磷酸化肌球蛋白轻链及其激酶在耐药颞叶癫(癎)患者脑组织中的表达

目的探讨耐药性癫癎颞叶和海马脑组织中磷酸化肌球蛋白轻链(phosphorylation of myosin light chain,P-MLC)及其激酶(myosin light chain kinase,MLCK)的表达在癫癎芽生形成中的作用。方法免疫组化检测32例耐药性颞叶癫癎中P-MLC及其激酶MLCK的蛋白质表达水平,并与对照组比较。结果P-MLC免疫组化结果显示,耐药性颞叶癫癎组颞叶光密度值(0.35±0.13)高于对照组(0.19±0.027,P<0.05);耐药组海马光密度值(0.41±0.02)高于对照组(0.10±0.06,P<0.05)。免疫组化结果显示耐药组的MLCK表达水平在颞叶组织和海马组织中较对照组无统计学差异(P>0.05)。结论P-MLC及其激酶MLCK的功能与苔藓纤维芽生关系密切,P-MLC蛋白质产物在耐药性癫中明显升高,但其磷酸化激酶MLCK的表达并不升高,提示MLCK和去磷酸化酶间动态平衡被打破是P-MLC升高的原因,而P-MLC的升高可能在苔藓纤维芽生的形成中发挥重要作用。     

小脑变性相关蛋白2 mRNA在癫痫患者脑组织中的表达及其临床意义

目的了解小脑变性相关蛋白2(CDR2)mRNA在癫痫(EP)患者脑组织中的表达及其临床意义。方法将48例EP患者分成耐药(40例)和非耐药(8例)两组,用基因芯片扫描和FQ-PCR分别检测脑组织中CDR2基因表达,并与对照组比较。结果基因芯片扫描提示CDR2 mRNA在EP患者与对照组中的表达差异有统计学意义(P<0.05)。FQ-PCR结果与基因芯片扫描一致。结论EP患者脑组织中有CDR2 mRNA表达,由于其表达产物可通过血-脑脊液屏障进入脑脊液(CSF)和血液中,因而检测CDR2 mRNA在血或CSF中的表达产物有可能成为诊断EP的一个重要指标。     

耐药性颞叶癫痫脑组织中隆纹菌素的表达及临床意义

目的 研究耐药性颞叶癫痫患者脑组织中隆纹菌素(STRN)的表达,探讨其在耐药性颞叶癫痫发病中的意义.方法 从重庆医科大学附属第一医院神经内科建立的耐药性癫痫患者脑组织库中随机抽取42例耐药性颞叶癫痫患者术后脑组织.采用基因芯片检测STRN eDNA的表达,以Cy3-dCTP标记对照组cDNA,以Cy5-dCTP标记实验组eDNA,收集荧光信号,Cy5/Cy3*(Cy3*为校正后的Cy3信号值)小于0.5或大于2.0提示基因mRNA有表达差异.采用免疫组织化学、免疫荧光、Western blotting检测STRN的蛋白表达,并与对照组(12例,均为行手术减压或清创患者的颞叶脑组织)进行比较.结果 耐药性颞叶癫痫患者颞叶脑组织中编码STRN的基因出现低表达(Cy5/Cy3*值为0.384).STRN蛋白在耐药性颞叶癫痫患者颞叶脑组织中的表达量与对照组相同部位比较明显降低:免疫组化显示实验组光密度值(0.310 8±0.108 7)明显低于对照组(0.421 04±0.120 2,P<0.05);免疫荧光检测亦显示实验组光密度值(0.026 04±0.023 2)明显低于对照组(0.050 6±0.001 1,P<0.05);Western blotting检测显示实验组STRN蛋白表达(光密度值0.591 4±0.219 7)明显低于对照组(0.980 4±0.140 1,P<0.05).结论 耐药性颞叶癫痫患者颞叶脑组织中STRN表达明显降低.STRN表达降低及其引发的雌激素信号转导、内源性一氧化氮合成减弱在耐药性颢叶癫痫发病中可能有重要作用.     

耐药性癫(癎)患者脑组织中热休克蛋白27相关蛋白1的表达

目的研究热休克蛋白27相关蛋白1(heat shock 27 000 associated protein 1,HSPBAP1, GenBank:AK096705)在耐药性癫痫患者脑组织中的表达,探讨其在耐药性癫痫发病机制中的作用。方法从重庆医科大学附属第一医院神经内科建立的耐药性癫痫脑库中随机抽取36例耐药性癫痫患者术后脑组织,用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)和免疫组化法对HSPBAP1的表达进行检测,并与8例对照进行比较。结果耐药性癫痫患者脑组织中HSPBAP1 mRNA的相对表达量是对照组的34．11倍;HSPBAP1蛋白在耐药性癫痫患者颞叶(0．0507±0．0003,P<0．01)和海马(0．0488±0．0196,P<0．05)中的表达量,与对照组相同部位比较明显增加。结论耐药性癫痫患者脑组织中HSPBAP1表达增高,能抑制热休克蛋白27(HSP27)的神经元保护作用,可能是导致神经元凋亡及海马苔藓纤维发芽的一个重要原因。     

MCP-1在难治性癫(癎)患者脑组织中的表达

目的 了解难治性癫(癎)患者脑组织中单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)的表达,探索其在难治性癫(癎)发病机制中的作用.方法在基因芯片扫描获阳性结果基础上,用免疫组织化学方法 研究40例难治性癫(癎)患者脑组织中MCP-1的表达,并与对照组进行比较.结果 基因芯片扫描显示MCP-1 mRNA表达上调,免疫组化结果进一步证实MCP-1在难治性癫(癎)患者脑组织中的表达较对照组明显增多(P＜0.05).结论 MCP-1在难治性癫(癎)的发病机制中可能起着重要作用,阻断MCP-1有可能改变难治性癫(癎)的预后.     

耐药性颞叶癫癎患者脑组织中甲状腺受体相关蛋白220基因表达及其临床意义

中枢神经系统内存有与周围功能不同的甲状腺及雌激素受体,它们与脑内多种生理功能有关.甲状腺素受体结合蛋白220(thyroid receptor associated protein, TRAP220)以配体依赖形式与甾体激素核受体形成复合物,是脑内甲状腺素和雌激素发挥生理作用的重要环节[1-3] .我们从基因和蛋白质水平研究了耐药性颞叶癫NFDA1患者脑组织中TRAP220的表达,探索其临床价值.