AmpC酶在主要肠杆菌科和非发酵菌中的携带率及耐药性

目的：调查主要肠杆菌科细菌和非发酵菌产AmpC酶和ESBLs的状况及对常用抗菌药物的耐药性，指导临床合理用药。方法：常规培养分离细菌，应用VTTEK微生物自动分析仪和API鉴定系统鉴定病原菌；药敏试验采用K-B纸片扩散法；AmpC酶检测采用三维试验法；ESBLs检测采用双纸片确认试验。结果：主要肠杆菌科细菌产AmpC酶和ESBLs的阳性率分别为18．9％，52．8％，其中以大肠杆菌、肺炎克雷伯、产酸克雷伯、阴沟肠杆菌为主，同时产2种酶的菌株占15．4％；绿脓杆菌产AmpC酶和ESBLs酶的阳性率分别为18．2%，，42．0％，同时产2种酶的菌株占13．6％；不动杆菌的产酶率均在8．0％以下,产酶菌的耐药率高于非产酶菌，除绿脓杆菌外，产AmpC酶菌株的耐药率高于产ESBLs菌株．主要肠杆菌科细菌对泰能(IMP)的敏感性为99．5%，而对舒普深(CPZ)的耐药率平均为13．8％；非发酵菌对IMP，马斯平(FEP)、CPZ的耐药率平均分别为20．4％，44．3％，18．6％.结论：主要肠杆菌科细菌的产酶率高于非发酵菌，产AmpC酶的菌株已近20．0%，应引起临床的高度重视；绿脓杆菌产ES-BLs的菌株也较高，也应该加强监控．对产酶菌引起感染的治疗应根据细菌药敏试验结果，合理选择有效的抗菌药物联合治疗；对重症感染患的治疗应根据药敏试验结果重点应用泰能或舒普深治疗。     

西安地区呼吸道感染患儿肺炎链球菌携带和耐药情况分析

目的分析陕西省西安地区急性呼吸道感染儿童鼻咽部肺炎链球菌 (SP)携带及耐药情况。方法采集2001年8～10月门诊就诊、年龄1个月～5岁、急性呼吸道感染、未使用或使用抗生素不超过3d共234例患儿的鼻咽部分泌物 ,分离培养SP ,并利用纸片扩散法进行抗生素敏感性检测。结果急性呼吸道感染患儿鼻咽部SP携带率为28.2 % ,年龄主要为1～4岁 ,家中居住、就诊前未使用抗生素的儿童携菌率较高。共分离出66株SP ,其中100 %对氨苄西林、阿莫西林/棒酸、头孢呋辛、头孢曲松、左氧氟沙星和万古霉素敏感 ,对阿奇霉素和克拉霉素耐药率>80% ,对复方新诺明的耐药率为54 %。结论西安地区SP在急性呼吸道感染儿童中的携带率近1/3 ,对多种抗生素有不同耐药性和敏感性 ,以对阿奇霉素、克拉霉素、复方新诺明等多重耐药为主要特点。     

抗菌药物联用对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌体外抗菌活性研究

目的了解万古霉素与头孢哌酮/舒巴坦、亚胺培南、左氧氟沙星联用对MRSA的体外抗菌活性,指导临床合理用药。方法常规方法培养分离细菌,用VITEK微生物自动分析仪或API系统鉴定到种。MRSA鉴定应用乳胶凝集试剂盒,药敏试验采用肉汤倍比稀释法和琼脂平板稀释法。结果万古霉素对40株MRSA的MIC90为4mg/L,而与头孢哌酮/舒巴坦、亚胺培南、左氧氟沙星联用MIC90降为0.25～1mg/L。结论万古霉素与上述三种药物联用以协同作用为主,抗菌活性提高4倍以上。临床上治疗由MRSA引起的重症感染应根据药敏试验结果采用万古霉素与亚胺培南或头孢哌酮/舒巴坦或其它抗菌药物联合应用。     

新型TaqMan-MGB探针法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌

目的探讨新型MGB探针在耐甲氧西林金黄色葡萄球菌快速检测中的临床应用价值。方法以TaqMan-MGB探针技术为基础,用已克隆的mecA基因作参比品,实时检测临床标本和阴性参考品。结果所建立方法的最低检测限度为1个基因拷贝/反应,在100~109范围内,CT值(C代表Cycle,T代表阈值)同DNA量的对数呈线性关系;用该方法检测20例MRSA培养阳性的临床标本,结果均为阳性;用该方法检测20个非MRSA细菌株,结果均为阴性。结论所建立的方法适用于临床MRSA快速诊断。     

