干扰素γ和TRAIL联合对HaCaT细胞程序性坏死的影响及机制研究

【摘要】 目的 观察干扰素γ（IFN-γ）和肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）联合对HaCaT人角质形成细胞程序性坏死的诱导作用,并探讨其作用机制。方法 HaCaT细胞分为阴性对照组（不加药物处理）和实验组,实验组分别加入50 μg/L IFN-γ（IFN-γ组）、4 μg/L TRAIL（TRAIL组）、50 μg/L IFN-γ + 4 μg/L TRAIL（细胞因子联合组）,或40 μmo/L zVAD预处理1 h后同时加入50 μg/L IFN-γ及4 μg/L TRAIL（zVAD联合组）。作用48 h后,光镜下观察细胞形态,噻唑蓝法检测药物对细胞的增殖抑制作用,双染色法流式细胞仪检测细胞坏死情况,qPCR检测RIP3、MLKL mRNA相对表达量,Western印迹检测细胞RIP1、RIP3、MLKL及其磷酸化蛋白等的表达,免疫荧光染色观察pRIP3、pMLKL在细胞中的表达分布,以2′,7′-二氯荧光素二乙酸酯为荧光探针检测各处理对细胞内活性氧产生的影响。采用SPSS 22进行统计学分析,不同组间观察指标的变化采用单因素方差分析,两两多重比较采用LSD-t检验。结果 细胞因子联合组及zVAD联合组作用48 h后HaCaT细胞出现坏死样形态特征。噻唑蓝实验显示作用48 h后,IFN-γ组、TRAIL组、细胞因子联合组、zVAD联合组、阴性对照组细胞存活率分别为73.16% ± 5.71%、81.46% ± 4.68%、72.18% ± 2.93%、69.67% ± 3.24%、100%,5组间差异 有统计学意义（F = 24.34,P < 0.001）。细胞因子联合组、zVAD联合组细胞坏死率分别为9.86% ± 1.31%、10.33% ± 2.16%,均高于阴性对照组（5.26% ± 0.91%,t值分别为4.61、5.07,均P < 0.05）。qPCR结果示,细胞因子联合组、zVAD联合组RIP3、MLKL mRNA表达水平明显高于阴性对照组（tRIP3分别为0.99、1.84,tMLKL分别为1.51、2.17,均P < 0.05）。Western印迹结果示,与阴性对照组相比,细胞因子联合组RIP1、RIP3、MLKL及其磷酸化蛋白表达水平升高（均P < 0.05）,且zVAD预处理后caspase 8水平下降,上述蛋白表达进一步升高。荧光显微镜示IFN-γ和TRAIL联合作用后,细胞质中可见强绿色点状或团块状荧光斑点（pRIP3）,在细胞膜可见明显红色荧光斑点（pMLKL）。活性氧检测示细胞因子联合组平均荧光强度高于阴性对照组,t = 702.00,P < 0.05。结论 IFN-γ和TRAIL可联合诱导HaCaT细胞程序性坏死,并伴有活性氧水平上升。     

一起甲胺磷引起食物中毒的调查

20 0 0年 12月 7日 12～ 2 0时 ,舟山市普陀区沈家门镇鲁家峙馒头山×××虾皮加工场发生一起食物中毒 ,发病 2 5例 ,罹患率 96 %。经流行病学调查和实验室检测 ,证实为摄入受甲胺磷农药污染的花菜所致 ,现报告如下。流行病学调查1　一般情况　虾皮加工场工作人员共 2 6人 ,7日 11时中餐均在加工场就餐 ,食后 1小时该场职工×××出现头昏、呕吐 ,同日 2 0时止先后 2 5名职工出现同样症状。2　流行病学调查2 1　中毒食物的来源与加工　该场食堂工人陈某于 12月 7日上午偷采外场花菜地花菜 2颗 ,经水粗略清洗后炒煮 ,供就餐民工 2 6人食用。…     

舟山市学校食堂食品卫生量化分级管理影响因素分析

为揭示舟山市学校中可能存在的引起群体性食物中毒的潜在危害因素，在学校食堂推行食品卫生量化分级管理过程中．针对存在的主要影响因素，笔者对舟山市定海区、普陀区城乡中心小学以上的69家食堂进行了调查。     

过敏专科门诊3 051例湿疹皮炎患者血清特异性IgE检测结果分析

目的分析湿疹皮炎患者血清特异性IgE检测结果。方法回顾2021年4月1日至2022年3月31日于华山医院过敏专科门诊就诊的3 051例湿疹皮炎患者, 利用Phadia过敏原检测系统检测患者的血清特异性IgE水平, 计算各项过敏原的检测阳性率, 分析湿疹皮炎患者的常见吸入性过敏原和食物过敏原。计数资料组间比较采用χ2检验。结果 3 051例湿疹皮炎患者中, 特应性皮炎1 412例, 其他湿疹/皮炎1 639例。1 629例(53%)过敏原阳性, 阳性过敏原数为(3.0 ± 1.6)个。最常见的3种吸入性过敏原分别是粉尘螨(904/1 522例, 59%)、户尘螨(891/1 513例, 59%)和链格孢霉(206/1 068例, 19%);最常见的3种食物过敏原分别是虾(251/1 432例, 18%)、鸡蛋白(165/992例, 17%)和牛奶(149/994例, 15%)。3 051例中, 25例(1%)年龄< 2岁, 571例(19%)2 ～ 12岁, 285例(9%)12 ～ 18岁, 2 170例(71%) > 18岁。在< 2岁、2 ～ 12岁患者组中, 最...     

