坛紫菜硫酸多糖对60Co辐射引起的小鼠体内氧化应激的作用研究

应用生物化学的方法探讨在^60Co辐射条件下，坛紫菜硫酸多糖对小鼠体内氧化应激的抑制作用。结果表明，^60Co辐射能显著降低昆明种小鼠体内不同脏器组织匀浆SOD、GSH—Px的活性，引起脂质过氧化。坛紫菜硫酸多糖可提高辐射损伤后小鼠组织匀浆SOD、GSH—Px的活性，增强总抗氧化能力，减少脂质过氧化。     

基于环介导等温扩增技术的巴戟天检测方法的建立

目的 建立一种可快速检测中药巴戟天的环介导等温扩增(LAMP)检测方法.方法 针对巴戟天二级内部转录空间(ITS2)序列设计LAMP特异引物组,提取DNA后建立基于LAMP技术鉴别巴戟天的目视和实时定量检测方法,同时评估该方法的特异性、灵敏度及其在实践中的应用情况.结果 该检测方法具有良好的特异性,最适反应温度为63℃...     

核转录因子κB信号通路在应力调控成肌细胞分化中的作用

背景:NF-κB信号通路在细胞生长分化、炎症反应、肿瘤生长等过程中发挥重要的调节作用,也参与成肌细胞分化的调控。目的:分析NF-κB信号通路在应力介导的C2C12成肌细胞分化中的作用及其作用机制。方法:成功构建大鼠C2C12成肌细胞体外培养-力学刺激模型,采用多通道细胞牵张应力加载系统,以0.5Hz的加载频率和10%的细胞拉伸变形幅度对细胞进行拉伸培养2,6,12,24h。结果与结论:①C2C12成肌细胞在周期性机械拉伸力作用下,NF-κB信号通路被激活。当细胞受到应力刺激6h后,胞核NF-κBp65亚基蛋白表达水平开始增强,24h内NF-κBp65亚基蛋白表达水平达到峰值。加力12,24h组与未加力对照组之间差异有显著性意义(P<0.05)。②IκBα蛋白表达水平在加力6h后表达显著下降,24h内IκBα蛋白表达水平减弱达到最低。加力12,24h组与未加力对照组之间差异有显著性意义(P<0.05)。③周期性张应力促进C2C12成肌细胞分化过程中Myogenin的表达,加入NF-κB信号通路特异性抑制剂吡咯烷二硫氨基甲酸(20μmol/L)后再加力,Myogenin的表达明显降低。以上结果提示:①NF-κB信号通路可能参与应力介导的C2C12成肌细胞分化的调控过程。②当细胞受到应力刺激时,胞质IκBα发生磷酸化并降解。③NF-κB信号通路在应力介导的C2C12成肌细胞分化过程中发挥重要作用,但不是这一调控过程的惟一通路。     

人脂肪干细胞对大鼠带真皮下血管网皮片移植的影响

目的探讨人脂肪干细胞(ADSCs)对大鼠带真皮下血管网皮片移植成活的影响及其机制。方法体外培养增殖ADSCs,流式细胞术鉴定,应用EdU标记ADSCs。于大鼠背部设计术区,实验组(n=10)局部注射EdU标记ADSCs PBS悬液,对照组(n=10)注射PBS。术后7d处死大鼠,比较两组移植皮片的成活率;取移植皮片组织行苏木精-伊红染色,光镜下观察微血管数目;免疫组织化学染色观察组织中CD31及血管内皮生长因子(VEGF)的表达;EdU标记检测ADSCs在移植皮片内的分布及分化。结果实验组大鼠移植皮片成活率、组织单位面积内微血管数目、VEGF表达均高于对照组,差异有显著性(t=3.870～14.729,P<0.05)。实验组EdU标记ADSCs阳性细胞分化为部分小血管内皮细胞,对照组检测不到EdU阳性ADSCs细胞分布。结论局部移植的ADSCs可以在组织内分化成血管内皮细胞,并促进VEGF等生长因子的分泌,从而促进大鼠带真皮下血管网皮片移植成活。     

三氧化二砷联合5-FU体外抗人胃癌细胞SGC-7901作用及机制的研究

目的：探讨三氧化二砷（As2O3）与5-氟尿嘧啶（5-FU）联合应用体外抗人胃癌细胞株SGC-7901的作用及其机制。方法：用不同浓度的As2O3（终浓度依次为0．1，0．5，1．0μmol／L）和（或）5-FU（终浓度50mg／L）处理SGC-7901细胞后．采用流式细胞术观察细胞凋亡和细胞周期变化：免疫细胞化学法（PV法）观察凋亡相关基因Bcl-2表达的变化。结果：与As2O3或5-FU单药作用相比，As2O3与5-FU联合应用可显著提高诱导胃癌细胞凋亡率（q=63．9608，166．1758，51．3343，P〈0．01），与空白组相比，联合用药后S期细胞所占比例下降（q=16．0743，10．8805，12．1482，P〈0．01），G0／G1期细胞比例上升（q=8．7188，9．3309，9．8534，P〈0．01），癌细胞Bcl-2基因表达明显下降（q=10.2801，17．8456，19．0086，P〈0．01）。结论：As2O3与5-FU联合应用具有协同抗胃癌作用，其机制可能与细胞周期阻滞、增强诱导胃癌细胞凋亡以及调控凋亡相关基因的表达有关。     

