His-tag 不影响 RSV 重组蛋白GIF/M2 的免疫原性

目的:观察 His-tag 是否影响 RSV 重组蛋白 GIF/M2 的免疫原性.方法:PCR 扩增 G1 和 F/M2 基因片段,插入表达载体 pET-His 和 pET-DsbA-His 中,转化E.coli BL21(DE3),IPrG 诱导表达,采用 Ni+螯合亲和层析法纯化得 His-GlF/M2 和 DsbA-His-GIF/M2,将后者用凝血酶消化,再经Ni+螯合亲和层析法纯化得 GIF/M2,将 His-GIF/M2 和 GIF/M2 免疫 BALB/c 小鼠,用 ELISSA 测定抗体滴度,MTT 法测定细胞毒性 T 细胞活性(CTL).结果:两种蛋白在BALB/ c 小鼠中诱导的 RSV 特异性抗体和 CTL 活性无显著差异.结论:His-tag 不影响 RSV 重组蛋白GIF/M2 的免疫原性.     

重组FN多肽CH50抑制黑色素瘤B16细胞体内转移的研究

目的研究重组纤黏连蛋白(FN)多肽CH50对小鼠黑色素瘤B16细胞体内转移的影响,以探讨CH50多肽抑制肿瘤转移的可能分子机制。方法体外培养黑色素瘤B16细胞,用荧光染料CFSE标记,接种脾脏后24h取脾、肝、肺做冰冻切片,观察肿瘤细胞在3种组织中的侵袭情况。从脾脏接种B16细胞,建立体内肿瘤转移动物模型,采用基于流体动力学的体内基因转染方法于小鼠体内表达CH50多肽,RT-PCR检测CH50 mRNA在肝组织的表达,Western印迹检测CH50多肽的表达。通过比较原位肿瘤结节及转移结节在数量、大小、分布上的差异及检测原位肿瘤组织中MMP-2、MMP-9表达差异,观察CH50多肽的治疗效果。结果注射24h后即可在脾脏形成荧光结节。pCH510质粒通过尾静脉注射后,可在肝组织中检测到CH50 mRNA及CH50多肽的表达。从脾脏接种B16细胞后第14天可在脾脏形成原发肿瘤,至第35天肝脏表面已形成转移瘤结节,成功建立了体内器官间(脾转肝)肿瘤转移动物模型。体内转染表达CH50多肽能抑制肿瘤生长、侵袭和转移,抑制原位肿瘤结节中MMP-2、MMP-9的表达。结论CH50多肽可以通过对MMP-2、MMP-9蛋白表达的抑制作用来抑制黑色素瘤B16细胞的成瘤能力和体内侵袭、转移能力。     

新城疫病毒pIRHN核酸疫苗构建和表达及对肿瘤细胞的影响

目的：研究NDV HN基因抗肿瘤作用及其可能机制。方法：以 pIRES1neo为表达载体构建了 NDV HN基因的pIRHN核酸疫苗，在体外转染HeLa细胞，用间接免疫荧光和Western blot检测pIRHN在真核细胞中表达状况，用荧光显微镜、DNA琼脂糖电泳及TUNEL染色等方法，检测HN基因导致细胞死亡的类型；用3，5-二羟基甲苯法测定HeLa细胞唾液酸含量的变化。结果：pIRHN 转染HeLa细胞后，能够在真核细胞中表达，能促进肿瘤细胞死亡，其死亡方式主要以诱导细胞凋亡为主，pIRHN使 HeLa细胞唾液酸含量减少。结论：用 NDV HN基因所构建的核酸疫苗能够在真核细胞中高效表达，表达的 HN蛋白主要位于胞膜，胞浆中亦有 HN蛋白表达；pIRHN具有抗肿瘤作用，可能通过其表达产物与肿瘤细胞唾液酸受体的相互作用，发挥其抗肿瘤作用。本实验为迸一步阐明NDV抗肿瘤作用机制提供了理论依据。     

His-tag不影响RSV重组蛋白G1F/M2的免疫原性

目的：观察His-tag是否影响RSV重组蛋白G1F/M2的免疫原性。方法：PCR扩增G1和F/M2基因片段,插入表达载体pET-His和pET-DsbA-His中,转化E.coli BL21（DE3）,IPTG诱导表达,采用Ni^＋螯合亲和层析法纯化得His-G1F/M2和DsbA-His-G1F/M2,将后者用凝血酶消化,再经Ni＋螯合亲和层析法纯化得G1F/M2,将His-G1F/M2和G1F/M2免疫BALB/c小鼠,用ELISA测定抗体滴度,MTT法测定细胞毒性T细胞活性（CTL）。结果：两种蛋白在BALB/c小鼠中诱导的RSV特异性抗体和CTL活性无显著差异。结论：His-tag不影响RSV重组蛋白G1F/M2的免疫原性。     

