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目的研究成纤维细胞生长因子受体3(FGFR3)与人乳头瘤病毒2型(HPV2)E2对人角质形成细胞系HaCaT和正常人表皮角质形成细胞系NHEK分化的调控效应。方法在HaCaT和NHEK细胞中, 采用慢病毒转染法构建HPV2 E2稳转细胞系(HPV2 E2转染组), 采用质粒转染法构建过表达FGFR3或FGFR3突变体K650E的细胞, 即FGFR3-WT转染组、FGFR3-K650E转染组, 均以转染空载体的细胞为空载体对照组。采用实时荧光定量PCR检测HPV2 E2 mRNA表达, Western印迹法检测HPV2 E2、FGFR3及角质形成细胞分化标志性分子兜甲蛋白、聚丝蛋白、内披蛋白的表达。激光共聚焦显微镜观察HPV2 E2与FGFR3的细胞空间定位。两组数据比较采用独立样本t检验, 多组间比较采用单因素方差分析, 组间两两比较采用Dunnett-t检验。结果成功构建HPV2 E2稳转细胞系, HaCaT和NHEK细胞中HPV2 E2转染组HPV2 E2 FLAG蛋白表达量均显著高于空载体对照组(t值分别为13.71和25.91, 均P < 0.001);在HaCaT和NH... 相似文献
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