胶原诱导性关节炎大鼠淋巴细胞的过继转移

目的：探讨类风湿性关节炎（RA）发病的免疫学机制以及II型胶原在疾病发生过程中的作用。方法：用鸡II型胶原（CCII）加完全佛氏佐剂（CFA）免疫Wistar大鼠建立胶原诱导性关节炎（CIA）模型，分别用发病大鼠的T淋巴细胞和血清进行过继转移，以ELISA检测外周血中抗CCII抗 体的水平；用病理组织学方法对炎性关节进行分析。结果：成功建立了CIA大鼠模型，发病率为90％，用T淋巴细胞转移的大鼠，可见明显CIA症状，发病率为40％，实验组大鼠外周血中的抗CCII抗体的水平虽较对照组高，但并无显著性意义（P＞0．05），以血清过继转移的大鼠无一发病，但该组外周血中抗CCII抗体的水平明显高于对照组（P＜0．05），组织学鉴定结果可见炎性部位呈典型的CA病变，结论：CIA可以通过淋巴细胞过继转移，机体对I原产生的特异性细胞免疫应答在CIA发生过程中起着重要的作用。为采用T细胞介导的免疫治疗RA提供了实验基础。     

口服耐受预防大鼠复发性类风湿性关节炎的研究

目的建立实验性类风湿性关节炎(RA)的动物模型,研究口服可溶性鸡II型胶原(CCII)诱导免疫耐受对大鼠复发性RA的预防作用.方法以CCII和完全弗氏佐剂免疫Wistar大鼠,建立RA大鼠模型.在大鼠致炎前和反复造病后,口服CCII,观察其对RA复发的预防作用.并以ELISA法对大鼠血清中的抗CCII抗体进行检测.结果在Wistar大鼠成功地诱发了RA,发病率为90%.大鼠在致炎前口服CCII可明显延迟RA的发病时间并降低RA的发病率,且大鼠RA的临床症状也明显减轻.而耐受大鼠由CCII引起的迟发性超敏反应(DTH)明显受到抑制.ELISA检测结果显示口服可溶性CCII对大鼠体内抗CCII抗体的产生有一定的抑制作用.结论口服CCII可诱导特异性免疫耐受,从而对大鼠RA的发生有着明显的预防作用.     

口服鸡Ⅱ型胶原治疗大鼠实验性类风湿性关节炎的研究

本文研究口服鸡Ⅱ型胶原（CCⅡ）治疗大鼠类风湿性关节炎的作用。以CCⅡ和完全弗氏佐剂免疫Wistar大鼠,建立大鼠的类风湿性关节炎（RA）模型,用CCⅡ进行口服,观察实验组和对照组动物关节炎的发病程度。并以ELISA法对发病大鼠血清中的抗CCⅡ抗体的水平进行检测。结果表明,口服CCⅡ可以减轻大鼠关节炎的发病程度。其中口服6μg、60μgCCⅡ的实验组大鼠关节炎指数均对照组明显减低,且差异有显著性意义（P＜0．01;P＜0．05）。而口服600μgCCⅡ的实验组大鼠关节炎指数虽较对照组大鼠降低,胆二者相比,无显著性差异（P＞0．05）。ELISA检测结果显示,口服低剂量（6μg和60μg）可溶性CCⅡ对大鼠体抗CCⅡ抗体的产生有一定的抑制作用。口服CCⅡ对关节炎大鼠的发病程度有较明显的抑制作用。为应用口服耐受治疗RA等自身免疫性疾病提供了实验基础。     

空肠弯曲菌HSP60家族成员的鉴定

用针对ＨＳＰ６０保守区的二株单抗ⅡＨ９和ＭＬ－３０进行了Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎｇ和ＥＬＩＳＡ试验，发现空肠弯曲菌ＣＪ－Ｓ１３１株４３ｋＤ通道蛋白属ＨＳＰ６０家族成员，命名其为空弯菌ＨＳＰ４３。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和薄层扫描显示ＨＳＰ４３是主要菌体蛋白。虽然ＨＳＰ极端保守，但用ＣＪ－Ｓ１３ｌｌｙｓａｔｅ免疫小鼠后，发现最早诱导的抗体是针对ＨＳＰ４３的，并且这种抗体活性在随后８０ｄ的观察期间一直维持较高活性。此结果为研究感染诱致自身免疫病分子机理提供了新的线索。     

口服MBP诱导免疫耐受预防实验性变态反应性脑脊髓炎的研究

目的：探讨口服耐受对实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)的预防作用。方法：给予健康Lewis大鼠口服MBP抗原诱导免疫耐受，随后以MBP CFA于足底免疫，检测口服耐受对实验大鼠EAE发病的预防作用及对MBP特异性淋转率、细胞因子和抗MBP抗体等免疫功能的变化情况。结果：致病组EAE发病率为91．7％，MBP特异性淋转率、IFN-γ与TNF-α含量升高，IL-10降低；口服耐受组EAE发病率为21．4％，MBP特异性淋转率、IFN-γ、TNF-α回复至正常，IL-10含量低于正常。MBP抗体水平两组均比正常对照组高。结论：口服耐受可降低宿主自身免疫反应性，减低EAE的发病率。     

