Th17细胞及其效应分子IL-17在HAM/TSP患者体内的变化及Tax蛋白对IL-17的影响

目的 研究Th17细胞及其效应分子IL-17在HTLV-Ⅰ相关性脊髓病/热带痉挛性截瘫(HTLV-Ⅰassociated myelopsthy/tropical spastic paraparesis,HAM/TSP)患者中的变化及Tax蛋白对IL-17的影响.方法 分别应用ELISA法和流式细胞技术检测HAM/TSP患者CSF上清液中的IL-17水平及外周血Th17细胞的百分率.应用RNAi干扰技术抑制Tax蛋白的表达,并用ELISA法检测干扰后细胞培养悬浮液中IL-17的表达.结果 HAM/TSP患者脑脊液上清中IL-17含量(4.58±0.70) pg/mL较对照组(0.76±0.17) pg/mL显著升高(P＜0.01);HAM/TSP患者外周血中Th17细胞的百分率(2.00％±0.64％)较对照组(0.41％±0.24％)显著升高(P＜0.01).RNAi技术干扰Tax蛋白表达后,IL-17水平(5.04± 1.27) pg/mL较未干扰组细胞培养悬浮液中IL-17水平(7.69±2.11) pg/mL显著降低(P＜0.05).结论 Th17细胞及其效应分子IL-17在HAM/TSP患者体内显著提高,提示在其发病机制中发挥一定作用,而且IL-17的表达水平受Tax蛋白调控.     

2-甲氧雌二醇对HL60白血病细胞凋亡以及bcl-2表达的影响

目的探讨2-甲氧雌二醇对HL60白血病细胞增殖及凋亡的影响。方法运用MTT法和流式细胞术检测2-甲氧雌二醇对HL60白血病细胞的增殖抑制及促凋亡作用,应用流式细胞技术检测Bcl-2蛋白的表达。结果随着2-ME浓度的升高,各项指标与对照组相比较的差异均有统计学意义（P〈0．01）;HL60细胞增殖明显受到抑制;细胞凋亡率明显增加,且当2-ME浓度为50μmol／L时,细胞凋亡率达65．8％;30μM2-甲氧雌二醇作用72h后的细胞,bcl-2蛋白的表达较对照组显著减少。结论2-甲氧雌二醇具有对HL60白血病细胞增殖抑制及促凋亡作用,bel-2蛋白表达下调在此过程中可能发挥着重要的作用．     

白介素-17、-23在结核性脑膜炎中的免疫致病机制探讨

目的：探讨白介素（IL）-17、-23在结核性脑膜炎（TBM）中的致病机制及其对TBM诊断和预后的意义。方法：用双抗体夹心法检测18例TBM患者（TBM组）血清及脑脊液（CSF）中IL-17、-23因子水平。并对IL-17、-23与TBM组CSF中各参数的相关性进行分析。结果：TBM组血清和CSF中IL-17水平分别为83.8±5.9和106.4±8.8;IL-23水平分别为103.1±7.1和172.8±8.3,与对照组比均有统计学意义（P〈0.01）。且IL-17、-23升高水平与TBM组CSF中的WBC数量正相关。结论：IL-17、-23在TBM的免疫致病机制中起着重要作用。     

汕头地区手足口病病原体检测及临床分析

目的 对汕头市97例疑似手足口病患者进行病原体检测及分型情况分析. 方法 采用RT-PCR检测97份疑似手足口病患者的咽拭子标本. 结果 97份咽拭子标本中检测肠道病毒阳性63例,病毒阳性率为64.95％,其中EV71阳性19例,阳性率19.59％,占30.16％,CoxA16阳性34例,阳性率35.05％,占53.97％,其他型肠道病毒10例,阳性率10.31％,占15.87％,EV71和CoxA16的阳性检出率差异有统计学意义(P＜0.05). 结论 汕头地区手足口病的病原体感染以CoxA16为主,其次为EV71,也发现少量的其他型肠道病毒感染.     

PCR结合反向点杂交技术在β-地中海贫血基因诊断中的应用评价

目的 评价PCR结合反向点杂交技术在β-地中海贫血基因诊断中的临床应用. 方法 应用PCR结合反向点杂交技术对4 133例受检者进行β-地中海贫血基因检测,并对检测结果进行分析. 结果 4 133例受检者共检出β-地中海贫血患者428例,阳性检出率10.36％,其中41-42杂合子178例,占的比率最高41.59％;其次为654杂合子150例(35.05％);另外还有17杂合子38例(8.88％)、-28杂合子32例(7.48％)、βE杂合子13例(3.04％)、27-28杂合子5例(1.17％)、71-72杂合子4例(0.93％)、Int杂合子2例(0.47％)、CAP杂合子2例(0.47％)、-29杂合子2例(0.47％)、14-15杂合子1例(0.23％)、IVS1-1杂合子1例(0.23％). 结论 PCR结合反向点杂交技术操作快速简便、结果准确可靠,适用于β-地中海贫血的基因诊断和实验研究,值得临床推广应用.     

