替莫唑胺对神经胶质瘤TJ905细胞增殖特性和迁移能力的影响

目的探讨替莫唑胺(TMZ)对人胶质瘤TJ905细胞增殖和迁移能力的影响。方法培养TJ905细胞,分别应用不同浓度的TMZ(0、50、100、200、400μmol·L-1)干预TJ905细胞,干预不同时间(24、48、72 h)后收集细胞,应用Cell Counting Kit-8检测药物干预前后细胞增殖活性变化;细胞划痕实验检测400μmol·L-1TMZ对TJ905细胞迁移能力的影响。结果随着TMZ浓度的升高和培养时间的延长,TJ905细胞的密度降低,细胞出现皱缩,增殖受到明显抑制,并可见散在的细胞碎片;TJ905细胞存活率随着培养液中TMZ浓度的升高和培养时间的延长而降低(P<0.05);400μmol·L-1TMZ的培养液培养24、48和72 h后TJ905细胞迁移度均低于对照组(P<0.05)。结论 TMZ能有效抑制TJ905细胞增殖和迁移。     

《组织》和《器官》两个概念应修改

《组织学与胚胎学》新教材中,部分专业名词有所变更,使其概念更清楚,也更加好记。在新教材的启发下,我 对组织学部分名词进行推敲,感到《组织》和《器官》这两个名词概念不够准确,应当进行修改。以往不少教材对组织的概念是这样写的:“组织是由形态近似、功能相关的细胞和细胞间质所组成”。实际上这样的《组织》几乎是不存在的。我们知道,上皮组织内有游离神经末梢,疏松结缔组织内有毛细血管和神经等;脂肪组织与骨组织等内有疏松结缔组织、毛细血管和神经等;肌组织的肌细胞之间含有少量结缔组织、血管、淋巴管及神经;神经组织里也有结缔组织和毛细血管。所以大部分组织都包含其他组织甚至器官,四大基本组织的大部分本身就是器官。我认为《组织》这个概念可以取消,研究人体的微细结构就是细胞和器官。如果硬要保留《组织》这个概念,只能勉强凑合写成:“很多功能相关的细胞以不同的形式结合,常有血管、神经等参与,并在大多数器官中都会出现的微细结构称为组织或基本组织”。建议将《基本组织》这一章     

TMZ对胶质瘤U251细胞及其干细胞TNF-α影响的体内研究

目的利用胶质瘤细胞及其干细胞制作裸鼠脑内种植瘤模型,动物水平研究替莫唑胺对胶质瘤细胞及其干细胞裸鼠脑内种植瘤肿瘤坏死因子α(TNF-α)表达的影响。方法免疫磁珠法分选CDl33+干细胞,脑立体定向制作裸鼠脑内种植瘤模型,不同浓度替莫唑胺干预,观察裸鼠生长行为学变化、肿瘤的病理学特征,荧光实时定量逆转录酶-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测TNF-α表达。结果肿瘤组织的病理学观察发现干细胞较U251细胞具有更高的侵袭性。RT-PCR检测发现,干细胞中TNF-αmRNA表达量显著高于U251细胞(P0.01)。替莫唑胺(TMZ)对U251细胞及其干细胞TNF-αmRNA的表达产生抑制作用。60μmol/L TMZ干预时,干细胞TNF-αmRNA表达量显著低于U251细胞(P0.01)。结论胶质瘤干细胞较U251细胞具有更强的化疗耐药性,这可能是胶质瘤化疗耐药的机制。     

胃癌多药耐药细胞端粒酶活性变化及其机制探讨

目的：探讨人胃腺癌细胞系SGC7901及其多药耐药亚系SGC7901／VCR中端粒酶活性变化及其机制，为胃癌多药耐药机制研究提供新靶点。方法：采用TRAP银染方法检测SGC7901和SGC7901／VCR中端粒酶的活性；应用反转录聚合酶链反应（RT—PCR）技术检测SGC7901和SGC7901／VCR中端粒酶hTERT、Madl及c—myctuRNA的表达；将hTERT启动子构建的报告基因质粒（pGL3B—TRTP），转染入SGC7901和SGC7901／VCR中，应用双荧光素酶报告基因检测系统（Dual—Luciferasereporterassaysystem）检测端粒酶hTERT启动子的活性。结果：SGC7901／VCR细胞中的端粒酶活性及端粒酶hTERTmRNA表达均显著高于SGC7901细胞，且SGC7901／VCR中hTERT启动子的活性显著高于SGC7901，在SGC7901／VCR中捡测到c—mycmRNA的表达，但未检测到MadlmRNA的表达，而在SGC7901细胞中分别检测到MadlmRNA和c—mycmRNA的表达，且SGC7901细胞中c—mycmRNA的表达也高于SGC7901／VCR。结论：端粒酶活性及端粒酶hTERT转录水平升高与胃癌细胞的多药耐药性密切相关，转录因子Madl／c—myc的表达高低是其作用机制之一。     

TJ905胶质瘤细胞系中脑肿瘤干细胞的培养、分离与鉴定

目的培养恶性胶质瘤TJ905细胞,并从中分离、培养和鉴定肿瘤干细胞,观察干细胞生长特征,为脑肿瘤干细胞的进一步研究奠定基础。方法将TJ905细胞置于含血清培养基中培养;将TJ905细胞置于含生长因子的无血清培养基中培养,待其形成悬浮生长的细胞球后用免疫磁珠分离获取CD133+细胞。用细胞免疫荧光染色对肿瘤干细胞及其分化细胞进行鉴定。结果在恶性胶质瘤细胞系TJ905中成功分离出肿瘤干细胞,培养于无血清培养液中,细胞呈球形、悬浮生长,具有很强的繁殖与自我更新能力;将该细胞置于含血清的培基中可分化;免疫荧光染色显示脑肿瘤干细胞中神经上皮干细胞蛋白(Nestin)表达阳性。结论培养的恶性胶质瘤细胞系TJ905中有脑肿瘤干细胞的存在,并且能在体外将其培养、分离及诱导分化,可为肿瘤干细胞的研究提供便利条件。     

肝癌组织中雌激素受体基因启动子甲基化及临床研究

目的：研究原发性肝细胞癌（hepatocellular carcinoma,HCC）组织中ER基因启动子甲基化修饰与临床病理特征间的关系,同时观察5-杂氮胞苷对ER mRNA表达的影响.方法：分别采用MSP和RT-PCR方法检测30例HCC及癌旁组织中ER基因启动子甲基化修饰状况及ER mRNA的表达状况,并用5-杂氮胞苷处理肝癌细胞系SMMC-7721和HepG2.结果：30例HCC组织中ER启动子甲基化修饰阳性率为60.0% （18/30）,而30例癌旁组织中ER基因启动子甲基化修饰阳性率为30.0%（9/30）,两者差异有统计学意义,χ^2=5.46,P= 0.037.30例HCC组织中ER mRNA阳性表达12例（40.0%）,其中甲基化组织和未甲基化组织中ER mRNA表达率分别为22.2%和66.7%.ER启动子甲基化修饰与mRNA表达呈负性相关,χ^2=5.93,P=0.024.同时,ER启动子区甲基化修饰与肝癌患者血清AFP含量增高呈正相关,χ^2=12.13,P=0.001.细胞培养结果提示低浓度的5-杂氮胞苷可诱导肝癌细胞系ER mRNA重新表达.结论：肝癌组织中ER启动子甲基化修饰是个频繁事件,因此沉默ER基因的表达有可能促进肝癌的发展.