外泌体microRNA对缺血性脑卒中调控机制的研究进展

<正>缺血性脑卒中(cerebral ischemia, CI)是全球第二大死亡原因,也是导致残疾的主要原因。随着人口老龄化社会的到来,其发病率明显上升,给家庭、社会带来了巨大的精神、物质负担^[1]。CI是由动脉粥样硬化、高血压病、血脂异常、糖尿病等多种危险因素引起的^[2]。缺血性脑卒中一旦发生可立即导致离子平衡破坏、代谢衰竭和脑细胞中一般蛋白质合成减少,继而诱发梗死灶周围去极化、兴奋性毒性、氧化应激、     

胡跃强运用阴阳本体结构理论指导中风病的次第治疗经验

胡跃强教授受《内经》"阴阳之要,阳密乃固"及唐农教授首次提出的"阳在内、阴在外"的阴阳本体结构学说的启发,认为中风病发生的根源是阴阳本体结构被破坏而出现了阴阳各离本位的否象,故恢复人体内阳外阴的泰象成为关键。提出"次第治疗"中风病的原则,先以清通上焦阳明,使阴热有出路;次而疏通中焦脾胃,使中枢复转;再以温固下焦元阳善后。并举验案1则加以说明。     

论“五脏神”与血管性痴呆

血管性痴呆是继发于脑部血管病变引起的以记忆、认知功能障碍为主要表现的一类临床综合征。中医学认为此病是由于髓海不足,神机失用,以呆笨、健忘为主要表现。大部分医家对此病多从肾论述,但临床辨证时,常见多脏腑病变相兼,且五脏藏五神、主五志,与神志病有密切联系。本文从中医学独特的"五脏神"理论着手,以五脏生理为纲,浅析血管性痴呆的病因病机,为本病的临床治疗提供思路。     

温肺降浊方联合ROCK2-shRNA转染对血管性痴呆大鼠的神经保护作用

目的 基于ROCK2-shRNA转染技术,探讨温肺降浊方对血管性痴呆大鼠学习、记忆能力及海马组织病理形态的影响。方法 将60只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、中药组、ROCK2干扰组、阴性对照组、中药+ROCK2干扰组,每组10只。除假手术组外,其余组均采用双侧颈总动脉永久性结扎法制备血管性痴呆模型。造模成功后,ROCK2干扰组及中药+ROCK2干扰组将AAV9-ROCK2-shRNA注射至大鼠海马组织,ROCK2干扰组同时给予生理盐水灌胃4周,中药+ROCK2干扰组同时给予温肺降浊方2 g/(kg·d)灌胃4周;阴性对照组同法注射空载体腺相关病毒,同时给予生理盐水灌胃4周;中药组给予温肺降浊方2 g/(kg·d)灌胃4周,假手术组、模型组给予生理盐水灌胃4周。分别于术后1周及4周,采用Morris水迷宫测试大鼠学习、记忆能力;术后4周处死各组大鼠,电镜观察海马神经元突触超微结构,尼氏染色法观察海马组织中神经元的分布、形态及尼氏小体数量,Tunel染色检测海马神经元凋亡情况。结果 术后1周,模型组与各干预组大鼠逃避潜伏期、跨越平台次数比较差异均无统计学意义(P均>0.05);术...     

miR-335通过调控铁死亡对大鼠脑缺血/再灌注损伤的保护作用及机制研究

目的 探究miR-335通过调控铁死亡对大鼠脑缺血/再灌注损伤的保护作用及机制。方法 本实验时间为2022年3—9月。将180只成年雄性Sprague Dawley大鼠随机分为假手术组、模型组、miR-335模拟物组、miR-335模拟物对照组、miR-335抑制物组、miR-335抑制物对照组，每组30只。假手术组大鼠仅暴露右侧大脑中动脉并缝合。模型组大鼠制备大脑中动脉闭塞/再灌注（MCAO/R）损伤模型。miR-335模拟物组大鼠在大脑中动脉脑立体定位注射miR-335模拟物腺相关病毒2μl,7 d后制备MCAO/R损伤模型。miR-335模拟物对照组大鼠在大脑中动脉脑立体定位注射miR-335模拟物空载体，7 d后制备MCAO/R损伤模型。miR-335抑制物组大鼠在大脑中动脉脑立体定位注射miR-335抑制物腺相关病毒2μl,7 d后制备MCAO/R损伤模型。miR-335抑制物对照组大鼠在大脑中动脉脑立体定位注射miR-335抑制物空载体，7 d后制备MCAO/R损伤模型。模型制备后12、24、72 h，分别在各组随机选取10只大鼠并将其处死，取缺血半暗带区脑组织以进行后续实...     

