去细胞坐骨神经天然支架的成分分析

背景：目前周围神经去细胞的方法较多,应用较多的是化学萃取法和液氮冻融法,但是化学萃取法耗时较长,而液氮冻融法则去除细胞不彻底。作者在查阅大量文献和多次实践的基础上,最终确定了冻融＋化学萃取＋机械振荡的优化法对坐骨神经进行脱细胞处理。目的：对优化法制备的去细胞坐骨神经天然支架进行形态学分析,并对其成分进行鉴定。方法：取Wistar大鼠双侧坐骨神经,随机分为2组,对照组不做特殊处理,实验组用冻融＋化学萃取＋机械振荡的优化法进行脱细胞处理。结果与结论：用优化法制备的去细胞坐骨神经天然支架呈三维管状立体结构,许旺细胞、髓鞘及轴突去除完全。经免疫组化鉴定,Ⅰ型、Ⅲ型胶原和层粘连蛋白等细胞外基质主要成分得到保留。     

去细胞坐骨神经天然支架的成分分析

背景：目前周围神经去细胞的方法较多,应用较多的是化学萃取法和液氮冻融法,但是化学萃取法耗时较长,而液氮冻融法则去除细胞不彻底。作者在查阅大量文献和多次实践的基础上,最终确定了冻融+化学萃取+机械振荡的优化法对坐骨神经进行脱细胞处理。 目的：对优化法制备的去细胞坐骨神经天然支架进行形态学分析,并对其成分进行鉴定。 方法：取Wistar大鼠双侧坐骨神经,随机分为2组,对照组不做特殊处理,实验组用冻融+化学萃取+机械振荡的优化法进行脱细胞处理。 结果与结论：用优化法制备的去细胞坐骨神经天然支架呈三维管状立体结构,许旺细胞、髓鞘及轴突去除完全。经免疫组化鉴定,Ⅰ型、Ⅲ型胶原和层粘连蛋白等细胞外基质主要成分得到保留。     

两种方法诱导骨髓基质细胞向成骨表型分化的比较

目的探讨骨髓基质细胞分化为成骨表型的诱导条件。方法体外扩增大鼠骨髓基质细胞,将第3代细胞分为A组(对照组)、B组(加入地塞米松、β-甘油磷酸钠、维生素C、1,25-二羟维生素D3的诱导组)和C组(在B组基础上加大鼠长骨骨折血肿浸出液诱导组),于诱导后第5、8、11天观察细胞形态变化,用免疫组织化学方法检测诱导细胞的成骨样细胞标志分子(碱性磷酸酶、Ⅰ型胶原、骨钙素),并用von Kossa法检测培养物钙化情况。结果诱导大鼠骨髓基质细胞经小分子诱导培养5d后,部分发生形态学变化,碱性磷酸酶和I型胶原呈弱阳性表达,无钙质沉积;诱导8d后,发生形态学变化的细胞增多,呈集落生长,碱性磷酸酶和I型胶原表达增强,钙质沉积仍不明显;11d后,骨钙素开始表达,且出现钙质沉积。C组细胞表型变化与B组类似,但发生变化的细胞和钙质沉积的数量更多。结论骨髓基质细胞在体外可以被小分子物质诱导为成骨表型;骨折血肿浸出液能够加强这一作用,可作为一种诱导成骨的添加成分。     

体外诱导骨髓基质细胞分化成神经细胞

骨髓基质细胞 (BMSC)具有多分化潜能 ,可以在体外诱导生成骨骼肌细胞、心肌细胞、成骨细胞、神经胶质细胞和神经元样细胞。使用来源于骨髓的神经细胞治疗神经系统的变性、外伤或遗传性疾病将成为可能。寻找和探索恰当的细胞因子和培养条件 ,将BMSC诱导分化成合适的神经前体细胞 ,是神经细胞移植的前提条件。1　骨髓基质细胞与神经干细胞的生物学　特性　　目前认为骨髓包含 2种细胞群 :造血细胞系和骨髓基质细胞。事实表明 ,2者不只是共同存在而且在功能上相互协作 ,BMSC为造血干细胞逐渐生成成熟血细胞提供了结构和功能上的支持。BMS…     

