钙通道在SIN-1诱导大鼠海马神经元凋亡中的作用

摘要 背景 氯通道参与SIN-1引起的大鼠海马神经元凋亡过程已有报道,而钙通道在这种类型的凋亡中的作用目前未见报道。目的 探讨钙通道在SIN-1诱导大鼠海马神经元凋亡中的作用。方法 方法 离体培养12天的SD大鼠海马神经元,随机分为正常对照组、3-吗啉斯德酮胺(SIN-1)处理组: (SIN-1 1.0 mmol •L-1）、SIN-1处理后加4-4-二异硫氰基苯-2,2’-二磺酸（DIDS,0.1 mmol •L-1）、4-乙酰氨基-4’-异氰酸芪-2,2’-二磺酸(SITS, 1.0 mmol •L-1)、SIN-1处理后加氯化镉（CdCl2）、SIN-1处理后加SITS和CdCl2及SIN-1处理后加DIDS和CdCl2。药物作用时间为18h。DNA荧光染色观察神经元形态及检测凋亡数目的变化,MTT法检测神经元的生存率。结果 SIN-1可以诱导42.32±1.34%的神经元死亡,与正常对照组相比有显著差异（P<0.05）,SIN-1处理的神经元若用氯通道阻断剂SITS或DIDS,生存率分别为87.33±2.03%和83.23±1.01%。SIN-1处理的神经元单独用CdCl2或CdCl2与SITS或DIDS合并使用时,细胞生存率分别为：66.39±2.09%、88.15±1.13%和83.16±2.00%。DNA荧光染色显示,SIN-1处理的神经元若用氯通道阻断剂可以明显减少凋亡百分数,而钙通道阻断剂CdCl2没有明显的抗凋亡作用。结论 氯通道可能参与了SIN-1诱导的大鼠海马神经元凋亡,而钙通道的作用不大。     

猪霍乱沙门菌疫苗株C500毒力致弱的主要原因是rpoS基因的缺失

目的 猪霍乱沙门菌疫苗株C500在我国应用于仔猪副伤寒的防控已长达50多年,然而由于C500是通过化学诱变法获得,因此其遗传背景仍不清楚。本文从基因组水平揭示C500疫苗株毒力致弱的主要原因。方法 利用MOH-SSH方法比较了强毒株C78-2与C500之间的基因组差异,结合荧光定量PCR与动物实验检测缺失基因对疫苗株毒力的影响。结果 发现C500缺失了6个基因(asr、ydgF、ydgD、ydgE、rpoS和ptsG)。其中,作为调控基因的rpoS在沙门菌致病过程中发挥着重要的作用。荧光定量PCR检测发现rpoS调控的基因在C500中的表达出现不同程度的下调。此外,动物实验结果 显示rpoS缺失的C78-2 突变株C78-2ΔrpoS毒力下降了100 000倍。结论 rpoS基因的缺失是导致C500致弱的主要因素。