二甲氧雌二醇对白血病细胞K562增殖、凋亡的作用及其机制

目的：研究二甲氧雌二醇（2-ME）对人白血病细胞l（562细胞的增殖、凋亡的作用及其机制。方法：分别以不同浓度的2-ME处理白血病细胞K562,通过MTT法检测K562细胞活力,应用AnnexinV和PI双染的流式细胞术检测K562细胞凋亡率,应用凝胶蛋白电泳迁移率分析法EMSA检测K562细胞核内NF．KB蛋白的结合活性变化情况。结果：随着2-ME浓度的升高,各项指标与对照组相比较的差异均有统计学意义（P〈0．01）;K562细胞增殖明显受到抑制;细胞凋亡率明显增加,且当2·ME浓度为8μmol·L-1时,细胞凋亡率达64．3％;同时K562细胞核内NF—kappaB的DNA结合活性明显降低。结论：2-ME可显著抑制人白血病细胞K562增殖并诱导其凋亡;2-ME诱导K562细胞凋亡的机制与NF—kappaB蛋白信号通路有关。     

2-甲氧雌二醇对HL60白血病细胞凋亡及Bcl-2蛋白表达的影响

目的：探讨2-甲氧雌二醇（2-ME）对HL60白血病细胞增殖及凋亡的影响。方法：用MTT法和流式细胞术检测2-ME对HL60的增殖抑制及促凋亡作用,用流式细胞技术检测Bcl-2蛋白的表达。结果：随着2-ME浓度升高及作用时间延长,HL60细胞增殖明显受抑制（P〈0.05）,细胞凋亡率明显增加（P〈0.05）,当2-ME浓度为50μmol/L时,细胞凋亡率达65.8%;2-ME（30μmol/L）作用72h后,Bcl-2的表达较对照组显著减少（P〈0.05）。结论：2-ME对HL60细胞增殖有抑制及促凋亡作用,Bcl-2表达下调在此过程中可能发挥重要作用。     

彗星电泳法检测H2O2对人淋巴细胞DNA损伤及其激光扫描共聚焦显微境下的观察和三维重建

目的:应用彗星电泳法于荧光显微镜和激光扫描共聚焦显微镜下观察人淋巴细胞经H2O2作用后的DNA损伤情况.方法:人淋巴细胞经不同浓度H2O2(0、10、20、40、80μmol/L)作用20 min,或20μmol/L H2O2作用不同时间(0、10、20、30 min)后,采用彗星电泳法,荧光显微镜下观察、照相,对尾长、总彗星长度、尾距进行测量和分析.同时采用激光共聚焦显微镜(LSCM)进行观察和三维重建;比较了不同染料(H、AO、EB、Hochest33258)的染色效果.结果:H202作用浓度为0、10、20、40、80μmol/L时,尾距(-x±s)分别为0.001±0.002、0.31±0.35、1.23±0.96、2.82±1.38、3.52±0.96(P＜0.01);作用时间为0、10、20、30min时,尾距(-x±s)分别为0.05±0.09、0.22±0.30、1.62±0.93、1.89±1.09(P＜0.01).尾长、总彗星长度也有显著性增加,经统计学检验,P＜0.01.与荧光显微镜相比,LSCM下的″彗星″轮廓十分清晰;PI和EB染色效果较好.结论:H2O2能剂量依赖性和时间依赖性地导致人外周血淋巴细胞DNA的明显断裂损伤.利用LSCM构建″彗星″的三维图像将更有利于DNA损伤的准确测量.鉴于染色效果的差异,PI和EB是比较适合的彗星电泳染料.     

Th17/Treg细胞平衡变化在HTLV-Ⅰ相关性脊髓病/热带痉挛性截瘫患者中的价值

目的 研究辅助性T细胞(Th17)/调节性T细胞(Treg)平衡变化在HTLV-Ⅰ相关性脊髓病/热带痉挛性截瘫(HAM/TSP)疾病中的意义.方法 分别应用ELISA法和流式细胞技术检测HAM/TSP患者脑脊液(CSF)上清液中的IL-17、IL-10水平及外周血Th17,Treg细胞的百分率,并计算二者的比值.结果 HAM/TSP患者CSF上清IL-17含量及外周血Th17细胞百分率分别为[(4.58±0.70)pg/ml、(2.00±0.64)％],较对照组[(0.76 ±0.17) pg/ml、(0.41±0.24)％]均有显著升高,差异具有统计学意义(t =5.581、6.11,P＜0.01);HAM/TSP患者CSF上清IL-10含量及外周血Treg细胞百分率分别为[(8.64 ±2.22) pg/ml、(3.56±0.55)％],较对照组[(17.79±3.08) pg/ml、(7.30±1.20)％]均有显著降低,差异具有统计学意义(t=6.368、7.49,P＜0.01),HAM/TSP和对照组外周血Th17/Treg细胞比例分别为0.55±0.10、0.06±0.03,两者比较差异具有统计学意义(t=12.11,P＜0.01).结论 Th17细胞及其效应分子IL-17在HAM/TSP患者体内均显著升高,Treg细胞及其效应分子IL-10均较对照组显著降低,Th17/Treg细胞动态平衡的变化在HAM/TSP的发病机制中发挥一定的作用.