重症颅脑损伤减压术病人血清视锥蛋白样蛋白-1、陷窝蛋白-1水平变化及其对疾病转归的影响

目的 探讨重症颅脑损伤减压术病人血清视锥蛋白样蛋白-1(VILIP-1)、陷窝蛋白-1(Cav-1)水平变化及其对疾病转归的影响。方法 选取2019年7月～2022年7月我院收治的108例重症颅脑损伤减压术病人作为研究组,另外选取同时期来我院体检的120例健康人作为健康组。术后连续随访6个月,根据格拉斯哥预后评分(GOS)情况分为预后良好组(GOS=4～5分,82例)和预后不良组(GOS=1～3分,26例)。采用酶联免疫吸附法检测血清VILIP-1、Cav-1水平;采用受试者工作特性曲线(ROC)评估血清VILIP-1、Cav-1对病人预后的诊断价值;采用多因素Logistic回归分析病人预后相关因素。结果 研究组血清VILIP-1、Cav-1水平高于健康组,差异有统计学意义(P<0.05)。预后不良组血清VILIP-1、Cav-1水平高于预后良好组,差异有统计学意义(P<0.05)。血清VILIP-1、Cav-1预测重症颅脑损伤减压术病人预后的AUC(95%CI)分别为0.848(0.797～0.899)、0.817(0.766～0.868),二者联合检测的AUC(95%...     

纳米铁粒子标记人骨髓基质细胞及移植后MRI示踪的临床研究

目的探讨应用超顺磁性氧化铁（SPIO）纳米粒子标记骨髓基质细胞的方法、SPIO对骨髓基质细胞活性的影响及自体移植后用MRI进行体内示踪的可行性。方法从患者体内分离出骨髓基质细胞并进行培养、传代，移植前用SPIO标记，普鲁蓝染色法检测细胞内的纳米铁粒子，并测定SPIO对骨髓基质细胞活性的影响，通过手术将标记细胞和非标记细胞自体移植入患者颈髓的不同部位并进行MRI检查。结果普鲁蓝染色表明纳米铁粒子在细胞内呈现蓝色颗粒，标记细胞组和非标记组活性无明显差异。移植后2W行颈髓MRI检查显示，在移植标记磁性细胞的一端，可见到明显的低信号改变，移植未标记细胞的部位没有信号改变。结论SPIO可以标记骨髓基质细胞且对细胞活性无影响，标记细胞移植后在体内能观察到明显的MRI信号改变，可对骨髓基质细胞移植后在活体内的迁徙情况提供影像学证据。     

体外诱导成人骨髓基质细胞分化为神经元样细胞

目的探讨成人骨髓基质细胞(BMSCs)的生物学特性及诱导为神经元样细胞的方法.方法采用Ficoll-Paque液(1.077×103g/L)从成人骨髓中分离BMSC,体外扩增,以碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、表皮生长因子(EGF)、全反式维甲酸(ATRA)、联丁酰基环腺苷酸(dbcAMP)为诱导剂,诱导期间观察细胞形态和数目的变化,并通过免疫细胞化学鉴定神经元烯醇化酶(NSE)、巢蛋白(nestin)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达情况.结果此诱导条件下95%的细胞成为神经元样细胞,免疫组织化学检查显示这些细胞表达NSE、GFAP或nestin.结论bFGF和EGF、ATRA、dbcAMP能诱导成人BMSCs分化为神经元样细胞,而且具有较高的阳性转化率.     

磁性纳米材料的研究现状及其在神经干细胞移植中的应用

目前 ,常用的磁性纳米材料如三氧化二铁(Fe2 O3)、四氧化三铁 (Fe3O4)、铁钴合金等 ,这些磁性纳米材料具有较好的磁响应性 ,采用适当的方式可以方便地得到纳米磁性材料 ,最小的平均粒度只有纳米 ,粒度一般呈正态分布。磁性纳米材料经过包衣等处理后可作为超顺磁性氧化铁纳米材料用于磁共振成像 ,在疾病诊断上有重要用途。超顺磁性氧化铁粒子 (SPIOs)是具有组织特异性高、更安全的新型的磁共振阴性对比剂 ,目前主要用于富含网状内皮系统的肝、肺、淋巴结、骨髓等增强成像 ,具有其独特的临床诊断价值[2 ] ,但对于网状内皮系统以外的其他组…