胎鼠肺泡Ⅱ型细胞的原代培养及鉴定

实验于2007-10/12在北京军区总医院附属八一儿童医院实验室完成.取孕19 d SD大鼠胎鼠肺组织进行原代培养,通过IgG包被瓶培养进行筛选纯化.分别于培养24,48,72 h后检测细胞的活力;利用共聚焦显微镜及电镜对肺泡Ⅱ型上皮细胞进行鉴定.各时间点Ⅱ型细胞活力均在90%以上,细胞纯度在91%以上,电镜下细胞胞浆内含有丰富的板层小体,细胞表面有微绒毛:共聚焦显微镜下细胞浆中有呈绿色荧光的SP-C阳性表达.胰蛋白酶加胶原酶消化,IgG包被瓶进行筛选所得肺泡Ⅱ型细胞活力及纯度均较高,可以作为肺泡Ⅱ型细胞的原代培养的常规方法;电镜和免疫荧光均可达到鉴定目的.     

小分子抑制剂LGK-974对乳腺癌细胞MCF-7和MB231生物学特性的影响

目的 探讨Wnt/β- 连环蛋白(Wnt/β-catenin)通路抑制剂LGK-974 对乳腺癌细胞系MCF-7 和MB231 细胞的作用及机制。 方法 培养乳腺癌细胞系 MCF-7 和 MB231 细胞,选用不同浓度的 LGK-974 分别处理两种细胞,检测细胞活力、周期分布、迁移和侵袭能力;通过蛋白质免疫印迹技术检测细胞周期相关蛋白的变化。结果 20 μmol/L LGK-974 和 25 μmol/L LGK-974 处理分别降低了MCF-7 和MB231 细胞在 3～5 d 的细胞活力(P<0.05);增加了 G₁/G₀比率,降低了G₂/M 比率 (P<0.05),导致细胞周期停滞;减弱了细胞的迁移和侵袭能力(P<0.05);降低了细胞周期关键蛋白CDC25A、CDC25C 的表达,增加了p-CHK2、P21 的表达。结论 LGK-974通过抑制细胞周期相关蛋白,抑制乳腺癌细胞系 MCF-7 和 MB231 的增殖、迁移和侵袭能力,为乳腺癌的治疗策略提供了新的依据。     

有核红细胞预测围产期窒息严重度和短期预后的价值

目的评估脐血有核红细胞(NRBC)的变化与围产期窒息严重度及短期预后的相关性。方法采用前瞻性序贯试验研究方案,随机选择245例足月新生儿为研究对象,比较病例组(142例窒息新生儿)和对照组(103例健康新生儿)脐血NRBC水平差异,评估NRBC与围产期窒息严重度指标1 min Apgar评分、脐动脉血pH及其短期预后的相关性。结果窒息组NRBC百分数和绝对数[(15.98±9.68)/100 WBC,(3.28±1.34)×109/L]显著高于正常对照组[(3.47±2.32)/100 WBC,(0.60±0.39)×109/L],差异比较有统计学意义(P均<0.001)。窒息新生儿1 min Apgar评分越低,酸中毒越重,则NRBC水平越高,提示缺氧缺血性脑病越重,围产期窒息短期预后越差(P<0.001)。结论脐血NRBC计数有助于早期预测围产期窒息严重度和短期预后。     

慢病毒介导TGF-β1 siRNA对高体积分数氧致新生小鼠肺损伤的影响

目的：探讨以慢病毒介导的小分子干扰RNA技术（siRNA）沉默转化生长因子β1（TGF-β1）基因对高体积分数氧致新生小鼠肺损伤的影响.方法：将100只新生昆明小鼠随机分为高氧组、干扰组、阴性干扰组、空气组4组,每组动物25只.分别构建含TGF-β1短发卡RNA（shRNA）及阴性对照序列的PRNAT-u6.2载体,慢病毒包装.于小鼠出生后3d时将两类慢病毒载体以鼻腔吸入法分别导入干扰组和阴性干扰组小鼠肺内.出生后4～14d时将高氧组、干扰组、阴性干扰组小鼠置于含600mL/LO2的氧箱内饲养.空气组仅置空气下饲养.出生后4,7,14,21,28d时分别随机杀取各组5只动物并取左上肺制作石蜡切片,进行组织形态学变化观察,测定放射状肺泡计数（RAC）和肺泡平均截距（MLI）.右肺组织以RT-PCR,Western Blot法分别检测TGF-β1 mRNA和蛋白表达水平.结果：经测序和双酶切鉴定,表达TGF-β1 shRNA的慢病毒载体构建成功;干扰组肺组织TGF-β1 mRNA水平在小鼠出生后4d即明显低于其他3组（P〈0.05）;出生后7,14,21,28d时干扰组TGF-β1 mRNA和蛋白表达水平均低于高氧组和阴性干扰组,但高于空气组（P均〈0.05）.出生后7,14,21,28d干扰组MLI低于高氧组和阴性干扰组而高于空气组（P均〈0.05）.RAC高于高氧组和阴性干扰组而低于空气组,差异均具有统计学意义（P〈0.05）.高氧组与阴性干扰组在各时间点上述各项指标的差异无统计学意义.结论：慢病毒载体介导的TGF-β1小分子干扰RNA对高体积分数氧吸入所致新生小鼠肺损伤具有保护作用.     

