成体干细胞在心血管疾病中的研究进展

近年来,干细胞尤其是成体干细胞的研究进展,给心血管疾病的治疗带来了新的希望。骨髓间质干细胞、脂肪源性干细胞、造血干细胞、骨骼肌成肌细胞、心肌干细胞等已被应用于心肌的再生。而干细胞与基因治疗的结合,带来了更广阔的应用前景。现对成体干细胞移植在心血管疾病方面研究中取得的成就、有待解决的问题以及临床应用前景作一综述。     

小鼠胎肝干细胞的分离培养与鉴定

背景：胎肝细胞可能具有比骨髓干细胞等更强的增殖分化能力和更低的免疫原性，但目前涉及胎肝干细胞直接分离、培养的报道甚少。 目的：拟在体外分离培养小鼠胎肝干细胞，并对其生物学特性进行初步鉴定。 设计、时间及地点：细胞学体外观察，于2008-03/06在重庆市神经病学重点实验室完成。 材料：SPF级13.5 d龄昆明种胎鼠9只，由重庆医科大学实验动物中心提供。 方法：采用胶原酶+EDTA联合消化法与差速贴壁法体外分离胎鼠肝干细胞，按2×108 L-1接种，待细胞80%~90%汇合后消化传代。采用链霉亲和素-生物素-过氧化酶复合物技术对原代接种后5 d的贴壁细胞进行多种肝干细胞表面标志物的标记。 主要观察指标：原代胎肝干细胞形态变化，胎肝干细胞的传代扩增情况，胎肝干细胞表面标志的表达。 结果：原代培养24 h细胞贴壁，呈致密圆形，边缘清楚；3 d左右部分细胞呈梭形，7 d后细胞铺展呈上皮样；传代后细胞扩增速度无明显变化，至第5代仍保持较均一的上皮细胞状。原代接种后5 d的贴壁细胞，人干细胞因子受体与甲胎蛋白呈阳性表达，白蛋白与细胞角蛋白19呈阴性。 结论：胎肝干细胞原代培养早期表达甲胎蛋白与人干细胞因子受体，不表达白蛋白和细胞角蛋白19，提示所分离的胎肝干细胞可能是一种较原始的干细胞，尚处在未分化的早期阶段。     

诱导小鼠胎肝干细胞向类心肌细胞的分化

背景：近年来胚胎肝干细胞备受关注,该类细胞是否具有向类心肌细胞方向分化的潜能及相关的诱导分化条件,目前报道极少。目的：探讨体外环境下化学试剂诱导小鼠胎肝干细胞向类心肌细胞方向分化的合适条件。方法：二甲基亚砜联合5-氮杂胞苷以不同的浓度和时间,作用于13.5d胎龄的昆明小鼠胎肝干细胞,观察诱导分化效果。结果与结论：体外环境下,0.8%二甲基亚砜＋5μmol/L5-氮杂胞苷能诱导小鼠胎肝干细胞表达心肌细胞特异性标志物,而增加诱导剂浓度及延长时间不能提高诱导效率。     

疏血通联合依达拉奉治疗老年脑梗死患者的效果

目的:观察疏血通联合依达拉奉治疗老年脑梗死患者的效果。方法:选取2019年2月至2021年3月该院收治的102例老年脑梗死患者进行前瞻性研究,按照随机数字表法分为对照组和观察组各51例。对照组采用依达拉奉治疗,观察组在对照组的基础上联合疏血通治疗,比较两组治疗效果,治疗前后神经功能缺损程度[美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)]评分、炎性因子[C反应蛋白(CRP)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]水平,以及不良反应发生率。结果:观察组治疗总有效率为96.08%,高于对照组的78.43%,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后,两组NIHSS评分均低于治疗前,且观察组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后,两组CRP、IL-6、TNF-α水平均低于治疗前,且观察组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);两组不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:疏血通联合依达拉奉治疗老年脑梗死患者可提高治疗总有效率,降低NIHSS评分和炎性因子水平,效果优于单纯依达拉奉治疗。     

小鼠胎肝干细胞的分离培养与鉴定

背景:胎肝细胞可能具有比骨髓干细胞等更强的增殖分化能力和更低的免疫原性,但目前涉及胎肝干细胞直接分离、培养的报道甚少.目的:拟在体外分离培养小鼠胎肝干细胞,并对其生物学特性进行初步鉴定.设计、时间及地点:细胞学体外观察.于2008-03/06在重庆市神经病学重点实验室完成.材料:SPF级13.5 d龄昆明种胎鼠9只,由重庆医科大学实验动物中心提供.方法:采用胶原酶+EDTA联合消化法与差速贴壁法体外分离胎鼠肝干细胞,按2×108L-1接种,待细胞80%一90%汇合后消化传代.采用链霉亲和素一生物素-过氧化酶复合物技术对原代接种后5 d的贴壁细胞进行多种肝干细胞表面标志物的标记.主要观察指标:原代胎肝干细胞形态变化,胎肝干细胞的传代扩增情况.胎肝十细胞表面标志的表达.结果:原代培养24 h细胞贴壁,呈致密圆形,边缘清楚:3 d左右部分细胞呈梭形,7 d后细胞铺展呈上皮样:传代后细胞扩增速度无明显变化,至第5代仍保持较均一的上皮细胞状.原代接种后5d的贴壁细胞,人干细胞因子受体与甲胎蛋白呈阳性表达,白蛋白与细胞角蛋白19呈阴性.结论:胎肝干细胞原代培养早期表达甲胎蛋白与人干细胞因子受体,不表达白蛋白和细胞角蛋白19,提示所分离的胎肝干细胞可能足一种较原始的干细胞,尚处在未分化的早期阶段.     

不同胎龄小鼠胎肝干细胞的性状比较

背景：胎肝干细胞具有比骨髓干细胞更强的增殖分化能力和更低的免疫原性和免疫活性,逐渐受到关注,目前多数研究集中在成体肝干细胞,对小鼠胚胎肝干细胞的研究较少。目的：比较不同胎龄小鼠胎肝干细胞的生物学性状,探讨胎肝发育过程中干细胞的变化。方法：采用机械分离结合酶消化法及差速贴壁法分离培养不同胎龄（13．5d,16．5d,19．5d）的小鼠胎肝干细胞,对原代细胞形态,生长状态及表面标记物进行观察比较。结果与结论：胎龄13．5d组胎肝干细胞形态均一,生长状态良好,干细胞特性明显,白蛋白和细胞角蛋白19基本无表达,提示胎肝干细胞处于相对原始的未分化阶段。随胎龄增加,胎龄16．5d,19．5d组胎肝干细胞形态差异渐大,生长状态渐次,白蛋白和细胞角蛋白19阳性表达率增加。提示胎肝干细胞逐渐向具有肝细胞和胆管细胞标志的双显型干细胞方向转化。