雌激素受体在肝癌组织中的表达及其临床意义

目的研究雌性激素受体(ER)在肝癌组织中的表达和其临床价值。方法采用免疫组化法对59例肝癌患者肝肿瘤组织中雌激素受体(ER)表达情况进行研究。结果 59例肝癌患者ER表达阳性率为72.9%。22～36岁的肝癌患者ER表达阳性率为72.22%(13/18),37～52岁的患者表达阳性率为75.01%(15/20),53～67岁的患者的阳性率为71.42%(15/21);直径≤5 cm的肝癌中ER表达阳性率为33.33%(6/18),直径大于5 cm的癌组织阳性率为90.24%(37/41);分化程度为EdmondsonⅠ级的肝癌组织中表达阳性率为96.97%(32/33),Ⅱ级的阳性率为55.56%(10/18),Ⅲ级阳性率为12.5%(1/8)。年龄组间表达差异无统计学意义(P>0.05),而不同大小肿瘤和不同分化程度组间表达差异有统计学意义(P<0.05)。结论原发性肝细胞癌具有一定的雌激素依赖性,肝癌发生、发展及预后与肝癌组织中ER表达有关。     

RNA干扰CRMP 5抑制大鼠海马神经元突起生长

目的探讨CRMP5对大鼠海马神经元突起生长的影响。方法将带FAM标记的CRMP5的特异性干扰片段及阴性对照转染培养成熟的海马神经元,用免疫荧光的方法验证干扰片段对神经元内源性CRMP5的干扰效果,并利用共聚焦显微镜观察神经元突起以及侧枝的形成。结果携带FAM的si RNA可以成功的进入细胞,分布于神经元的胞体以及树突;免疫荧光证实CRMP5 si RNA可以有效的沉默CRMP5蛋白的表达;沉默CRMP5基因表达后的海马神经元突起短小,而且缺少分支,而对照细胞突起长,分支多;定量分析显示,导入CRMP5 si RNA的细胞突起的长度较对照细胞缩短,差异显著(P0.05);突起的数目比较,一级突起数目无显著差异,而二级及其以上突起的数目明显减少,差异显著(P0.05)。结论沉默CRMP5可抑制海马神经元突起的生长和侧枝形成。     

葛根素对大鼠后肢缺血再灌注损伤骨骼肌和周围神经的保护作用

目的 研究葛根素在大鼠后肢缺血再灌注损伤中对骨骼肌及周围神经的保护作用.方法 30只健康雌性SD大鼠按随机原则分为手术+葛根素组(P组)及手术 + 生理盐水组(N组)、假手术+生理盐水组(S组),术前1 h开始分别行腹腔注射药物.手术采用橡皮筋套圈阻断大鼠左后肢髂总动、静脉4 h再恢复血运,建立肢体缺血再灌注损伤的动物...     

慢病毒介导的shRNA沉默PTTG基因表达对人生长激素型垂体腺瘤细胞生长的影响

目的观察慢病毒介导shRNA沉默PTTG基因表达对人生长激素型垂体腺瘤细胞生长的影响。方法原代培养人生长激素型垂体腺瘤细胞,分为正常对照组、阴性对照组和实验组。实验组构建PTTG-shRNA的慢病毒表达载体并转染肿瘤细胞,阴性对照组转染空慢病毒载体,正常对照组细胞不转染。流式细胞仪分析细胞转染效率,RT-PCR和Western blot检测肿瘤细胞PTTG mRNA和蛋白的表达水平,MTT检测细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞周期变化。结果与正常对照组和阴性对照组比较,实验组细胞转染PTTG-shRNA慢病毒载体后,PTTG mRNA和蛋白表达显著下降(均P<0.01),细胞生长显著变慢(均P<0.05),G0/G1期细胞比例显著增高(均P<0.05),凋亡率明显增加(均P<0.05)。结论慢病毒介导shRNA沉默PTTG基因表达可显著抑制人生长激素型垂体腺瘤细胞的生长,为进一步研究垂体腺瘤的发病机制和肿瘤的基因治疗提供实验基础。     

