鹦鹉热衣原体噬菌体Chp1衣壳蛋白VP1的原核表达及多克隆抗体制备

目的原核表达并纯化鹦鹉热衣原体(Chlamydia psittaci,Cps)噬菌体Chp1衣壳蛋白VP1的重组蛋白rVP11-190,并制备多克隆抗体。方法采用Clustal Omega在线软件对6株衣原体噬菌体VP1蛋白的氨基酸序列进行多重比对,确定Chp1VP1蛋白的保守区和特异区,并用DNAStar软件预测抗原表位。选择VP11-190与pET28a(+)载体连接构建原核表达载体pET28a-VP11-190,转化至E.coli BL21(DE3)中诱导表达,采用Ni-NTA亲和层析法纯化重组蛋白;用纯化的重组蛋白免疫ICR小鼠,制备免疫血清,ELISA法检测其抗rVP11-190的效价。结果构建的原核表达载体pET28(a)-VP11-190经IPTG诱导高效表达了相对分子质量约为30×103的重组蛋白。用该蛋白免疫小鼠,制备多克隆抗体血清,ELISA法测定免疫小鼠血清抗体效价为1∶12 800。结论成功原核表达并纯化了噬菌体Chp1衣壳蛋白VP11-190的重组蛋白,制备的鼠抗VP11-190多克隆抗体血清效价及特异性良好,为进一步分离鉴定鹦鹉热衣原体的噬菌体奠定了基础。     

AIDS患者血液与脑脊液中真菌检测及药敏分析

目的 分析艾滋病(AIDS)患者血液及脑脊液中真菌种类及其耐药性,为临床诊疗AIDS患者机会性感染提供参考。方法收集2011～2014年某传染病医院接诊AIDS患者的血液和脑脊液标本,对其中病原性真菌进行分离、鉴定,并对新生隐球菌进行药敏分析。结果共分析AIDS患者血液培养阳性标本477份、脑脊液培养阳性标本109份,真菌检出率分别为66.88%(319/477)和66.97%(73/109),其中血液中以马内菲青霉菌检出率最高,为53.04%(253/477),脑脊液中以新生隐球菌检出率最高,占66.06%(72/109)。新生隐球菌对两性霉素B、氟康唑、5-氟胞嘧啶均高度敏感。结论AIDS患者合并真菌感染率较高,其中常见的是马内菲青霉菌和新生隐球菌。     

衡阳市女性生殖道无乳链球菌的带菌状况及分子特征

目的 了解衡阳市女性生殖道无乳链球菌的带菌状况及分离株的分子特征。方法收集衡阳市3家教学医院的女性生殖道分泌物棉签拭子样本,对其中的无乳链球菌进行分离、鉴定和药敏分析,并对分离株的耐药基因、血清型、菌毛岛类型进行分析。结果无乳链球菌的检出率为0.88%(3/339)。1株分离株保存失败,另外2株分离株HY66和HY9-2均对四环素和红霉素耐药,并携带ermB和tetO耐药基因。此外,HY9-2对克林霉素、左氧氟沙星、加替沙星耐药,还携带tetM和tetL耐药基因。2株分离株的血清型为Ⅲ型,同时携带PI-1和PI-2a菌毛岛。结论衡阳市女性生殖道无乳链球菌的带菌率低。分离株都对红霉素和四环素耐药,并出现了多重耐药菌株。为防治无乳链球菌的感染,应加强无乳链球菌的流行及耐药情况监测。     