ICU分离的铜绿假单胞菌血清分型及耐药性分析

目的确定重症监护室(ICU)铜绿假单胞菌流行菌株血清型别及其对抗菌药物的耐药情况,为研究铜绿假单胞菌感染的控制措施,合理应用抗菌药物提供依据。方法采用日本生研株式会社的铜绿假单胞菌血清分型试剂盒,对某院呼吸内科、神经内科、麻醉科ICU住院患者痰液及相关环境标本中分离的铜绿假单胞菌进行血清学分型及耐药性监测。结果3个ICU共检出铜绿假单胞菌88株,对其中80株进行了血清学分型,分型率90.91%;所占比率较大的血清型为:B型52.27%,G型22.73%,未分型菌9.09%。各型对10种抗菌药物的耐药种类数为:B与G型10种,未分型菌9种,D与E型8种,F型7种,I,M与K型<3种;铜绿假单胞菌对10种抗菌药物总的耐药率分别为:头孢曲松67.05%,阿洛西林61.36%,头孢吡肟44.32%,替卡西林/他唑巴坦54.55%,阿米卡星56.82%,头孢哌酮46.59%,左氧氟沙星54.55%,头孢哌酮/舒巴坦6.82%,亚胺培南55.68%,头孢他啶28.41%;B型菌的耐药率高于其他各型。结论该院ICU铜绿假单胞菌血清分型以B型为主;以多重耐药菌株多见;对头孢哌酮/舒巴坦和头孢他啶耐药率较低,此两种药可作为铜绿假单胞菌感染治疗的首选药物。     

Diascie ProBact全自动微生物分离培养系统临床应用评估

目的比较Diascie Pro Bact全自动微生物分离培养系统(简称Diascie Pro Bact)与Copan Wasp全自动微生物前处理系统(简称Copan Wasp)及手工法的微生物分离效果,评估Diascie Pro Bact的临床应用价值。方法收集临床痰、中段尿样本各50例,分别采用Diascie Pro Bact和Copan Wasp及手工法进行划线接种和分离培养。痰样本采用四区划线方式,35℃5%CO_2孵育箱培养;中段尿样本采用连续划线方式,35℃普通孵育箱培养。24 h后观察2种样本的细菌生长情况,并对其分离的菌种数量、细菌生长量、有效单个菌落分离数量进行比较。结果 (1)分离菌种数量。痰样本中Diascie Pro Bact分离0(无细菌生长)、1、2及≥3种菌的样本分别为1、16、8和25例,Copan Wasp分别为1、14、10和25例,手工法分别为2、14、9和25例;中段尿样本中Diascie Pro Bact分离0(无细菌生长)、1、2及≥3种菌的样本分别为20、16、8和6例,Copan Wasp分别为18、17、9及6例,手工法分别为19、18、7和6例。3种方法之间比较,差异均无统计学意义(P0.05)。(2)细菌生长量。对于痰样本,Diascie Pro Bact分离细菌≤10×10~3、100×10~3、1 000×10~3及≥10 000×10~3 cfu/mL的样本分别为4、5、8和33例,Copan Wasp分别为5、5、9和31例,手工法分别为6、7、10和27例;对于中段尿样本,Diascie Pro Bact分离细菌0(无细菌生长)、10~3~10~4、10~4~10~5和10~5 cfu/mL的样本分别为20、8、5和17例,Copan Wasp分别为18、9、6和17例,手工法分别为19、7、6和18例。3种方法之间比较,差异均无统计学意义(P0.05)。(3)有效单个菌落。对于痰样本,Diascie Pro Bact为9.78±5.37,Copan Wasp为10.48±5.59,手工法为8.82±5.31;对于中段尿样本,Diascie Pro Bact为8.78±4.38,Copan Wasp为9.74±4.49,手工法为7.33±5.03。3种方法之间比较,差异均无统计学意义(P0.05)。结论 Diascie Pro Bact各性能指标与Copan Wasp和手工法无明显差异,可替代手工法应用于临床,以提高菌落分离效率,减少再次分离,缩短报告时间。     

临床细菌实验室数据微机管理和统计系统的建立

随着医学实验技术的不断更新和快速发展,临床细菌学检验对控制医院内感染和疾病的诊治显得更为重要,对细菌检验实验室数据的统计、调查、查询等分析用传统的手工方法不仅费时费力,且不能满足准确快速的为临床提供诊治信息和实验室自身快速发展的需要,为此我们研究设计编制了细菌检验实验室数据微机程序管理系统。该系统具有将病人资料和实验数据按组段录入数据库,以备查询、统计、打     

