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1.
重症肌无力抗乙酰胆碱受体单链抗体基因的构建 总被引:2,自引:2,他引:0
[目的 ]构建重症肌无力抗乙酰胆碱受体主要免疫原区单链抗体A 7基因 .[方法 ]应用PCR技术及基因克隆技术分两步完成重链和轻链可变区基因的克隆 ,再对构建的单链抗体A 7基因进行序列测定检测其核苷酸序列 .[结果 ]构建的重组质粒经序列分析 ,重链可变区基因长度为 36 9bp ,轻链可变区基因长度为 32 1bp ,单链抗体基因长度为 735bp ;单链抗体A 7基因正确地插入在载体质粒pHEN 2开放读码框架内 .[结论 ]成功地构建重症肌无力抗乙酰胆碱受体主要免疫原区单链抗体A 7基因 ,为进一步制备基因工程抗体奠定了基础 . 相似文献
2.
为探讨单链抗体 (ScFv )对重症肌无力 (MG )的特异性免疫治疗作用 ,从分离自MG患者胸腺的抗乙酰胆碱受体(AchR )抗原结合片段Fab6 37构建单链抗体ScFv6 37。应用放射免疫测定法测定了ScFv6 37与刺激抗原人AchR的特异性结合活性以及与相关抗原大鼠AchR和电鳐AchR的交叉反应 ,应用竞争性ELISA测定抑制致病性抗AchR完整抗体IgG6 37与人AchR结合活性。结果发现ScFv6 37只能与人AchR结合 ,不能与大鼠和电鳐的AchR结合。对IgG6 37与人AchR结合的抑制率为 17 5 %~ 32 9%。表明单链抗体对AchR具有一定的“保护”作用。 相似文献
3.
目的:通过观察与Ⅰ型超敏反应相关的生物活性介质--组织胺对家兔肝脏有无直接损伤作用,进一步论证Ⅰ型超敏反应对肝脏的损伤作用.方法:选择34只家兔随机分为对照组、实验Ⅰ组和实验Ⅱ组3组;对照组只进行正常饲料喂养,实验Ⅰ组在正常饲料喂养的同时每天给予0.4μg/kg耳静脉注射磷酸组胺注射液,实验Ⅱ组在正常饲料喂养的同时每天给予0.08 μg/kg耳静脉注射磷酸组胺注射液;动态观察以上3个组的血清谷丙转氨酶(ALT)及血清谷草转氨酶(AST)变化;利用光学显微镜观察以上3个组肝组织的病理变化.结果:无论是实验Ⅰ组或实验Ⅱ组,经过一段时间的观察,发现血清内ALT和AST含量均显着高于对照组(P<0.01),但Ⅰ、Ⅱ组之间无显着性差异(P>0.05);实验Ⅰ组和实验Ⅱ组在显微镜下观察,其肝脏均有不同程的损伤和病理改变,且实验Ⅱ组的损伤和变化大于实验Ⅰ组,而对照组的肝脏则无明显的病理变化.结论:组织胺对家兔肝脏确实有一定的损伤作用,而且随着投予剂量和时间的增加,肝脏的损伤和病理变化也越显著;通过本研究,可以得出Ⅰ型超敏反应导致肝脏病理变化及损伤的见解. 相似文献
4.
珍珠梅提取物的体内抑瘤作用及其机理研究 总被引:3,自引:0,他引:3
目的:探讨珍珠梅醋酸乙酯提取物对S180荷瘤小鼠体内的肿瘤抑制作用及机理。方法:按照标准方法给36只小鼠接种S180肉瘤后,给予珍珠梅提取物10 d,观察瘤重及体重,免疫组织化学方法检测肿瘤组织中的hcl-2和p53蛋白,比色分析法检测血清SOD,GSH-Px的活性及MDA含量的变化。结果:给予珍珠梅醋酸乙酯提取物的小鼠瘤重明显小于对照组,实验组与对照组体重变化无显著性差异:对照组的bcl-2和p53蛋白的表达率明显高于实验组,实验组的SOD,GSH-Px活性高于对照组,而MDA含量低于对照组。结论:珍珠梅醋酸乙酯提取物对小鼠S180肿瘤有抑制作用,并有可能影响bcl-2和P53的表达及清除体内自由基。 相似文献
5.
[目的]了解吉林省延边地区慢性丙型肝炎患和丙型肝炎病毒携带丙型肝炎病毒基因型的分布.[方法]应用逆转录-聚合酶链反应技术,检测了48例本地区抗丙型肝炎病毒阳性血清,其中有29例为逆转录-聚合酶链反应RNA阳性;对29例逆转录-聚合酶链反应阳性的标本,应用限制性片段多态性技术,进行丙型肝炎病毒基因型分型.[结果]25例慢性丙型肝炎患血清中17例为丙型肝炎病毒RNA阳性,各8例查出丙型肝炎病毒Ⅱ型和丙型肝炎病毒Ⅲ型,1例丙型肝炎病毒Ⅱ/Ⅲ混合型;在23例丙型肝炎病毒携带中12例为丙型肝炎病毒RNA阳性,其中有9例丙型肝炎病毒Ⅱ型,3例丙型肝炎病毒Ⅲ型.慢性丙型肝炎和丙型肝炎病毒携带之间丙型肝炎病毒基因型分布无显性差异.[结论]丙型肝炎病毒各基因型(Ⅱ和Ⅲ)与感染的病情严重程度关系不大. 相似文献
6.