2型糖尿病心理社会生物因素相关性研究

目的:探索影响2型糖尿病患者转归的相关心理社会生物因素。方法:自编糖尿病基础知识调查表和一般情况调查表,选用焦虑自评量表(SAS)、抑郁自评量表(SDS)、领悟社会支持量表(PSSS)对70例2型糖尿病患者进行调查评估,检测患者的空腹血糖(FBG)、餐后2h血糖(2PBG)、糖化血红蛋白(HbA1C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDLC)、肌酐和尿酸水平。结果:糖尿病患者的SDS总分和SAS总分均显著高于正常人群(P<0.01)。SAS总分与糖尿病病程呈正相关(r=0.43,P<0.01),与SDS总分呈正相关(r=0.333,P<0.01)。SDS总分与PSSS总分呈正相关(r=0.316,P<0.01),与糖尿病知识知晓率呈负相关(r=-0.284,P<0.05)。PSSS总分与HDLC水平呈正相关(r=0.251,P<0.05)。结论:糖尿病患者的焦虑、抑郁情绪症状均显著高于正常人群;病程越长,焦虑症状越严重。糖尿病防治知识知晓率越高,领悟社会支持的主观体验越好,抑郁症状越少,就越有助于糖、脂代谢改善。     

星形胶质细胞在中枢神经系统中的保护作用

正星形胶质细胞是一把双刃剑,对中枢神经系统(central nervous system, CNS)既有神经毒性作用,同时又有神经保护作用。本文从结构、代谢和抗损伤方面就星形胶质细胞在CNS疾病中的作用及机制做一综述,以对星形胶质细胞的功能有一个更全面的认识。一、结构、代谢及相关功能1.调节脑血流量大脑重量占体质量的2%,而血流却占心排量的12%～15%,可见脑血流量对正常脑功能的发挥有至关重要的作用,而星形胶质细胞是CNS调节脑血流量的主要细胞,故研究星形胶质细胞对脑血流量的调节具有重要意义。     

IL-12缺失雌鼠经泌尿生殖道衣原体上行感染致肾脏病变观察北大核心CSCD

目的了解在Il-12缺失小鼠中衣原体经外生殖道进入肾脏导致肾脏病变情况。方法试验用野生型(wildtype,wt)、IL-12p35KO及IL-12p40KO小鼠,每组10只,经阴道分别接种1×104 IFUs鼠衣原体(MoPn),于感染后第45、87和100d处死小鼠。分离其肾脏、尿道、膀胱、肺、肝、脾、心脏组织,分别加入预冷的SPG,经组织匀浆器匀浆、超声破碎后做倍比稀释。取稀释液感染Hela细胞,培养24h后进行间接免疫荧光试验,计数各组织中衣原体包涵体数量。其余5只小鼠的组织进行HE染色,检测其病理变化。结果感染后第45、87和100d,3种小鼠肝、肺、心脏和脾脏组织中均未检出活的衣原体;而在肾脏、尿道、膀胱组织中除wt小鼠未检出活的衣原体外,IL-12p35KO和IL-12p40KO小鼠均检出衣原体。其中,感染后45d,IL-12p35KO和IL-12p40KO小鼠的肾脏、尿道、膀胱组织中检出的衣原体数量分别为4.12×104、4.30×104、2.88×104和4.54×105、3.48×105、1.21×105;且在87和100d,IL-12p40KO小鼠3种组织的衣原体检出数量为6.92×103、3.0×103、105和2.16×104、30、23,显著高于IL-12p35KO小鼠的35、20、13和32、12、2。对各组小鼠肾脏、尿道、膀胱组织进行病理检测,盲法判断组织病变程度,wt小鼠肾脏几乎无明显病变,IL-12p35KO和IL-12p40KO小鼠肾脏均发生严重积水和脓肿,且各组小鼠膀胱、尿道组织病变程度与肾脏病变程度成正相关。结论雌性小鼠在IL-12缺失情况下,衣原体经生殖道感染后可经泌尿生殖道组织上行感染导致肾脏病变。     

