SDF-1/CXCR4生物学自噬轴与脑缺血损伤研究进展

正抑制缺血半暗带神经元凋亡和血管损伤是对缺血性脑血管病治疗的重点。脑缺血发生时,在脑室下区、海马、大脑皮层等处的神经干细胞能够自主增殖、迁移、分化成为神经元和胶质细胞,将神经缺损区填补,形成新神经环路,同时新神经元能够部分取代受损的神经元行使其功能,由此观之内源性神经干细胞能够修复脑缺血损伤。但是,脑缺血之后被激活的内源性神经干细胞的数目极少,约有0.2%的内源性神经干细胞分化成新神经元;因而能够对新神经元的迁移、分     

补阳还五汤对脑出血大鼠PI3K/AKT信号通路的影响及其神经保护作用的机制

目的观察并探究补阳还五汤对脑出血大鼠脑组织磷脂酰肌醇3激酶/丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(PI3K/AKT)信号转导通路的影响及其神经保护作用的可能机制。方法 72只SD大鼠随机分为四组:假手术组、模型组、补阳还五汤组、银杏叶片组,每组18只。其中模型组、补阳还五汤组、银杏叶片组采用Rosenberg法制作脑出血大鼠模型。Garcia法检测大鼠神经功能评分,电镜观察神经元线粒体超微结构,western blot法检测磷酸化蛋白激酶(p-AKT)蛋白表达,TUNEL法检测细胞凋亡变化,免疫组化法检测B细胞淋巴瘤基因-2(bcl-2)蛋白、Bcl-2相关X蛋白(bax)的表达,甲酰胺法检测血脑屏障(BBB)通透性,干湿重法检测脑组织含水量。结果与脑出血模型组相比,补阳还五汤治疗明显提高神经功能学评分(P0.05),降低BBB通透性,减少脑组织水含量(P0.05),上调p-AKT、bcl-2蛋白表达,下调bax蛋白表达,减轻线粒体损伤,抑制神经元凋亡。结论补阳还五汤抗脑出血引起脑损伤的作用机制可能与其激活PI3K/AKT信号途径,抑制神经元凋亡,降低BBB通透性,减轻脑水肿有关。     

补阳还五汤对脑出血模型大鼠脑组织CXCR4-PI3K自噬信号传导通路及Beclin-1的影响

BACKGROUND:Buyang Huanwu Decoction is commonly used in clinical medicine in treatment of intracerebral hemorrhage. Previous studies have been found that it has excellent neuroprotective effect, can efficiently inhibit the apoptosis of nerve cells. Autophagic activity is closely related to apoptosis of nerve cells. CXCR4-PI3K autophagy signaling pathway has been verified in clinic. However, the effect of Buyang Huanwu Decoction is poorly understood. There is no study on Beclin-1 in the neuroprotective studies of Buyang Huanwu Decoction.  OBJECTIVE:To explore the effects of Buyang Huanwu Decoction on CXCR4-PI3K autophagy signaling pathway and Beclin-1 in rats with cerebral hemorrhage and related mechanisms.  METHODS:According to Rosenberg method, a rat model of cerebral hemorrhage was replicated and intragastrically administered Buyang Huanwu Decoction. Western blot assay was used to measure Beclin-1 protein. Immunohistochemical method was utilized to detect the expression of PI3K, AKT, stromal cell derived factor 1 and CXCR-4 protein. TUNEL assay was applied to identify apoptosis.  RESULTS AND CONCLUSION: (1) After administration, Buyang Huanwu Decoction could reduce the number of neuronal apoptosis in rats with intracerebral hemorrhage, up-regulate the expression of Beclin-1, PI3K, AKT, stromal cell derived factor 1, and CXCR-4 protein, and exert neuroprotective effect. (2) Buyang Huanwu Decoction could activate CXCR4-PI3K autophagy signal transduction pathway, both to stimulate autophagy and to regulate autophagy state, can inhibit apoptosis, and exert cerebral protective effect.     