人Fas配体蛋白在大肠杆菌中的融合表达与应用

目的：在大肠杆菌中融合表达人Fas配体蛋白。方法：应用RT-PCR技术，从激活的人外周血淋巴细胞中提取总RNA，扩增Fas配体cDNA，克隆入PCR2.1载体，测序验证后，克隆入带有组氨酸盒的表达载体pQE-31，在大肠杆菌中表达，经亲和层析柱纯化后，用SDS-PAGE和Western blot鉴定表达产物。结果：表达的融合蛋白为人Fas配体，其相对分子质量（Mr)为40000。；经透析复性后，具有诱导Jurkat细胞凋亡的作用，用该蛋白分子免疫BALB/c小鼠制备抗血清，以间接ELISA检测了部分自身免疫病与肿瘤患者血清中可溶性的F 苛的含量。结果与进口试剂盒的灵敏性相似。结论：获得FasL单克隆抗体，深入研究FasL的应用提供了材料。     

环磷酰胺和嗜水气单胞菌对暗纹东方免疫抑制的研究

对暗纹东方分别注射 8、 0 8、 0 0 8mg/kg·bw的环磷酰胺 ,5d一次 ,连续 3次 ,并与一次性注射嗜水气单胞菌 (1× 1 0 5CFU/kg·bw )相比较 ,研究其对暗纹东方免疫功能的影响。结果显示 ,注射适当浓度的环磷酰胺和嗜水气单胞菌可明显减弱暗纹东方肝胰脏溶菌酶活性、脾脏NK细胞杀伤率、脾脏B淋巴细胞转化能力 ,显著降低白细胞吞噬指数和血清干扰素 (IFN α )含量 (P <0 0 5 )。选择 8mg/kg·bw环磷酰胺和 1× 1 0 5CFU/kg·bw的嗜水气单胞菌作为注射浓度可以抑制暗纹东方的免疫功能。相比之下 ,在试验范围内 ,环磷酰胺对暗纹东方免疫能力的抑制程度更大 ,范围更广 ,稳定性更好。     

IL—12以及IL—12P40对子宫内异症患者NK细胞功能的免疫调节

目的通过观察正常人及子宫内膜异位症(EM)患者外周血及腹腔液中IL-12、IL-12P40含量变化,分析其分子诱导NK细胞对子宫内膜细胞的细胞毒效应的影响,探讨IL-12、IL-12P40分子与EM患者NK细胞功能低下的相关性.方法ELISA酶联免疫检测IL-12、IL-12P40含量以及MTT释放法检测NK细胞毒活性.结果①EM患者腹腔上清液可使正常人外周血NK细胞杀伤活性(16.80%±3.6%)明显下降(8.37%±4.5% )(P＜0.05).② EM患者IL-12含量血清为66.38±12.6 pg/ml,低于对照组84.97±13.7 pg/ml(P＜0.05);腹腔液中为77.76±14.6 pg/ml,低于对照组106.92±10.7 pg/ml(P＜0.05).③EM患者IL-12P40含量血清为35.64±10.6 pg/ml, 与对照组无明显差异;腹腔液含量为79.76±12.6 pg/ml, 高于对照组40.54±10.0 pg/ml(P＜0.05), 并与疾病的程度呈负相关.④IL-12能增强NK细胞对子宫内膜细胞的杀伤,并呈剂量依赖.在10 ng/ml浓度诱导后杀伤率为31.90%,高于对照组的16.80%.⑤IL-12P40能拮抗IL-12对NK细胞活性的诱导,当加入IL-12P40后,使IL-12诱导的活性(29.3%)下降为19.36%.结论子宫内膜异位症患者腹腔液中IL-12P40含量的增高可能与NK细胞功能下降有关.     

胃癌和肺癌病人PBMC产生抗肿瘤细胞因子能力变化的研究

应用＾３Ｈ－ＴｄＲ参入及病变抑制等测定１０名正常人和７２例肿瘤病人ＰＢＭＣ受ＰＨＡ刺激后产生ＩＬ－２、ＩＦＮ－γ、ＴＮＦ的能力扩手术切除肿瘤后产生三种细胞因子的水平。结果发现：１）胃癌、肺癌和其它肿瘤患者ＰＢＭＣ产生ＩＬ－２、ＩＦＮ－γ能力极度降低，只有正常人的１／２９￣１／３５和１／１６￣１／１９；２）胃癌、肺癌和其它肿瘤患者ＰＢＭＣ产生ＴＮＦ能力明显增加，是正常人的８￣１２倍；３）手术切除肿瘤     

HLA-G分子在体外抑制NK细胞杀伤效应的研究

在获得稳定表达HLA G分子的K5 62细胞克隆的基础上 ,观察 4h及 16h不同效靶比例时NK细胞对靶细胞的杀伤效应 ,结果显示 ,NK细胞对转染HLA G基因的K5 62细胞的杀伤作用较未转染细胞明显降低 (P <0 0 1) ,用W6/ 32及BFL 1单克隆抗体阻断HLA G分子 ,可以恢复NK细胞的杀伤活性。用Y9/Z2 70及XA185 /Z2 70单抗特异性阻断抑制性受体CD94/NKG2A ,未观察到明显影响