基于电子鼻技术的不同品质鹿茸饮片气味特征分析

目的:基于电子鼻技术对不同品质鹿茸饮片气味特征进行分析与表征。方法:采用PEN3型电子鼻系统,分析22批鹿茸样品的气味特征,以对传感器响应值为指标,进行传感器区别贡献率分析(Loadings)、主成分分析(PCA)、线性判别分析(LDA)。结果:Loadings分析表明,5个传感器对鹿茸饮片气味特征具有较好的响应,不同规格鹿茸饮片气味差异贡献率主要体现为氮氧化物类、甲烷等短链烷烃、有机硫化物、醇醚醛酮类、芳香成分、无机硫化物等成分;PCA表明不同品种与规格鹿茸饮片,其气味的差异性比较明显;LDA发现不同品种及规格鹿茸饮片(除梅花鹿白片与粉片外)样品的气味差异均较明显,表明构成气味的物质存在差异性。结论:电子鼻技术可阐明不同品质鹿茸饮片气味的物质基础;不同品质鹿茸饮片气味存在差异性可揭示鹿茸饮片气味的科学内涵并为其质量控制提供参考。     

双切口双钢板治疗SchatzkerⅤ、Ⅵ型胫骨平台骨折

胫骨平台骨折是临床常见的一种关节内骨折.SchatzkerⅤ、Ⅵ型胫骨平台骨折多为高能量损伤,关节面破坏严重,骨折粉碎严重,胫前软组织多有不同程度损伤.     

复方郁金片抗肿瘤实验研究

目的:探究复方郁金片抗肿瘤的疗效.方法:以荷S180、艾氏腹水癌实体瘤小鼠为模型.用复方郁金片混悬液给小鼠灌胃观察复方郁金片的抑癌作用.结果:复方郁金片可使S180,艾氏实体瘤荷瘤小鼠瘤块重量减小.使S180腹水癌小鼠平均存活时间延长,并能显著提高增加S180荷瘤小鼠脾脏重量,提高荷瘤小鼠腹腔巨噬细胞吞噬率.提示复方郁金片具有抗肿瘤作用.     

运用PET技术研究头电针治疗抑郁症的机理

目的：运用正电子发射型计算机断层显像(PET)技术，探讨头电针治疗抑郁症的机理。方法：98例抑郁症患随机分为2组。治疗组50例，均接受头电针治疗，取穴为顶中线(MS5)、额中线(MSl)和双侧额旁1线(MS2)；对照组48例，均口服氟西汀。治疗组中20例、对照组中6例抑郁症患在为期6周的治疗前后分别接受PET检测。另有6例正常人接受自然状态下的PET检测，作为阴性对照。框取感兴趣脑区(ROI)，将各脑区所得葡萄糖代谢放射性计数以半定量方式进行方差分析。结果：抑郁症患额叶、扣带回、尾核等脑区葡萄糖代谢与正常人相比，有不同程度的降低。头电针治疗后，左右两侧额叶、右侧扣带回和左侧尾核葡萄糖代谢均有显升高；氟西汀治疗后，患左右两侧额叶、扣带回和尾核葡萄糖代谢都有显的升高。结论：头电针治疗抑郁症的机理与其提高脑区葡萄糖代谢有关。     

肝血管平滑肌脂肪瘤14例临床病理分析

目的：探讨肝血管平滑肌脂肪瘤（HAML）的病理特征、免疫表型、诊断和鉴别诊断。方法：对14例HAML病理资料,运用光镜和免疫标记,结合文献进行探讨。结果：14例组织学分型：经典的混合型11例（伴髓外造血2例）,肌瘤型3例。14例HAML平滑肌样瘤细胞均弥漫强阳性表达HMB45、Melan A、平滑肌肌动蛋白（SMA）。结论：构成HAML的三种肿瘤成分是平滑肌样瘤细胞、脂肪和血管。HAML具有广泛的形态学和组织学谱系,形成不同的组织学亚型,经常出现造血组织,以及平滑肌细胞的异源性表现,致使该肿瘤组织结构复杂多变,导致诊断困难,平滑肌样瘤细胞是本病唯一可靠的诊断性成分,并特征性地表达HMB45、Melan A和SMA,是确立诊断的最主要依据。