补阳还五汤对实验性脑出血大鼠磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B及水通道蛋白4表达的影响

目的：探究补阳还五汤对脑出血大鼠脑组织磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶 B（phosphoinositide 3-kinase/protein kinase B,PI3K/AKT）信号通路、水通道蛋白4（aquaporin-4,AQP4）的影响,阐明作用机制,为脑出血所致脑水肿治疗提供明确的方向与靶点。方法：SD大鼠随机分为6组：假手术组、模型组、补阳还五汤低、中、高剂量组、银杏叶片组,采用Rosenberg法复制大鼠脑出血模型,免疫组化法检测PI3K、AKT蛋白表达,免疫荧光法检测水通道蛋白AQP4“极性”表达,分光光度法检测脑组织伊文思蓝（Evans Blue,EB）含量,干湿重法测定脑组织水含量。结果：与模型组比较,补阳还五汤组、银杏叶片组PI3K、AKT蛋白表达显著升高（P<0.05）,AQP4在星胶细胞终足膜上的集中表达程度显著升高（P<0.05）,EB含量、脑组织含水量显著降低（P<0.05）。结论：补阳还五汤对脑出血的保护作用机制可能与其能够激活PI3K/AKT信号通路,调控AQP4的“极性”表达,降低血脑屏障通透性,减轻脑水肿有关。     

中药补阳还五汤对大鼠脑出血神经元凋亡及磷酸化细胞外信号调节蛋白激酶蛋白表达的影响

目的探讨补阳还五汤对脑出血大鼠血肿周围神经元凋亡的影响。方法清洁级成年SD大鼠96只采用Rosenberg法建立大鼠脑出血模型后第2天,按照组别(假手术组、模型组、补阳还五汤组、银杏叶片组)灌胃给药,1次/d,连续14 d。末次给药后,Garcia法检测大鼠神经功能评分,转移酶介导的三磷酸脱氧鸟苷-生物素刻痕末端标记(TUNEL)法检测神经元凋亡;Western印迹检测蛋白磷酸化细胞外信号调节蛋白激酶(p-ERK)的表达,免疫组织化学法检测凋亡蛋白Bax、Bcl-2表达。结果与假手术组相比,模型组脑组织TUNEL阳性神经元凋亡数目明显增多,Bax增加的同时Bcl-2明显下降(P0.05);补阳还五汤组、银杏叶片组Bax蛋白表达降低并且Bcl-2明显升高(P0.05),TUNEL阳性神经元数目显著减少(P0.05)。结论补阳还五汤对脑出血具有保护作用,其机制可能与减少凋亡蛋白Bax及增加抑凋蛋白Bcl-2的表达,抑制脑出血诱发的神经元凋亡有关。     

补阳还五汤对脑出血模型大鼠脑组织PI3K、Akt、Bcl-2、BAX蛋白表达的影响

BACKGROUND:Buyanghuanwu decoction has excellent neuroprotective effect and can efficiently suppress nerve cell apoptosis caused by cerebral ischemia-reperfusion injury.     

补阳还五汤提取物灌胃对脑出血大鼠脑组织中PI3K、AKT、Caspase-3表达的影响

目的 观察补阳还五汤提取物对脑出血大鼠脑组织磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、丝/苏氨酸蛋白激酶(AKT)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶3(Caspase-3)表达的影响,探讨其对脑组织的保护作用机制。方法 将72只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、补阳还五汤组、银杏叶片组各18只,后4组采用Rosenberg法建立脑出血大鼠模型后,分别给予生理盐水、补阳还五汤提取物、银杏叶片连续灌胃35 d。用免疫组化法检测PI3K、AKT、Caspase-3蛋白表达,TUNEL法检测脑组织细胞凋亡情况,干湿重法检测脑组织含水量,甲酰胺法检测血-脑脊液屏障通透性。结果 与模型组比较,补阳还五汤组、银杏叶片组PI3K、AKT蛋白表达水平升高,Caspase-3蛋白表达水平降低,脑组织含水量、凋亡细胞数减少,血-脑脊液屏障通透性降低(P均<0.05)。结论 补阳还五汤提取物可能通过激活PI3K/AKT信号通路,降低血-脑脊液屏障通透性来保护脑出血大鼠脑组织。     

