MicroRNA-134在FMR1基因敲除鼠脑组织中的表达及意义

目的 观察脆性X综合征(FXS)模型小鼠不同发育时期脑组织中microRNA-134(miR-134)的表达,明确miR-134的表达特点及脆性X智力低下蛋白(FMRP)缺失是否导致miR-134转录的改变. 方法 应用荧光实时定量PCR检测FVB近交系雄性0 d、4、6周(W)龄FMR1基因敲除型(KO)(KO0d、KO4w、KO6w)和同龄野生型(WT)(WT0d、WT4w、WT6w)小鼠脑组织中miR-134的表达(n=5). 结果同龄KO与WT小鼠miR-134的转录表达量差异无统计学意义(P＞0.05);KO6w小鼠脑组织miR-134的转录表达量低于KO0d和KO2w小鼠,WT6w小鼠脑组织miR-134的转录表达量也低于WT0d和WT2w小鼠,差异均有统计学意义(P＜0.05). 结论 FMRp的缺失并未影响miR-134的转录;miR-134的转录表达量在神经系统发育期保持着较高水平,至成年期则下降,提示其在调控神经系统发育中可能起着重要作用.     

MicroRNA调控通路与脆性X综合征

本文首先介绍了脆性智力低下蛋白在脆性X综合征发病机制的作用,然后介绍microRNA调控通路研究概况,特别是最近几年其在神经系统疾病研究的一些进展,并进一步阐述microRNA调控通路可能在脆性X综合征的发病机制及进展,从而使读者更深入的了解脆性X综合征的分子发病机制,并通过两者之间关系的研究可能为该病提供新的治疗方法与手段。     

一例晚期婴儿型神经元蜡样质脂褐素沉积病的临床、遗传和脑超微结构特点

目的 通过分析1例晚期婴儿型神经元蜡样质脂褐素沉积病(LINCL)病例.探讨LINCL的临床、遗传和病理特点. 方法 收集1例L1NCL患者的临床表现、家族史资料,并对其脑电图(EEG)、影像学和脑组织病理活检结果进行分析. 结果 EEG显示弥漫背景脑电慢化,间歇期阵发全面性棘慢波及尖慢波节律.头颅MRI检查发现患儿及其胞兄脑萎缩尤以小脑萎缩明显.脑组织活检光镜下见大脑皮层弥漫性损害,可见变性、萎缩和未成熟神经元.变性及萎缩的神经元内可见嗜银颗粒沉积,电镜下神经元胞浆中可见大量脂褐素样结构. 结论 此例患者的临床和病理改变符合LINCL的诊断,但其特殊的家族遗传史及病理特征提示其可能为新的LINCL变异型.     

血小板和超敏C反应蛋白检测对川崎病的诊断价值

目的 评估血小板(PLT)和超敏C反应蛋白(hs-CRP)在川崎病(KD)患儿中的变化并探讨其在KD患儿早期诊断的临床意义.方法 检测56例KD患儿(KD组)治疗前(发热1周内)及予丙种球蛋白规范治疗2周后的PLT及hsCRP,与57例症状相似的菲KD患儿(对照组)对比,进而分析PLT及hs-CRP与KD的关系.结果 ...     

MicroRNA-134在缺氧预处理新生大鼠缺氧缺血脑组织中的表达及意义

目的：观察microRNA-134（miR-134）在缺氧预处理新生大鼠缺氧缺血后不同时期脑组织中的表达差异及其表达的特点及意义。方法：采用7日龄SD大鼠制备新生大鼠缺血缺氧性脑损伤动物模型。完全随机分为单纯缺血缺氧组、假手术对照组、缺氧预处理组（各18只）。3组又各分为处理后0h、1d、7d组（n=6）。每组6只用于荧光实时定量聚合酶链反应（qRT-PCR）观察miR-134转录量的差异。结果：miR-134在各组脑组织转录的表达量,单纯缺血缺氧组0h（5．061±0．761）、1d（4．120±0．685）、7d（2．873±0．397）;缺氧预处理组0h（3．341±0．575）、1d（2．769±0．351）、7d（1．658±0．290）;假手术组0h（6．617±1．988）、1d（5,798±1．116）、7d（5．984±1．879）。miR-134在单纯缺血缺氧组及缺氧预处理组脑组织的表达显著比假手术组减少（P〈0．01）,在同一时间段上,缺氧预处理组比单纯缺血缺氧组miR-134的表达明显减少（P〈0．01）。同样在缺血缺氧后,无论是单纯缺血缺氧组还是缺氧处理组,miR-134的表达随着0h、1、7d的推移表达渐减少（P〈0．05）。结论：miR-134的表达在调控神经系统发育中可能起着重要作用,缺氧预处理对新生大鼠缺血缺氧性脑损伤存在保护作用。     