PTTG基因siRNA载体的构建与鉴定

目的构建针对垂体腺瘤细胞系AtT20的高效率沉默PTTG基因的shRNA表达载体。方法合成特异性干扰PTTG基因的小发卡RNA(shRNA)片段,并与pGenesil2载体连接,构建PTTG干扰载体(pGenesil2-PTTG shRNA)。利用脂质体将其转染AtT20细胞,分为正常细胞对照组、阴性对照组和3个shRNA干扰组(pGenesil2-PTTG siRNA1、2及3),应用半定量逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和Western blot法分析转染后AtT20细胞中PTTG的mRNA和蛋白表达水平。结果酶切证实PTTG-shRNA表达载体构建成功;转染效率可达75%左右。转染pGenesil2-PTTG shRNA后,3个干扰组的AtT20细胞中PTTG的mRNA和蛋白表达水平均较正常对照组显著降低(P<0.01)。结论成功构建了能高效沉默PTTG的RNAi表达载体;且pGenesil2-PTTG siRNA高效地抑制了垂体腺瘤细胞AtT20细胞中PTTG綦因的表达。     

金雀异黄酮对SAMP8鼠血小板线粒体超微结构的保护作用

目的:观察植物雌激素金雀异黄酮对SAMP8鼠(快速老化鼠P8)血小板线粒体超微结构的保护作用。方法:提取6月龄SAMP8鼠和对照SAMR1的血小板,用金雀异黄酮处理后进行电镜观察。结果:6月龄SAMP8鼠血小板线粒体的超微结构发生了退行性变。而金雀异黄酮处理可维持6月龄SAMP8鼠血小板线粒体的正常超微结构。结论:金雀异黄酮对SAMP8鼠的血小板线粒体有保护作用。     

过氧化氢对大鼠血小板线粒体功能的影响

目的 探讨血小板能否用来观察氧化应激过程中线粒体退变.方法 将30只SD大鼠随机分为MTT组、ATP组和SOD组,各组血小板分别用50、100、200n mol/L H2O2处理30 min后,检测相应指标.结果 50 nmol/L H2O2中的血小板SOD活性(U/mgprot)为(3.4571±1.0340),A...     

CRMP4慢病毒载体的构建及其对神经元突起生长的影响

目的 探讨CRMP4对海马神经元突起生长的影响。 方法 利用PCR技术扩增CRMP4目的基因片段,与病毒载体连接,经过PCR、酶切和鉴定后与包装质粒共转293T细胞,制备慢病毒载体,之后感染海马神经元,观察神经元突起生长的变化,并进行定量分析。 结果 扩增出CRMP4目的基因,成功构建CRMP4慢病毒载体,病毒滴度为1.0×107~1.0×108 U/ml;对照细胞转染空质粒后见GFP表达,分布于神经元的胞体和突起,细胞随着发育不断极化,分化出树突和轴突,突起不断延长;过表达CRMP4后,可见神经元的突起延长,分支较对照组增多;定量结果显示,神经元突起总长度包括树突和轴突均较对照组增多,分支数目亦较对照组增多,差异显著（P<0.05）。 结论 成功构建了携带大鼠CRMP4基因的慢病毒表达载体;过表达CRMP4基因可以促进神经元突起的生长。     

植物雌激素对神经系统退行性疾病的作用

植物雌激素是一类有弱雌激素作用的杂环多酚复合物,它对神经退行性病变的作用机制还不是很明确。我们的研究表明,金雀异黄酮可以提高大鼠血清超氧化物歧化酶(SOD)活力,减轻钙超载以及氧化应激引起的神经元损伤,维持突触正常联接。植物雌激素不仅具有雌激素样的作用,还具有其特有的抗氧化特性。利用这些特性,植物雌激素可以用于降低或延缓神经退行性疾病,例如阿尔茨海默病的发病率其发病。     

SAMP8鼠血小板线粒体超微结构的增年龄性变化

目的观察不同月龄SAMP8鼠(快速老化鼠P8)血小板线粒体超微结构的变化。方法提取2、6及9月龄SAMP8鼠的血小板并进行电镜观察。结果随月龄的增加,SAMP8鼠血小板线粒体退变逐渐明显。9月龄SAMP8鼠的血小板线粒体呈明显的退行性变。结论 SAMP8鼠血小板线粒体超微结构呈增龄性改变,提示线粒体变性可能是SAMP8鼠快速老化的机制之一。血小板可广泛地用于研究线粒体机能和老化相关疾病。