1200例输血前患者HBsAg、抗-HCV、抗-HIV及梅毒抗体检测的调查研究

目的回顾性分析肇庆市第一人民医院1 200例输血前患者乙肝表面抗原(HBsAg)、丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)、艾滋病病毒抗体(抗-HIV)及抗梅毒螺旋体抗体(抗-TP)检测的结果 ,旨在寻找该院输血前患者传染性标志物的分布特点,为提高医院医疗水平提供一定的数据支持。方法选取2010年1月至2016年6月于该院进行治疗且需要输血的1 200例患者作为调查对象。使用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测试剂盒测定患者的血HBsAg、抗-HCV、抗-HIV及抗-TP水平,分析不同科室各指标阳性率的特点,并根据患者基本病历资料分析不同因素对患者传染病阳性率的影响。结果 1 200例输血者4项感染指标的结果表明HBsAg的阳性率最高(9.08%),显著高于其他血清检测指标,差异有统计学意义(P0.05),其次抗-TP的阳性率也很高。157例阳性感染指标在各科室的分布结果表明,在妇产科、大内科以及血透中心中阳性例数占比较高,均在15%左右,显著高于儿科和血液病科。根据患者的基本病历资料数据对患者的血清学阳性检查数据进行比较,并通过χ2检验分析不同因素下患者阳性率的差异,结果显示,不同性别和年龄患者在阳性率上比较差异无统计学意义(P0.05),而在文化水平、收入水平、户籍以及遗传因素均与患者血清检查阳性率上有显著性影响,差异有统计学意义(P0.05)。结论 1 200例输血前患者血HBsAg、抗-HCV、抗-HIV及抗-TP检测结果表明,HBsAg的阳性率最高,不同文化水平、收入水平及户籍性质的人群的阳性率不同,有一定的分布规律,值得临床重点关注。     

新冠肺炎患者特异性抗体IgM、IgG和病毒RNA的动态变化

目的 研究新型冠状病毒感染患者IgM及IgG特异性抗体与新型冠状病毒核酸RT-PCR检测在住院期间的变化趋势。方法 将肇庆市第一人民医院收治的100例SARS-CoV-2感染住院患者根据是否接种疫苗分为疫苗组、无疫苗组。无疫苗组又分为重型、普通型及轻型和无症状组。监测所有患者住院0~<8 d、8~<15 d、15~<22 d、22~<29 d、29~<36 d及≥36 d的核酸检测结果和化学发光法测定的IgM和IgG抗体阳性率及S/CO值的动态变化趋势,比较不同组间的统计学差异。结果 疫苗组和无疫苗组,住院8~<15 d和≥36 d ,IgM抗体阳性率分别为55.6%（15/27）和68.5%（50/73）、0（0/27）和49.0%（36/73）,差异均有统计学意义（χ²=11.048,20.805,P<0.05）。住院0~<8 d和8~<15 d,IgG抗体阳性率分别为96.3%（26/27）和45.2%（33/73）、100.0%（27/27）和78.1%（57/73）,差异均有统计学意义（χ²=21.268,7.576,P<0.05）。住院8~<15 d、15~<22 d、22~<29 d、29~<36 d。RNA阳性率分别为29.6%（8/27）和76.7%（56/73）、14.8%（4/27）和65.8%（48/73）、7.4%（2/27）和42.5%（31/73）、7.4%（2/27）和26.0%（19/73）,差异均有统计学意义（χ²=18.964,20.490,10.957,4.119,P<0.05）。在住院不同时期,疫苗组IgG抗体S/CO值均高于无疫苗组（P<0.05）,而IgM抗体差异均无统计学意义（P>0.05）。重型患者的IgM抗体和IgG抗体在住院22~<29 d和29~<36 d的S/CO值均显著高于普通型、轻型及无症状组（F=17.694,15.116,4.037,4.115,均P<0.05）。结论 重型患者IgM和IgG抗体水平在康复过程中免疫防御的激活更大。在接种疫苗的情况下,IgM抗体在SARS-CoV-2感染后仍能很好地反应机体抵抗病毒的整个病程。     

不同剂量维胺酯胶囊联合克林霉素凝胶治疗寻常痤疮临床疗效观察

为了解不同剂量维胺酯胶囊联合克林霉素凝胶治疗寻常痤疮的疗效、不良反应以及疗后病情变化等情况,2003年11月—2004年8月,由中国医学科学院、中国协和医科大学皮肤病研究所,西安交通大学第二医院皮肤科。第三军医大学西南医院皮肤科,浙江大学医学院附属第二医院皮肤科及广州市皮肤病防治所联合进行了一项随机、开放、多中心临床试验,现将观察结果总结报告如下。     

肌酸激酶同工酶对围产期窒息程度和短期预后的预测价值

目的评估血清肌酸激酶同工酶（CK-MB）的变化与围产期窒息程度及短期预后的相关性。方法采用前瞻性序贯试验研究方案,随机选择245例足月新生儿为研究对象,比较142例窒息新生儿和103例正常新生儿血清CK-MB水平差异,评估CK-MB与围产期窒息严重度指标1min Apgar评分、脐动脉血pH及其短期预后的相关性。结果窒息组CK-MB水平显著高于正常对照组,差异比较有统计学意义（P〈0.001）。CK-MB与围产期窒息严重度指标1min Ap-gar评分和脐动脉血pH呈负相关（P〈0.001）,与围产期窒息短期不利预后呈正相关（P〈0.001）。结论血清CK-MB有助于早期预测围产期窒息程度和短期预后。