FMR1基因敲除小鼠脑组织微白蛋白表达的改变及其意义

目的 探讨微白蛋白(PV)阳性中间神经元在脆性X综合征(FXS)癫痫易感性增加中的作用. 方法 应用免疫组织化学染色检测FVB近交系雄性2、4、6 W龄FMR1基因敲除型(KO)(KO2W、KO4W、KO6W)和同龄野生型(WT)(WT2W、WT4W、WT6W)小鼠大脑纹状皮质、颞听皮质、梨状皮质及海马CA1区、CA3区、齿状回中PV的表达(n=6);应用Western blot法检测上述小鼠大脑皮层、海马组织PV的含量(n=6). 结果 KO2W、KO44W小鼠的大脑纹状皮质、颞听皮质、梨状皮质、海马CA1和CA3区PV阳性中间神经元的数量分别较WT2W、WT4-小鼠减少,差异有统计学意义(P<0.05);KO2W和KO4W小鼠大脑皮层、海马中PV含量分别较WT2W、WT4W小鼠减少,差异有统计学意义(P<0.05). 结论 PV阳性中间神经元及PV含量的减少.可能是引起FXS模型鼠癫痫易感性增加的主要原因.     

缺氧预处理新生大鼠缺氧缺血脑组织中Limk1蛋白表达

目的：观察Limk1蛋白在缺氧预处理后不同时间段新生大鼠缺氧缺血和对照组脑组织中的表达差异。方法：采用7日龄SD大鼠54只,随机分为于单纯缺血缺氧组18只,假手术对照组18只,缺氧预处理组18只。各组再分为处理后0h、1d、7d组,每组各6只。用免疫组化法检测观察Limk1在不同组脑组织各部位的表达差异。结果：Limk1蛋白阳性神经元在各组的吸光度：单纯缺血缺氧组0h（21．658±3．990）、1d（30．369±5．156）、7d（41．546±5．677）;缺氧预处理组0h（30．261±4．266）、1d（43．129±5．785）、7d（56．309±7．198）;假手术组0h（14．113±2．983）、1d（16,098±3．116）、7d（15．983±3．009）。在单纯缺血缺氧组及缺氧预处理组脑组织的表达比假手术组增多（P〈0．01）。在同一时间段上,缺氧预处理组比单纯缺血缺氧组Limk1的表达明显增多（P〈0．01）。同样在缺血缺氧后,无论是单纯缺血缺氧组还是缺氧处理组,Limk1的表达随着0h、1、7d的推移表达渐增多（P〈0．05）。结论：缺氧预处理能够增加新生大鼠缺血缺氧性脑组织中Limk1的表达,其提示缺氧预处理后的新生大鼠缺血缺氧的脑组织可能存在更强的神经重塑作用。     

Limk1在FMR1基因敲除小鼠脑组织的表达及意义

目的：通过免疫组化方法观察LIM-kinase 1（Limk1）在不同年龄组的FMR1基因敲除鼠（FMR1 knockout mouse,KO）和野生鼠（wild type mouse,WT）脑组织不同部位的表达差异.方法：取FVB品系新生和生后2、6周KO鼠（KO0d、KO2周和KO6周）,并分别与同龄WT鼠作对照.每组6只通过免疫组化染色,观察Limk1在不同年龄组的KO和WT小鼠脑组织各部位的表达差异.结果：Limk1在新生鼠的海马、皮层、丘脑、小脑表达丰富,以染色阳性纤维为主,染色阳性细胞少见.生后2周、6周小鼠的大脑皮质和海马仅见少量散在弱阳性细胞表达,但在丘脑未定带、腹后外侧核,小脑蒲肯野细胞和脑干前庭蜗神经核可见强阳性细胞表达.各年龄组KO与WT小鼠Limk1在脑区的分布特点基本一致.KO0d、KO2周及KO6周组小脑、蜗神经核Limk1强阳性表达脑区的平均光密度值以及KO2W及KO6W组丘脑部位的阳性细胞计数均高于同龄WT组,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论：Limk1在KO与WT小鼠脑组织的表达均有着明显的时空特异性,FMRP能负性调控Limk1表达.     