miR-137通过调控血红素铁输出蛋白FLVCR、BCRP对大鼠I/R损伤的保护作用

探讨大鼠脑缺血/再灌注（I/R）后血红素铁输出蛋白猫白血病病毒C亚组受体(FLVCR)、乳腺癌抗性蛋白(BCRP)的表达变化及miR-137对其表达的调控作用。方法 选取SD大鼠60只,随机分为假手术（SO）组、模型（MCAO/R）组、miR-137模拟物（Mimic）组、miR-137模拟对照（Mimic对照）组、miR-137抑制物（Inhibitor）组、miR-137抑制对照（Inhibitor对照）组,每组10只。采用线栓法制作大鼠脑缺血再灌注(MCAO/R)模型,分别于再灌注后12、24 h取材。通过qRT-PCR测定大鼠脑组织FLVCR、BCRP及miR-137的mRNA表达,免疫组化检测FLVCR、BCRP蛋白的表达水平。结果MCAO/R组大鼠神经功能缺损评分显著升高(P＜0.01),Mimic组评分显著下降（P＜0.01）,Inhibitor组评分显著升高（P＜0.05）。MCAO/R组miR-137 mRNA表达水平显著降低（P＜0.05）,与Mimic对照组同时间比较,Mimic组miR-137 mRNA表达水平显著升高（P＜0.01）,且24 h升高更显著（P＜0.05）;与Inhibitor对照组同时间比较,Inhibitor组miR-137 mRNA表达水平显著降低（P＜0.05）,且24 h降低更显著（P＜0.05）。与SO组比较,MCAO/R组FLVCR mRNA及蛋白表达水平均显著降低（P＜0.05);与Mimic对照组比较,Mimic组FLVCR mRNA及蛋白表达水平在12 h显著升高（P＜0.05),24 h最高(P＜0.05);与Inhibitor对照组比较,Inhibitor组FLVCR mRNA及蛋白表达水平降低（P＜0.01）,在24 h降低更明显（P＜0.05）。与SO组比较,MCAO/R组BCRP mRNA及蛋白表达水平显著降低（P＜0.05);与Mimic对照组比较,Mimic组BCRP mRNA及蛋白表达水平在12 h显著升高（P＜0.01）,24 h最高（P＜0.05）;与Inhibitor对照组比较,Inhibitor组BCRP mRNA及蛋白表达水平显著降低（P＜0.01)。结论 miR-137过表达可能促进FLVCR和BCRP的表达以保护大鼠脑缺血再灌注损伤     

胡跃强教授从阴阳本体结构谈失眠的“次第”治疗

正失眠通常指患者对睡眠时间和或质量不满足并影响白天社会功能的一种主观体验,包括入睡困难、时常觉醒及(或)晨醒过早。本病属中医学不寐、目不瞑范畴;病因认识上多认为是阳不入阴,外越扰乱心神所致。治疗上以补虚泻实,调整阴阳为原则。如采用归脾汤治疗心脾两虚、安神定志丸治疗心胆气虚虚证;黄连阿胶汤治疗阴虚火旺,温胆汤治疗痰热内扰,龙胆泻肝汤治疗肝郁化火的实证,但仍有部分病人难以达到满意的效果。导师胡跃强教授运用阴阳本     

基于铁死亡探讨温阳复元方对脑缺血再灌注损伤大鼠神经损伤的保护机制

目的 基于铁死亡探讨中药温阳复元方改善脑缺血再灌注损伤(Cerebral ischemia-reperfusion injury,CIRI)大鼠神经损伤的可能机制。方法 SD大鼠72只,随机分为假手术组、模型组、温阳复元方组、铁死亡诱导剂组、温阳复元方+铁死亡诱导剂组、铁死亡抑制剂组,每组12只。假手术组手术步骤同模型组,但线栓只插入颈内动脉深度9 mm,不堵塞大脑中动脉,其余各组采用线栓法构建大脑中动脉闭塞/再灌注(middle cerebral artery occlusion/reperfusion,MCAO/R)模型。在造模前24 h开始,按照分组给予铁死亡诱导剂(100 mg·kg^-1)、铁死亡抑制剂(5 mg·kg^-1)腹腔注射;中药温阳复元方(18.0 g·kg^-1)灌胃于麻醉清醒后2 h开始。各干预措施每天1次,连续7 d。分别于MCAO/R术后第1、3、7天采用Longa评分标准进行神经功能缺损评分。疗程结束后取材,采用苏木素-伊红染色法(HE)观察各组大鼠神经元形态学变化,透射电子显微镜观察各组大鼠神...     

铁死亡在缺血性中风中的作用及中医药干预的研究进展

综述缺血性中风铁死亡的发生机制及中医药干预的研究进展,为缺血性中风的预防和治疗提供新的理论依据及策略。铁死亡是近年来研究发现的一种全新的细胞程序性死亡方式,是一种因铁依赖性的脂质过氧化物积累引起细胞死亡的调节形式。近年来,对铁死亡这一以铁依赖性脂质过氧化积累为特征的调节性细胞死亡与中风关系的研究越来越多,铁死亡的发生导致机体正常的组织器官损伤或功能丧失,这一过程直接参与疾病的发生、发展与转归。因此,针对缺血性中风,抑制铁死亡的发生可以有效地预防及延缓缺血导致的脑组织损伤。一些中药提取物及中药复方均可抑制铁死亡,起到神经保护作用。     

温阳复元方联合miR-137模拟剂调控线粒体铁死亡对脑缺血再灌注损伤大鼠的作用机制

目的:阐明大鼠脑缺血再灌注(I/R)后miR-137对转铁蛋白受体(TFR)和胸腺癌抵抗蛋白(BCRP)表达的调控作用及温阳复元方的干预效应。方法:75只SD大鼠分为五组，假手术组和模型组予0.9%氯化钠溶液灌胃，余组予温阳复元方灌胃，miR-137模拟组和miR-137模拟对照组大鼠使用脑立体定位法分别将miR-137模拟剂和miR-137空载体注射到缺血侧MCA区，成模后再灌注24 h、7 d、14 d大鼠取材；评价各组大鼠的神经功能缺损评分以及TTC染色；分别通过RT-qPCR、Western blot检测各组大鼠脑组织中相关蛋白和mRNA的表达情况。结果:与假手术组相比，模型组大鼠神经功能缺陷评分较高(P<0.01);成模后大鼠脑组织出现明显的白色梗死灶。与模型组比较，温阳复元方组、miR-137模拟组和miR-137模拟对照组大鼠脑组织中miR-137以及TFR mRNA和蛋白表达量均明显降低，其中miR-137模拟组降低最为显著(P<0.01);同时，大鼠脑组织中BCRP mRNA和蛋白表达均明显升高，其中miR-137模拟组升高最为明显(P<0.01)。...