海生素注射液的特殊毒理学研究

目的探讨海洋抗肿瘤活性物质——海生素注射液的特殊毒理作用,评价该物质的安全性能。方法应用Ames实验、小鼠微核实验和精原细胞染色体畸变实验观察海生素注射液的致突变作用,用受孕小鼠观察海生素注射液的致畸胎作用。结果海生素注射液在5000μg/皿浓度下未见回复突变作用;在3.5mg/kg剂量下未诱发小鼠微核率增高;在3.5mg/kg浓度下不出现细胞染色体畸变率升高;在3.5mg/kg剂量下不存在胚胎毒性和致畸毒性。结论海生素注射液无特殊毒理作用,临床应用安全。     

兔ADSCs与NPCs共培养后再移植对椎间盘退变影响

目的探讨兔脂肪间充质干细胞(ADSCs)与髓核细胞(NPCs)共同培养后再植入兔腰椎间盘对Ⅱ型胶原和蛋白多糖的影响。方法体外分别提取分离培养兔ADSCs与NPCs。诱导分化兔ADSCs向成骨、成脂方向分化,鉴定兔ADSCs。将兔ADSCs与NPCs共同培养,诱导兔ADSCs向NPCs方向分化。新西兰大白兔30只,分为实验组和对照组,分别将兔ADSCs与NPCs共同培养后的细胞悬液、PBS缓冲液注入针刺抽吸后的椎间盘。4、8周后,采用间苯三酚分光光度法检测两组兔椎间盘髓核蛋白多糖表达的变化,采用反转录-聚合酶链反应对Ⅱ型胶原和蛋白多糖的基因表达进行半定量分析。结果 ADSCs可诱导向成骨、成脂方向分化,与NPCs共同培养后由梭形、多角形变为成纤维细胞样。对照组髓核Ⅱ型胶原和蛋白多糖表达低于实验组,差异有显著性(t=6.50～13.04,P<0.05)。结论兔脂肪组织可成功提取分离ADSCs,ADSCs与NPCs共同培养后移植可延缓兔椎间盘退变。     

骨髓基质干细胞片层的制备及其在组织工程骨中应用的初步研究

目的：探讨骨髓基质干细胞（bone marrow stromal cells,BMSCs）片层（cell sheet）的制备方法,并观察其在实验犬体内构建组织工程骨时的成骨作用。方法：密度梯度离心法获取实验犬骨髓基质干细胞,经成骨诱导培养后,利用温度感应性培养皿（temperature-responsive culture dish）制备细胞片层后在体外包裹犬同种异体脱钙骨基质（demineralized bone matrix,DBM）,相差显微镜和扫描电镜观察细胞及片层形态;将复合体植入实验犬背阔肌筋膜下,组织学方法观察术后组织工程骨的骨形成情况。结果：细胞片层成功制备,并与支架材料复合良好,术后16周组织学显示形成类似板层骨的致密骨组织。结论：利用温度反应性培养皿可成功制备BMSC细胞片层,细胞片层包裹支架材料后在实验动物体内可形成具有类似板层骨结构的组织工程骨。     

氨基葡萄糖和壳寡糖对去势大鼠血液生化指标的影响

目的:探讨氨基葡萄糖(GLC)和壳寡糖(COS)对去势大鼠动物模型血液生化指标的影响,进一步研究其抗骨质疏松的作用,以期为临床骨质疏松的防治和新药、功能性食品开发提供理论和实验依据。方法:通过切除3月龄雌性大鼠双侧卵巢复制绝经骨质疏松动物模型,每日分别给予不同剂量的氨基葡萄糖和壳寡糖,心脏取血观察血清生化指标的变化。结果:模型组碱性磷酸酶(ALP)、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)、甘油三酯(TG)、胆固醇(CHO)、低密度脂蛋白(LDL)、肌酐(Cr)都明显升高,氨基葡萄糖和壳寡糖中剂量(0.25g/kg)能明显降低上述6个指标的水平(P<0.05)。结论:氨基葡萄糖和壳寡糖对去势大鼠过高的骨转换有明显的抑制作用,并能提高骨再建能力,对去卵巢致骨质疏松有明显的对抗作用。