左氧氟沙星对呼吸道和泌尿道感染常见病原菌的体外抗菌活性研究

目的了解左氧氟沙星对呼吸道和泌尿道感染常见病原菌的体外抗菌活性，指导临床合理应用抗菌药物。方法常规分离培养细菌，用VITEKⅡ全自动细菌鉴定分析仪和API细菌鉴定系统鉴定到种。药敏试验用琼脂平板稀释法检测MIC，按NCCLs规定的标准进行。结果呼吸道和泌尿道感染的标本中分离获得了131株病原菌，常见的为大肠埃希菌、嗜血杆菌、表皮葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、粪肠球菌等。左氧氟沙星对常见菌株的最低抑菌浓度（MIC）在0．06—64mg／L之间，总的抑菌率为90．1％。结论左氧氟沙星是一种有效的广谱抗菌药物，对呼吸道和泌尿道常见病原菌的抗菌活性较高，可以作为治疗呼吸道和泌尿道感染的一线药物。     

肝素结合血凝素蛋白在结核病诊断中的应用研究

目的制备天然和重组肝素结合血凝素（HBHA）蛋白,探讨其在结核杆菌感染诊断中的应用价值。方法用聚合酶链反应从结核分枝杆菌H37Rv基因组扩增出HBHA基因片段。结核分枝杆菌HBHA基因克隆至PQE80L克隆表达载体中,序列测定正确后,将其转化到大肠埃希菌BL-21中,再经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷（IPTG）诱导表达HBHA蛋白,表达蛋白经SDS-PAGE及免疫印迹法分析后,亲和层析法纯化蛋白,并以此免疫新西兰兔制备多克隆抗体。同时将7H9液体培养基中的卡介苗（BCG）培养至稳定生长期,用CL-6B层析柱分离纯化HBHA蛋白。观察抗体对不同浓度天然HBHA和重组HBHA诱导BCG聚集效应的影响。结果所得天然和重组HBHA蛋白均有诱导BCG聚集的作用,并均可被多克隆抗体抑制。结论成功获得天然HBHA和重组HBHA蛋白;证实了两者均具有促进BCG聚集的功能,并可被由重组HBHA诱导产生的多克隆抗体所抑制。从而为进一步研究HBHA的临床诊断价值提供了实验依据。     

2010年CMSS对革兰阴性杆菌耐药性监测报告

目的 监测2010年中国革兰阴性杆菌的耐药性.方法 收集2010年9-12月全国13家教学医院的1 259株非重复的革兰阴性杆菌.菌株经中心实验室复核后,采用琼脂稀释法测定美罗培南等广谱抗菌药物的MIC.药敏结果判断采用CLSI 2011年M100-S21标准.结果 14种抗菌药物对845株肠杆菌科细菌的抗菌活性,敏感性依次为美罗培南829株(98.1％)、阿米卡星794株(94.0％)、亚胺培南761株(90.0％)、哌拉西林/他唑巴坦739株(87.5％)、头孢吡肟701株(83.0％)、厄他培南696株(82.4％)、头孢哌酮/舒巴坦678株(80.3％)、黏菌素637株(75.4％)、头孢他啶591株(70.0％)、环丙沙星499株(59.1％)、头孢西丁463株(54.8％)、头孢曲松452株(53.5％)、头孢噻肟442株(52.3％)、米诺环素435株(51.5％).大肠埃希菌中ESBL的发生率为61.3％ (106/173),高于肺炎克雷伯菌[41.2％ (70/170)].大肠埃希菌对美罗培南、亚胺培南、阿米卡星、哌拉西林/他唑巴坦保持较好的敏感性,而对环丙沙星、头孢曲松和头孢噻肟的耐药率较高.肺炎克雷伯菌对美罗培南、亚胺培南、阿米卡星和黏菌素的敏感率均保持在90％以上,而对头孢曲松和头孢噻肟的耐药率较高.阴沟肠杆菌、产气肠杆菌、弗劳地柠檬酸菌,对美罗培南、阿米卡星、头孢吡肟、头孢哌酮/舒巴坦、亚胺培南、哌拉西林/他唑巴坦、厄他培南的敏感率都保持在80.0％以上.对于铜绿假单胞菌敏感性较高的药物为黏菌素(98.4％,182株)、阿米卡星(85.9％,159株)、哌拉西林/他唑巴坦(80.0％,148株)、头孢他啶(79.5％,147株)、美罗培南(74.1％,137株)、环丙沙星(74.1％,137株)、头孢吡肟(73.5％,136株)、亚胺培南(71.9％,132株)和头孢哌酮/舒巴坦(70.8％,131株).鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类的敏感率小于37.0％,对米诺环素敏感率为47.8％.97.8％(176株)的鲍曼不动杆菌对黏菌素敏感,泛耐药鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌发生率分别为60.1％(108株)和18.9％(35株).结论 碳青霉烯类对肠杆菌科仍保持高活性,但鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌的耐药性增加,鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类的耐药性显著增加.