c-fos反义寡核苷酸对谷氨酸神经毒性鼠脑损伤的防护

目的　探讨c-fos基因的表达在谷氨酸神经毒性中的作用。方法　在9只SD大鼠侧脑室注射c-fos反义寡核苷酸以阻断脑组织c-fos基因的表达,并用c-fos正义寡核苷酸为对照。观察脑组织中水、电解质含量和突触体内Ca2+浓度的变化,并采用细胞形态计量分析及免疫组织化学方法,观察大脑皮质、海马CA1区神经细胞数目、形态的变化及c-fos基因的表达。结果　c-fos反义寡核苷酸可有效地阻断脑组织c-fos基因的表达,降低脑组织c-fos阳性细胞率（9.4%±2.8%和74%±3%,P＜0.01）,抑制谷氨酸神经毒性所致的脑组织含水量（79.9%±0.4%和82.3%±0.8%,P＜0.01）、钠（5.05mg/g干重±0.39mg/g干重和5.98mg/g干重±0.50mg/g干重,P＜0.01）及细胞内Ca2+（176nmol/L±35nmol/L和344.12±50.13,P＜0.01）含量的增加,抑制谷氨酸所致大脑皮质（157±10和145±7,P＜0.01）及海马CA1区（297.64±18.3和210±19,P＜0.01）神经细胞的丢失,减轻神经细胞的形态学损伤。c-fos正义寡核苷酸无此效应。结论　c-fos基因的表达在谷氨酸神经毒性脑损伤的发生中起有重要作用,阻断c-fos基因的表达可以拮抗谷氨酸神经毒性。     

数字虚拟切片的云盘共享和移动应用

正在我国高等医学院校基础医学形态学(组织学胚胎学、病理解剖学、医学寄生虫学等)实验室课程实施的教学方法,传统上是通过经典的光学显微镜对组织器官玻璃切片和标本进行观察学习。近年来,随着计算机技术、网络技术的不断发展,在形态学实验教学方面,显微数码互动教学给显微镜下的微观世界教学带来了一些变革,在一定程度上实现了信息资源的共享,但这     

Krüppel样因子4对阿霉素诱导大鼠心肌细胞H_9C_2凋亡的影响

目的探讨阿霉素对大鼠心肌细胞H9C2凋亡的影响及Krppel样因子4过表达对阿霉素所致H9C2细胞凋亡的影响。方法采用台盼蓝染色检测细胞存活率,流式细胞术检测细胞凋亡率,采用Western blotting检测Krppel样因子4及凋亡相关基因多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶的表达。结果阿霉素能够诱导H9C2细胞凋亡,采用5μmol/L阿霉素处理时,24h变化最为明显;Krppel样因子4过表达之后,细胞凋亡率较转空载体组更高,达87.90%。阿霉素能够诱导Krppel样因子4在H9C2细胞中表达增加;Krppel样因子4过表达组多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶裂解片段的表达水平明显上调。结论Krppel样因子4能够促进阿霉素诱导的大鼠心肌细胞H9C2凋亡,其作用机制与多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶有关。     

一氧化氮在胃癌进展中的作用

目的探讨一氧化氮（ＮＯ）在胃癌发病过程中的作用。方法４２例经胃镜活检、病理检查证实为胃癌,采用地高辛标记的诱导型一氧化氮合酶（ｉＮＯＳ）ｍＲＮＡ探针经原位杂交显示细胞内的ｉＮＯＳｍＲＮＡ的表达情况,并与癌周组织及浅表胃炎组织比较。结果在４２例胃癌患者,ｉＮＯＳｍＲＮＡ信号强阳性（＋＋＋）１１例,中度阳性（＋＋）１４例,低度阳性（＋）１３例,可疑阳性（±）３例,阴性（－）１例;在癌周组织多为（±）或（－）;与浅表性胃炎相比,差异有高度显著性（Ｐ＜０．０１）。结论大多数胃癌患者的癌细胞内ｉＮＯＳｍＲＮＡ表达阳性,提示胃癌细胞自身能产生一氧化氮     

巢蛋白在人胚胎消化管的表达

目的　通过研究不同时期人胚胎消化管巢蛋白的表达及其变化探讨巢蛋白在消化管发育过程中的作用。 方法　取3~8月人胚胎食管、胃和小肠,常规石蜡切片,采用免疫组织化学法检测巢蛋白在胚胎消化管中的表达及分布。 结果　各胎龄段（3~8月）消化管均有巢蛋白的表达。巢蛋白在消化管主要表达在固有层、黏膜下层和肌层内的微血管和毛细血管壁上,且巢蛋白的表达随胎龄的增加而减少。与发育早期组相比,发育中期、晚期胚胎食管、胃和小肠组织中巢蛋白的表达显著减少（P<0.05）,差异有统计学意义。而在发育中期和发育晚期巢蛋白的表达无显著性差异（P>0.05）。 结论　巢蛋白在胎儿消化管壁的微血管和毛细血管的管壁上表达,且随着胎儿发育,其表达逐渐减少,提示巢蛋白在这些器官组织的血管形成过程中起作用。     

Experimental Study of Protective Effect of Qingkailing(清开灵) on Brain Damage Induced by Glutamate