[目的]探讨重症肌无力(MG)患者血清中乙酰胆碱受体抗体(AchRAb)以及肌肉特异性激酶抗体(MuSKAb)与临床特点的关系.[方法]应用酶联免疫吸附试验(ELISA),对40例MG患者血浆进行AchRAb和MuSKAb检测,并与患者临床特点进行比较分析.[结果]40例MG患者中AchRAb阳性为13例(33%),MuSKAb阳性为7例(18%),AchRAb与MuSKAb双阴性为22例(55%),AchRAb与MuSKAb双阳性为2例(5%).[结论]MG患者中AchRAb阳性者的病情普遍较轻,可受胸腺影响;MuSKAb阳性患者女性多见,全身症状严重. 相似文献
7.
8.
目的:阐明低浓度染料木素(Gen)促进乳腺癌细胞MCF-7、MDA-MB-231癌睾丸抗原特异性蛋白酶50(TSP50)表达的机制。方法:取对数生长期乳腺癌细胞,免疫组化、Western blot法观察乳腺癌细胞中TSP50表达情况,MTT还原法、流式细胞术和双染法检测Gen对乳腺癌细胞周期、凋亡情况及TSP50表达的影响。结果:对照组、5μmol/L Gen和25μmol/L Gen组干细胞亚群阳性率分别为(7.37±0.43)%、(11.57±1.13)%和(12.05±0.96)%;高浓度Gen作用后,干细胞亚群百分率下降(6.04±0.22)%;与对照组相比,5μmol/L Gen和25μmol/L Gen处理后,P70S6K1磷酸化水平略有增加,Erk1/2的磷酸化水平显著增加,MCF-7细胞中MMP-2与TSP50蛋白在5μmol/L浓度下表达增加。结论:低浓度Gen刺激乳腺癌细胞生长,TSP50可因非基因组效应相关的信号而表达增加,使ER~+乳腺癌干细胞表型特异性分子增加,促进ER~+乳腺癌细胞增殖。 相似文献
9.
目的:构建肌肉特异性激酶(MuSK)与红色荧光蛋白(mCherry)的重组融合蛋白(MuSK-mCherry),并作为抗原用于重症肌无力( MG)患者血清中的MuSK抗体( MuSKAb)的检测。方法:应用PCR技术,从含有mCherry 基因的载体pRSET-B扩增mCherry基因,经T载体(pGEM-T Easy Vector)克隆至含有MuSK细胞外区第22-452位氨基酸肽段基因的载体pMT/BiP/V5-His( MuSK)上,构建MuSK-mCherry融合荧光蛋白基因。将重组载体转染果蝇S2细胞,表达产物以共聚焦显微镜检查。以MuSK-mCherry融合蛋白作为抗原,应用荧光免疫沉淀试验检测MG患者MuSKAb。结果:成功地构建了MuSK-mCherry融合蛋白基因,并得到了表达。经对已知MuSKAb阳性的MG患者血清中的MuSKAb的检测证实,构建的MuSK-mCherry融合蛋白在荧光免疫沉淀试验中可以检测到MuSKAb。结论:以MuSK细胞外肽段与mCherry构建的融合荧光蛋白作为抗原,可以用于MG患者血清中的MuSKAb的检测。 相似文献
10.
闫俊卿 祖红梅 王晶 郭小青 李晓燕 刘尚豪 向慧玲 严兆兰 党彤 王海英 孙佳 黄磊 孟繁平 张清格 张国 黄燕 杨少奇 呼圣娟 阮继刚 李异玲 雷创 宋瑛 瞿章书 石瑞春 刘琴 刘益军 杨巧华 赵学兰 赵彩彦 吴晨曦 沈迁 武曼群 刘娅媛 鄢冬梅 刘川 福军亮 祁小龙 《中华消化杂志》2022,(10)
目的探讨肝性脑病心理学评分(PHES)子测试单独和联合检测对肝硬化患者轻微肝性脑病(MHE)的诊断价值, 进而优化PHES。方法本研究为前瞻性、多中心、真实世界研究, 由国家感染性疾病临床医学研究中心和中国门静脉高压联盟发起, 参与单位来自全国13个省(自治区、直辖市)的26家医院, 包括天津市第三中心医院、青海省第四人民医院、包头医学院第二附属医院、太原市第三人民医院和解放军总医院第五医学中心等。连续纳入2021年10月至2022年2月门诊和住院无显性肝性脑病的肝硬化患者。所有患者均以相同顺序接受数字连接试验(NCT)-A、NCT-B、数字符号试验(DST)、轨迹描绘试验(LTT)、系列打点试验(SDT)共5项PHES子测试, 并计算分值。以PHES总分<-4分作为诊断MHE的界值。比较MHE组与非MHE组子测试得分。绘制受试者操作特征曲线, 以曲线下面积(AUC)评估PHES各子测试单独、2项联合、3项联合检测对MHE的诊断价值。统计学方法采用Mann-WhitneyU检验和DeLong检验。结果共纳入581例肝硬化患者, 457例诊断为MHE, MHE患病率为78.7%。M... 相似文献