Nrf2调控小胶质细胞功能转化在脑出血后血肿清除中的作用机制

目的 探讨核因子红系相关因子2（Nrf2）介导的小胶质细胞功能转化在脑出血后血肿清除和功能恢复中的作用机制。方法 通过注射Ⅳ型胶原酶复制小鼠脑出血模型。C57BL/6小鼠34只,随机分为对照组、脑出血组、脑出血+红曲素组、脑出血+血脂康组;雄性Nrf2基因敲除小鼠（Nrf2^-/-）C57BL/6小鼠8只,为脑出血+Nrf2^-/-组。采用改良Garcia评分评价神经功能;检测血红蛋白水平;采用Western blotting测定Nrf2、CD80、CD206、促炎因子肿瘤坏死因子（TNF-α）、髓样细胞上表达的I型受体（Trem1）和抗炎因子脑源性神经营养因子（BDNF）、髓样细胞上表达的Ⅱ型受体（Trem2）表达,采用免疫荧光测定Nrf2、CD80、CD206、Trem1和Trem2;采用Pearson法对Trem1、Trem2与改良Garcia评分,Trem2与血红蛋白进行相关性分析。结果 与脑出血组比较,脑出血+红曲素组及脑出血+血脂康组的血红蛋白水平降低（P <0.05）,改良Garcia评分增加（P <0.05）,Trem2、CD206、BDNF相对表达量增加（P <0.05）,Trem1、CD80、TNF-α相对表达量下降（P <0.05）;脑出血+Nrf2^-/-组血红蛋白水平升高（P <0.05）,改良Garcia评分降低（P <0.05）,Trem2、CD206、BDNF相对表达量降低（P <0.05）,Trem1、CD80、TNF-α相对表达量升高（P <0.05）。Trem1蛋白表达与改良Garcia评分呈负相关（r =-0.956,P <0.05）,Trem2蛋白表达与改良Garcia评分呈正相关（r =0.936,P <0.05）。Trem2蛋白表达与血红蛋白呈负相关（r =-0.473,P <0.05）。结论 Nrf2可通过调控小胶质细胞的功能转化,影响脑出血后血肿清除;Nrf2激动剂——红曲素及血脂康可通过上调Trem2、CD206、BDNF的表达强化小胶质细胞的吞噬功能,促进血肿产物的清除并促进神经修复;同时可下调Trem1及CD80、TNF-α的表达,抑制小胶质细胞的炎症反应,减轻出血后血肿及神经毒性而发挥神经保护作用。     

2型糖尿病糖脂代谢及心理因素的相关性研究

2型糖尿病被确认为是一种心身疾病.糖尿病常带来许多社会问题及各种心理障碍和负性情绪.其中最常见为抑郁症状.糖尿病患者普遍存在焦虑,抑郁情绪,其结论已被研究肯定.一般认为糖尿病患者中约有1/4合并抑郁症,高于一般人群.负性情绪不但影响了糖尿病患者的生物代谢,同时也引起治疗配合程度的下降.因此,糖尿病的负性情绪问题正日益受到关注.作者通过对2型糖尿病患者的有关代谢指标及心理因素进行研究探讨,拟对临床识别和治疗糖尿病患者的负性情绪和对糖尿病病情控制方法提出建议.     

盐城市某社区居民新诊断2型糖尿病发生现状及其影响因素

目的 分析盐城市某社区居民新诊断2型糖尿病发生现状及其影响因素,为社区预防2型糖尿病发生提供科学依据。方法 选取2019年9月至2020年8月盐城市盐渎社区18～64周岁常住户籍居民进行全民体检,对新诊断的2型糖尿病患者作为病例组,对同期参与体检的非新诊断2型糖尿病患者作为对照组,按性别、年龄（同龄）进行1∶4匹配,采用多因素条件logistic回归模型分析社区居民新诊断2型糖尿病发生的影响因素。结果 盐城市盐都区盐渎街道18～64周岁居民共完成体检8 107人,体检率为78.31%。筛查出新诊断2型糖尿病患者319例,检出率为3.93%。多因素条件logistic回归分析结果显示,高血压（OR=1.587）、经常锻炼（OR=0.533）、一级亲属糖尿病家族史（OR=2.670）与新诊断2型糖尿病发生有关。结论 盐城市某社区居民新诊断2型糖尿病检出率较低,高血压患病情况、体育锻炼情况、糖尿病家族史是影响因素。