Ｇｌｕｔａｍａｔｅｉｓａｎｉｍｐｏｒｔａｎｔｅｘｃｉｔａｔｏｒｙｎｅｕ ｒｏｔｒａｎｓｍｉｔｔｅｒｉｎｃｅｎｔｒａｌｎｅｒｖｅｓｙｓｔｅｍ．Ｔｏｘｉｃｅｆｆｅｃｔｗｏｕｌｄｂｅｉｎｄｕｃｅｄｗｈｅｎｔｈｅｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｏｆｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒｇｌｕｔａｍａｔｅｉｎｃｒｅａｓｅｓｔｏｏｈｉｇｈ．Ｉｔｈａｓｂｅｅｎｐｒｏｖｅｄｂｙｍａｎｙｓｔｕｄｉｅｓｔｈａｔｔｈｅｅｘｃｉ ｔａｔｏｒｙｎｅｕｒｏｔｏｘｉｃｉｔｙｏｆｇｌｕｔａｍａｔｅｐｌａｙｓａｎｉｍ ｐｏｒｔａｎｔｒｏｌｅｉｎｔｈ…     

清开灵抗大鼠谷氨酸神经毒性脑损伤的实验研究

目的：观察清开灵对大鼠谷氨酸神经毒性脑损伤的作用。以寻找有效的抗谷氨酸神经毒性的中西药物。方法：采用细胞形态计量、电镜及免疫组织化学方法，观察清开灵对谷氨酸所致大鼠脑损伤的影响。结果：清开灵可对抗谷氨酸所致的大鼠脑组织水、钠含量的增加，减轻谷氨酸所致的皮层及海马细胞形态结构的损伤，降低脑组织中ｃ－ｆｏｓ阳性细胞率。结论：清开灵具有抗谷氨酸神经毒性作用。其作用机制与抑制谷氨酸所致的ｃ－ｆｏｓ基因表达     

兔抗大鼠LRRN3多克隆抗体的制备及其表达

背景：神经系统富亮氨酸重复超家族成员LRRN3是一类富含LRR重复序列的蛋白,可能与神经系统发育、分化和信息传递等功能密切相关,研究其功能对于神经系统发育调控以及损伤修复的机制有着重要意义. 目的：制备大鼠LRRN3多克隆抗体,并初步研究其蛋白表达谱. 设计,时间和设置：相关细胞学和分子生物学实验在中南大学湘雅医学院组织学与胚胎学系和神经生物学系完成,实验时间为2007年到2009年. 材料：免疫用抗原为前期在原核工程菌E.coli BL21（DE3）中表达的大鼠LRRN3 C端结构域重组蛋白;免疫动物为雄性新西兰兔2只. 方法：以前期制备的大鼠LRRN3 C端结构域重组蛋白为抗原免疫雄性新西兰兔,制备兔抗大鼠LRRN3多克隆抗体,并运用ELISA和Western Blot对抗体进行鉴定.收获并纯化抗体, 应用免疫组织化学技术和Western Blot等实验初步检测LRRN3蛋白在成年大鼠体内的蛋白表达. Main outcome measures: 运用ELISA鉴定抗 LRRN3血清效价;Western blot鉴定抗 LRRN3 多克隆抗体的特异性;免疫组化技术和Western blot检测LRRN3蛋白在大鼠体内的表达. 结果：获得较高纯度的兔抗大鼠LRRN3多克隆抗体,抗血清效价达1：1000;Western Blot检测SD大鼠大脑组织总蛋白,可见在分子量约79kD 处有一清晰的条带,与全长 LRRN3 理论大小一致;运用该抗体检测大鼠体内LRRN3的蛋白表达谱,结果表明该蛋白主要在中枢神经系统表达,阳性部位为大脑皮质多级神经元、海马齿状回和CA1区多级神经元以及小脑蒲肯野细胞,神经胶质细胞中无明显阳性反应. 结论：制备了兔抗大鼠LRRN3多克隆抗体,并对大鼠LRRN3蛋白的表达进行了初步检测. 关键词：多克隆抗体,制备,蛋白表达,LRRN3     

转化生长因子β在胃癌细胞内的表达

目的：观察胃癌细胞内转化生长因子（ＴＧＦ）β的表达情况,探讨胃癌发展过程中ＴＧＦβ的可能作用。方法：４２例经胃镜活检、病理检查证实为胃癌。４４例浅表性胃炎的活检组织,采用免疫细胞化学方法—ＳＰ法显示ＴＧＦβ１及β２,其表达强度采用等级表示（由弱到强依次为－、±、＋、＋＋、＋＋＋）。结果：在４２例胃癌患者,ＴＧＦβ１无１例强阳性（＋＋＋）,中度阳性（＋＋）１例,低度阳性（＋）１０例,可疑阳性（±）３例,阴性（－）２８例,阳性率为２６．２％。ＴＧＦβ２强阳性（＋＋＋）５例,中度阳性（＋＋）１６例,低度阳性（＋）１３例,可疑阳性（±）２例,阴性（－）６例;阳性率为８１．０％。４４例浅表性胃炎患者,ＴＧＦβ１无１例阳性（＋～＋＋＋）,可疑阳性（±）４例,阴性（－）４０例。ＴＧＦβ２无１例中度阳性及强阳性（＋＋～＋＋＋）,低度阳性（＋）１０例,可疑阳性（±）１例,阴性（－）３３例;阳性率为２２．７％。胃癌患者的ＴＧＦβ１、β２阳性率均明显高于浅表性胃炎,ＴＧＦβ２的阳性率在胃癌更高于ＴＧＦβ１。结论：ＴＧＦβ１,尤其是ＴＧＦβ２表达的增强是胃癌恶性演变的一个标志。