当归注射液对大鼠慢性肺动脉高压的影响

目的 探讨当归注射液对大鼠慢性肺动脉高压的影响.方法 30只雄性Sprague-Dawley大鼠随机分成对照组、低氧组、当归保护组,每组10只.当归保护组每天缺氧前腹腔注射25%当归注射液[10mg/(kg · d)];对照组、低氧组于每天缺氧前腹腔注射等量生理盐水.常压低氧建立大鼠肺动脉高压模型,4周末测各组大鼠平均肺动脉压(mPAP)、应用免疫组织化学法和图像分析技术定量检测大鼠肺小动脉管壁和内皮细胞增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)、诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)的表达水平;同时肺小动脉行HE染色,测定肺小动脉管壁面积占肺小动脉总面积的百分比(wA%).结果 对照组、低氧组、当归保护组的mPAP分别为10.50±1.90、35.36±9.11、18.32±2.30(mm Hg);wA%分别为52.71±5.16、82.38±8.43、64.58±9.54(%),低氧组的mPAP、wA%均高于对照组(P<0.01),而当归保护组mPAP、wA%均明显低于低氧组(P<0.01).对照组、低氧组、当归保护组肺小动脉PCNA表达水平分别为3.15±1.10、24.50±5.72、12.67±3.46(%),缺氧组显著高于对照组(P<0.01),而当归保护组明显低于低氧组(P<0.01).对照组、低氧组、当归保护组肺小动脉血管内皮iNOS蛋白表达水平分别为2.13±1.01、17.33±3.53、37.50±7.04(%),低氧组显著高于对照组(P<0.01),而当归保护组明显高于低氧组和对照组(P<0.01).结论 当归注射液可以降低慢性低氧所致肺动脉高压,其机制与抑制肺小动脉PCNA表达、增加肺小动脉iNOS表达水平有关.

Abstract：

Objective To investigate the effects of angelica solution on chronic hypoxic pulmonary hypertension in rats.Methods Thirty SD rats were randomized into normoxic group,hypoxic group and angelica solution-protected group.The model of rat chronic hypoxic pulmonary hypertension was made by method of isobaric hypoxia.Angelica solution were injected before hypoxia,while the other two groups were injected normal saline.After 28d of hypoxia,pulmonary artery pressure were measured.Expressions of proliferating cell nuclear antigen (PCNA) and inducible nitric oxide synthase (iNOS) in pulmonary artery were detected by immunohistochemical staining.The index of wall thickness of rat pulmonary arteriole-percentage of the wall area in the total vascular area(wA%) were measured by a computerized image analyzer.Results The mean pulmonary artery pressure (mPAP) of normoxic group,hypoxic group and angelica solution-protected group were10.50±1.90,35.36±9.11,18.32±2.30 (mm Hg);wA% of the three groups were 52.71±5.16,82.38±8.43,64.58±9.54 (%),mPAP and wA% were significantly higher in the hypoxic group than those in the normoxic group (P<0.01) and angelica solution-protected group (P<0.01).PCNA expression of normoxic group,hypoxic group and angelica solution-protected group were 3.15±1.10,24.50±5.72,12.67±3.46 (%).The PCNA expression in the pulmonary artery was significantly higher in the hypoxic group than those in the normoxic group (P<0.01) and in the angelica solution-protected group (P<0.01).iNOS expression of normoxic group,hypoxic group and angelica solution-protected group were 2.13±1.01,17.33±3.53,37.50±7.04 (%).iNOS expression in the pulmonary artery was higher in the hypoxic group than those in normoxic group (P<0.01),and angelica significantly increased iNOS expression in comparison with the normoxic and hypoxic groups (P<0.01).Conclusion Angelica solution alleviates chronically hypoxia induced pulmonary hypertension in rats by inhibiting the espression of PCNA in pulmonary artery and up-regulating the expression of iNOS.