氧糖剥夺再灌注后BV2细胞中差异表达关键基因的筛选及鉴定

目的 筛选氧糖剥夺再灌注后BV2细胞中差异表达的基因.方法 取小鼠小胶质细胞BV2分为正常组(control组)和氧糖剥夺再灌注组(OGD/R组),对两组细胞进行转录测序筛选差异表达基因,在线网站(ht-tps://www.xiantao.love/products)对差异表达基因进行基因本体论(GO)和京都基因与基因...     

尼古丁上调星形胶质细胞内源性Cryab抑制Aβ聚集的研究

目的研究尼古丁激活星形胶质细胞α7胆碱能受体(α7 nicotinic receptors,7 n AChRs)上调内源性B-晶状体蛋白(αB-crystallin,Cryab)并抑制β淀粉样蛋白(Amyloid,Aβ)集聚的现象及其机制。方法分离24 h内新生乳鼠大脑皮质培养原代星形胶质细胞并鉴定;体外制备Aβ_(1-42)寡聚体;将细胞分为对照组、尼古丁组、α7n AChRs阻断剂(methyllycaconitine,MLA)组、Aβ_(1-42)组、尼古丁+Aβ_(1-42)组、PI3K信号通路阻断剂LY294002+尼古丁+Aβ_(1-42)组。用蛋白印迹法(Western blotting)检测细胞内Cryab、P-Akt(ser473)、Aβ寡聚体的表达水平。结果尼古丁可以显著上调星形胶质细胞内源性Cryab蛋白(P0.05);尼古丁能够显著上调磷酸化Akt蛋白水平(P0.05);在细胞裂解液及培养基中,尼古丁显著增强星形胶质细胞对Aβ聚集的抑制作用(P0.01)。结论尼古丁通过激活星形胶质细胞α7 nAChRs上调内源性Cryab从而抑制Aβ集聚;PI3K/Akt信号通路可能参与尼古丁激活星形胶质细胞α7 n AChRs上调内源性Cryab蛋白抑制Aβ集聚的过程。为进一步研究尼古丁抑制Aβ集聚的可能机制提供了实验基础。     

阿尔茨海默病患者Hcy、FOL、Vit B12水平与ApoE基因多态性研究

目的：研究阿尔茨海默病(AD)患者同型半胱氨酸(Hcy)、叶酸(FOL)、维生素B₁₂(Vit B₁₂)水平与载脂蛋白E(Apo E)基因多态性。方法：选取2020年1月—2022年10月贵州省第二人民医院收治的368例AD患者作为AD组,选取同期收治的326例其他精神类疾病患者作为对照组。检测两组患者的Apo E基因型及Hcy、FOL、Vit B₁₂水平。比较两组Apo E等位基因、ApoE基因型分布情况、Hcy、FOL、Vit B₁₂水平及ε4基因携带情况。比较两组携带ε4基因与未携带ε4基因患者Hcy、FOL、Vit B₁₂水平。结果：AD组ε4等位基因占比高于对照组,ε3等位基因占比低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。AD组ε2/ε3和ε3/ε3基因型占比显著低于对照组,ε3/ε4和ε4/ε4、ε2/ε4基因型占比显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。AD组Hcy水平高于对照组,Vit B₁₂水平低于对照组,差异有...     

α-硫辛酸通过mTOR通路抑制缺血再灌注诱导的PC12细胞自噬性凋亡

目的研究α-硫辛酸(LA)对PC12细胞缺血再灌注损伤的保护作用及其分子机制。方法传代培养PC12细胞,PC12细胞缺氧/复氧(氧糖剥夺4 h,复氧18 h)模拟缺血再灌注损伤模型。实验分为正常组、缺氧/复氧组、缺氧/复氧+α-LA、缺氧/复氧+自噬抑制剂巴弗洛霉素(Baf)A1组。CCK8筛选α-LA的有效作用浓度;流式细胞术检测细胞凋亡变化;Western印迹检测细胞促凋亡蛋白B细胞淋巴瘤(Bcl-2)相关X蛋白(Bax)、酶切caspase-3、自噬标志分子SQSTM-1/P62、LC3-Ⅱ/Ⅰ及mTOR通路的表达变化。结果缺氧/复氧显著降低PC12细胞的存活率(P<0.05),Western印迹结果显示Bax、酶切caspase-3、LC3-Ⅱ/Ⅰ的表达水平均显著升高(P<0.05),P62和p-mTOR的表达水平降低(P<0.05);与缺氧/复氧组比较,给予α-LA和Baf A1均能显著降低缺氧/复氧诱导的凋亡水平(P<0.05)。结论α-LA通过抑制缺氧/复氧诱导的过度自噬进而减少过度自噬诱导的细胞凋亡。