鸡胚发育中神经钙黏蛋白对头部神经嵴细胞分层的作用

目的:阐明神经钙黏蛋白(N-cadherin)在神经嵴细胞分层中的作用。方法: 利用原位杂交鉴定N-cadherin在神经管上的表达。转染过表达N-cadherin的野生型N-cadherin(wild-type N-cadherin, wt-N-cad)或阻断N-cadherin表达的结构域缺失型N-cadherin(dominant-negative N-cadherin, dn-N-cad),利用免疫组化方法检测头部神经嵴细胞的迁移变化。结果: 无论是过表达N-cadherin还是下调N-cadherin表达,头部神经嵴细胞迁移都受到了影响。结论: 头部神经嵴细胞的分层和迁移依赖于神经管上N-cadherin的表达。     

转化生长因子-β联合CD3+、CD4+、CD8+T细胞检测胶质母细胞瘤免疫微环境初探

目的 分析胶质母细胞瘤免疫微环境中相关免疫细胞及免疫抑制因子的表达。方法 纳入2020年11月至2021年4月在暨南大学附属第一医院和广东三九脑科医院行手术切除并保存完整的30例胶质瘤标本,均为胶质母细胞瘤,IDH野生型,免疫组化染色检测胶质母细胞瘤免疫微环境中T淋巴细胞(CD3⁺、CD4⁺、CD8⁺T细胞)、抑制性免疫细胞[FoxP3⁺调节性T细胞(Treg)]、免疫抑制因子[转化生长因子-β(TGF-β)]和免疫抑制信号[细胞程序性死亡蛋白配体(PDL1)]分布和表达。结果 CD4⁺T细胞在胶质母细胞瘤中占比极低;15例(50%)CD3⁺T细胞占比> 3%,CD8⁺T细胞分布与CD3⁺T细胞相似;仅2例(6.67%)检测到极少FoxP3⁺Treg细胞。24例(80%)胶质母细胞瘤胞质强阳性表达TGF-β,且其表达与CD3⁺T细胞分布存在相关性,TGF-β高表达...     

Slit2/Robo1信号对鸡胚早期神经管及体节发育的影响

目的: 探讨Slit2/Robo1对鸡胚早期神经管和体节发育的影响。 方法: 显微注射法将质粒注射入HH10期胚胎神经管内,活体胚胎细胞电穿孔方法转染胚胎半侧神经管,以另一侧神经管为对照侧,原位杂交及免疫荧光方法观察转染10 h后神经管的发育和神经嵴细胞迁移至体节的情况。结果: 下调Robo1侧神经管发育较正常对照侧异常,同时发现Slug表达和神经嵴细胞迁移至体节路线发生改变。结论: Slit2/Robo1信号可能通过影响Slug基因表达,对胚胎早期神经管闭合、神经嵴细胞正常产生及迁移方向以及体节分化有重要作用。     

成纤维细胞生长因子信号调控早期鸡胚胎神经嵴细胞的迁移

目的 利用Sprouty2基因阻断成纤维细胞生长因子（FGF）信号,探讨FGF在早期鸡胚胎发育过程中对神经嵴细胞迁移的影响及其机制。方法 通过体内培养的方法孵育鸡胚至HH9期,通过显微注射的方法将Sprouty2-绿色荧光蛋白（GFP）质粒注射入神经管腔内。实验侧使用电穿孔转染的方法转染胚胎半侧神经管,另一侧正常神经管设为对照侧。采用神经嵴细胞特异标记物HNK1免疫荧光的方法检测Sprouty2基因阻断FGF信号后是否影响胚胎头部和躯干部神经嵴细胞的迁移过程。随后,进一步通过检测神经细胞钙黏分子N-Cadherin的表达来观察细胞之间黏附作用的改变。结果 HNK1免疫荧光检测结果显示,Sprouty2转染侧即阻断FGF信号通路后,HNK1在早期鸡胚胎的头部和躯干部的表达量均比对照侧的表达量增多;而神经细胞钙黏分子N-Cadherin检测结果表明,Sprouty2转染侧和正常对照侧N Cadherin在头部和躯干部神经管上表达量的差异均无显著性。结论 Sprouty2基因阻断FGF信号后,促进了早期鸡胚胎神经嵴细胞的迁移,但是FGF信号对此过程的影响可能不是由神经钙黏分子N-Cadherin介导的。