系统性红斑狼疮患者皮肤血管炎的临床研究

目的 比较有无皮肤血管炎表现的系统性红斑狼疮(SLE)患者的临床和实验室特点,探讨SLE患者皮肤血管炎与实验室指标以及内脏损伤的关系.方法 分析2011年7月至2014年10月复旦大学附属华山医院皮肤科收治的152例有皮肤症状的SLE患者临床和实验室资料,并将其分为四肢末端血管炎组和网状青斑组.应用logistic回归模型分析皮肤血管炎与临床和实验室各变量的关系.结果 152例SLE患者中,62例(41％)有皮肤血管炎表现(包括55例四肢末端血管炎和7例网状青斑),90例(59％)无皮肤血管炎.四肢末端血管炎组患者年龄(30.54±12.67)岁、24 h尿蛋白定量和血清尿素异常升高分别为39.39％和2.08％.均明显低于无血管炎组年龄(37.77±12.17)岁,64.00％和16.43％,而女性比例(98.18％)、头颅MRI异常(37.50％)、贫血(87.03％)、抗核糖体P蛋白抗体阳性的比例(77.77％)及SLEDAI指数(14.71±7.75)均明显高于无血管炎组(84.44％、12.19％、70.93％、53.65％、10.68±5.61),差异有统计学意义(均P＜0.05),而C3降低的比例与无血管炎组相比差异无统计学意义(P=0.362).网状青斑组患者C3降低的比例(28.57％)显著低于无血管炎组(79.76％,P=0.008),其他指标与无血管炎组相比,差异无统计学意义(均P＞0.05).体质指数(BMI)、肺功能异常及其他实验室指标在四肢末端血管炎组、网状青斑组及无血管炎组间差异无统计学意义(均尸＞ 0.05).logistic回归分析显示,在排除了年龄和性别的影响后,皮肤血管炎与头颅MRI异常(OR=4.24,95％CI:1.17 ～ 16.13,P=0.028)及抗核糖体P蛋白抗体阳性(OR=3.97,95％ CI:1.86 ～ 8.47,P=0.0004)呈显著正影响的关系;与24 h尿蛋白异常呈显著负影响的关系(OR=0.25,95％ CI:0.09～ 0.69,P=0.009);与血清尿素异常(OR=0.12,95％ CI:0.01 ～ 1.06)、C3降低(OR=0.93,95％ CI:0.38 ～ 2.28)、贫血(OR=1.38,95％ CI:0.56～3.40)及SLEDAI(OR=1.05,95％ CI:0.98～1.14)则无显著影响关系(均P＞0.05).结论 皮肤血管炎与SLE中枢神经系统损伤及抗核糖体P蛋白抗体的产生密切相关,对具有此类皮肤损伤的SLE患者,应密切监测中枢神经系统损伤情况.无皮肤血管炎的SLE患者发生肾脏损伤的概率较大,也需加强监测.     

舟山市普陀区放射诊疗受检者防护现状调查

通过对放射诊疗单位为受检者(患者)设置的防护现状调查,针对受检者防护管理不到位问题,提出今后落实受检者防护的相应卫生管理措施和对策。     

一起急性硫化氢中毒死亡的调查

2003年8月10日普陀区某工业园区在建污水处理工程在凿通污水管与窨井内封口过程中,发生死亡三人的突发性事故.8月11日省卫生厅、市区卫生局对事故现场进行调查,为吸取教训报告如下.     

医籍关涉文史

医籍关涉文史陈圣安张暖王午戌（０５００９１）中医药典籍蕴涵着丰富的医学知识，同时涉及了古代文明的各个领域，关联到多种学科。因此，缺乏古代文史知识，常会在阅读当中向壁臆解，指鹿为马，把文章弄得支离破碎，不可理解。中医理论认为，人体的阴阳虚实，生老病死，...     

舟山市普陀区放射工作人员个人剂量水平

笔者对普陀区1998～2002年放射工作人员个人剂量监测结果进行统计分析，以了解个人剂量水平，为进一步规范海岛地区防护监督管理提供依据。     

舟山市城区学校食堂卫生现状调查研究

目的为了解舟山市城区大、中、小学校食堂卫生现状，揭示学校中可能存在的引起群体性食物中毒的潜在危险因素。方法对舟山市定海、普陀两城区36所大、中、小学校的45家食堂卫生进行了现场卫生学调查、餐具检测、工作人员手指检测、从业人员健康证持证率调查及卫生知识问答等。结果共监测各类餐具样品796件，总合格率为44．60％；其中大中专学校食堂共采样品250件，合格率为53．60％；中学食堂共采样品330件，合格率为37．88％；小学食堂共采样品216件，合格率为44．44％。不同类型学校食堂之间，经统计学处理，差异有统计学意义（X^2=14．23，P〈0．005）。17家对外承包食堂共采各类餐具样品304件，合格率为35．86％；学校直接管理的28家食堂共采各类餐具样品492件，合格率为50．00％；经统计学处理，不同经营模式学校食堂之间差异有统计学意义（X^2=15．21，P〈0．005）。从业人员手指样品233件，做3项指标检测，沙门菌未检出，金黄色葡萄球菌检出率为6．44％，菌落总数检出率达98．71％。结论餐具检测合格率偏低，不同经营模式、不同类型学校之问存在着差异；学校食堂餐具消毒工作不到位；从业人员手指卫生状况堪忧，部分从业人员卫生意识淡薄。