补阳还五汤对脑出血大鼠脑组织水通道蛋白4表达及血-脑脊液屏障通透性的影响研究

目的 探讨补阳还五汤对脑出血大鼠脑组织水通道蛋白4（AQP4）表达及血-脑脊液屏障通透性的影响。方法 2014年3月-2015年11月,采用随机数字表法将成年雄性SPF级SD大鼠分为假手术组、模型组、补阳还五汤低剂量组、补阳还五汤中剂量组、补阳还五汤高剂量组,各24只。其中模型组、补阳还五汤各剂量组制备脑出血模型。造模后第2天起,补阳还五汤低剂量组、补阳还五汤中剂量组、补阳还五汤高剂量组灌胃补阳还五汤,药量分别为13.2、26.5、53.0 g·kg-1·d-1,连续给药14 d,假手术组及模型组给予等体积的0.9%氯化钠溶液。免疫组织化学法检测磷酸化肌醇磷脂3激酶（PI3K）、蛋白激酶B（AKT）表达水平,免疫荧光标记法检测AQP4表达水平,干湿重法检测脑组织含水量,甲酰胺法检测血-脑脊液屏障通透性〔以依文思蓝（EB）含量表示〕。结果 假手术组、模型组、补阳还五汤低剂量组、补阳还五汤中剂量组、补阳还五汤高剂量组PI3K、AKT表达水平比较,差异均有统计学意义（P＜0.05）;其中补阳还五汤低剂量组、补阳还五汤中剂量组、补阳还五汤高剂量组PI3K表达水平高于模型组;补阳还五汤中剂量组、补阳还五汤高剂量组AKT表达水平高于模型组（P＜0.05）。5组AQP4表达水平比较,差异有统计学意义（F=95.79,P＜0.001）;其中补阳还五汤低剂量组、补阳还五汤中剂量组、补阳还五汤高剂量组AQP4表达水平高于模型组（P＜0.05）。5组脑组织含水量比较,差异有统计学意义（F=16.21,P＜0.001）;其中补阳还五汤高剂量组脑组织含水量低于模型组（P＜0.05）。5组脑组织EB含量比较,差异有统计学意义（F=60.05,P＜0.001）;其中补阳还五汤低剂量组、补阳还五汤中剂量组、补阳还五汤高剂量组脑组织EB含量低于模型组（P＜0.05）。结论 补阳还五汤能够减轻脑出血诱发的脑水肿,其机制可能与其激活PI3K/AKT信号转导通路,调控AQP4极性表达,降低血-脑脊液屏障通透性有关。     

补阳还五汤对脑损伤大鼠脑组织凋亡信号通路的影响

目的探究补阳还五汤对脑出血大鼠脑组织PI3K/AKT信号转导通路的影响及可能机制。方法 SD大鼠随机分为假手术组、模型组、补阳还五汤组、银杏叶片组,其中模型组、补阳还五汤组、银杏叶片组采用Rosenberg法复制脑出血大鼠模型。免疫组化法检测PI3K、AKT、Bcl-2、BAX蛋白的表达,TUNEL法检测细胞凋亡变化,干湿重法检测脑组织水含量,甲酰胺法检测血脑屏障(BBB)通透性。结果与模型组比较,补阳还五汤组、银杏叶片组PI3K、AKT蛋白表达、Bcl-2/BAX值均显著增高(P0.05),脑组织含水量、伊文思蓝含量、细胞凋亡数量显著降低(P0.05)。结论补阳还五汤对脑出血的保护作用机制可能是其不但降低了BBB通透性,而且激活了PI3K/AKT信号通路,介导Bcl-2、BAX蛋白表达变化,调节二者之间的比值。