学神经外科学杂志, 2021, 48(4): 343-348.]     

颅骨固定钛夹在颅骨成形术中的应用

目的 介绍一种新型颅骨固定钛夹在颅骨成形术中的应用.方法 回顾性分析10例颅骨外伤病人的临床资料,均采用颅骨固定钛夹行颅骨成形术.结果 颅骨固定牢靠,术后未见并发症.结论 新型颅骨固定钛夹可方便、牢固固定自体骨瓣.     

脐血单个核细胞移植治疗痉挛型小儿脑性瘫痪的安全性

背景：大量研究证实脐血间充质干细胞体外培养可被诱导分化为表达神经元和神经胶质细胞表面标志物的细胞,对神经系统疾病起到替代修复的作用。目的：观察人脐血单个核细胞移植治疗痉挛型小儿脑性瘫痪的疗效和安全性。方法：收集正常足月剖腹产胎儿的脐血,经肝素抗凝,用淋巴细胞分离液分离脐血单个核细胞,采用差速贴壁法进行纯化,并经腰椎穿刺注入30例痉挛型脑性瘫痪患者体内。结果与结论：移植后患者肢体的肌肉痉挛程度和关节活动度明显改善,与移植前相比差异有显著性意义（P〈0.05）,移植后和随访过程中无不良反应和并发症。     

脐血单核细胞治疗脊髓损伤的临床观察

目的:观察人脐血单核细胞(Mononuclear cells,MNCs)移植治疗脊髓损伤(spinal cord injury)的疗效。方法:收集正常足月剖腹产胎儿的脐带血,经肝素抗凝,用淋巴细胞分离液分离脐血的单个核细胞,采用差速贴壁法进行纯化,并经腰椎穿刺注入患者体内。结果:治疗后患者肢体自主运动、感觉及两便的控制功能明显改善,与治疗前相比差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:脐血MNCs移植治疗对部分SCI患者恢复具有较好的治疗效果。     

低氧微环境促进嗅黏膜间充质干细胞向神经元分化及其相关机制

目的：研究低氧微环境下利用嗅鞘细胞(olfactory ensheathing cells，OECs)上清液诱导嗅黏膜间充质干细 胞(olfactory mucosa mesenchymal stem cells，OM-MSCs)更多地向神经元分化及其相关的机制。方法：分离培养OECs和 OM-MSCs，应用流式细胞仪和免疫荧光方法分别进行鉴定；实验将OM-MSCs分为3%O2+低氧诱导因子-1α(hypoxia- inducible factor-1α，HIF-1α)抑制剂利非西呱(lifi ciguat，YC-1)+OECs上清诱导组(A组)、3%O2+OECs上清诱导组(B组)及 21%O2+OECs上清诱导组(对照组)。采用免疫荧光检测分化后的神经元，采用定量聚合酶链反应(quantitative polymerase chain reaction，Q-PCR)和Western印迹分别检测HIF-1α的mRNA及 βIII-微管蛋白(βIII-tubulin)、胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic portein，GFAP)的表达，再用膜片钳检测分化后的神经元钾离子通道开放情况。结果：实验各组相比 较，B组OM-MSCs诱导后免疫荧光显示βIII-tubulin表达最多，Q-PCR显示B组HIF-1α表达明显增高(均P<0.05)；Western 印迹表明B组中βIII-tubulin蛋白表达显著增多，而胶质细胞标志物GFAP表达明显降低(均P<0.05)；且诱导分化后的神 经元经膜片钳检测发现钾离子电流。结论：低氧微环境下的OM-MSCs经OECs上清液诱导能显著提高其向神经元分化 的比例，并明显降低了神经胶质细胞的产生，且与细胞HIF-1α信号通路被激活有关。