膜片钳系统的噪声分析

本文对膜片钳记录系统的背景噪声作了较全面的分析。系统噪声包括电子仪器噪声、封接噪声和电极噪声。仪器噪声有高频噪声等四种分量。作者提出了细胞膜与电极的封接阻抗的T型网络等效模型,分析指出,高阻(GΩ量级)封接的1/f噪声不可忽视。电极噪声有电极电阻噪声等三种分量,涂敷硅酮树脂(Sylgard)可以有效地降低电极噪声。     

内源性一氧化氮在下丘脑室旁核的心血管作用

实验采用神经核团微量注射的方法,观察了63只大鼠单侧室旁核微量注射一氧化氮合酶抑制剂硝基精氨酸甲基酯（L－NAME）平均动脉压（MAP）和心率（HR）的影响。结果发现：①室旁核（PVN）微量注射L－NAME（0．1μmol／μl）引起MAP显著升高,HR加快;②PVN微量注射一氧化氮前体L－ARG可拮抗L－NAME的效应;③PVN内微量注射L－ARG可使血压下降、心率减慢。结果表明内源性NO在PVN心血管活动调节过程中有明显的紧张性抑制作用。     

皮质酮对大鼠背根神经节细胞钙电流的快速抑制作用

探讨了皮质酮(Corticosterone)对急性分离的大鼠背根神经节细胞(DRG神经元)上电压依赖性钙通道电流的快速作用及作用机制.实验采用全细胞膜片钳方法,结果显示三种浓度的皮质酮,10-7mol/L,10-9mol/L,10-12mol/L均可以在3～5 s的时间内,快速抑制DRG神经元上的电压敏感钙通道电流,其平均抑制的程度分别为48%,37%和25%.且这种快速抑制作用在吹药15 s后可以达到最大,停药20 s后钙电流基本恢复为原来的大小.在外液中加入500 nmol/L的PKC抑制剂BIS之后,皮质酮的对钙电流的快速抑制作用被阻断,提示这一作用可能与PKC信号转导途径有关.     

新一代细胞电生理仪器一膜片钳

膜片钳（Datch clamo)技术是继细胞内电位记录，电压钳（Voltage Clamp)记录以后出现约新一代细胞电生理技术，1976年Neher和Sakmann利用首次实现膜单通道记录，1981年后膜片钳逐渐在发达国家的电生理室普及，本文介绍膜片钳仪器原理。     

骨髓源性心肌细胞瞬间外向钾电流状态的研究

目的:研究骨髓源性心肌细胞的膜瞬间外向钾电流(Ito)的状态。方法:取健康SD大鼠的骨髓,经梯度离心和贴壁培养获得骨髓基质干细胞,再以3μmol/L的5-氮杂胞嘧啶(5-aza)孵育诱导,利用膜片钳技术,以正常大鼠心室肌细胞为对照,以全细胞记录模式记录骨髓基质干细胞和骨髓源性心肌细胞的膜瞬间外向钾电流。结果:骨髓基质干细胞体外经5-aza诱导后表达心肌特异性蛋白,在诱导14d后的细胞,可记录到动作电位;骨髓基质干细胞在5-aza诱导前即可记录到Ito,但不同细胞间电流密度差别较大,为15.89±11.18pA/pF(n=12);与骨髓基质干细胞相比骨髓源性心肌细胞Ito电流密度(20.45±8.91pA/pF,n=5)较诱导前有增加的趋势,两者有显著差异;Ito电流的密度与心室肌细胞(21.69±7.73pA/pF,n=20)无显著差异。结论:5-aza可在体外有效诱导大鼠骨髓基质干细胞心肌化,与心室肌细胞相比,骨髓源性心肌细胞膜Ito电流密度无显著差异。     

皮质酮对大鼠背根神经节细胞钙电流的快速抑制作用

探讨了皮质酮 (Corticosterone)对急性分离的大鼠背根神经节细胞 (DRG神经元 )上电压依赖性钙通道电流的快速作用及作用机制。实验采用全细胞膜片钳方法 ,结果显示三种浓度的皮质酮 ,10 7mol/L ,10 9mol/L ,10 12 mol/L均可以在 3～ 5s的时间内 ,快速抑制DRG神经元上的电压敏感钙通道电流 ,其平均抑制的程度分别为4 8% ,37%和 2 5 %。且这种快速抑制作用在吹药 15s后可以达到最大 ,停药 2 0s后钙电流基本恢复为原来的大小。在外液中加入 5 0 0nmol/L的PKC抑制剂BIS之后 ,皮质酮的对钙电流的快速抑制作用被阻断 ,提示这一作用可能与PKC信号转导途径有关。