结核杆菌抗原Ag85B诱导抗黑素瘤免疫应答及其机制研究

目的：探讨Ag85B在诱发抗黑素瘤免疫应答中的作用,以及其用于肿瘤免疫治疗的可行性。方法：经背部皮下接种黑色素瘤细胞株B16建立C57BL/6小鼠荷瘤模型,并分为对照1、2组和实验组。于荷瘤模型建立后,对照1、2组经背部皮下分别接种B16细胞和B16/pcDNA3细胞,实验组背部皮下接种B16/pcDNA3-Ag85B细胞。分别观测3组小鼠肿瘤的体积、生存时间和血清中的IFN-γ及IL-4的含量。研究Ag85B在诱导抗肿瘤免疫应答中的作用。结果：从13d到23d,对照1组和对照2组荷瘤小鼠,肿瘤的平均体积分别从1.1058cm^3和0.9123cm^3增长到7.5983cm^3和5.8746cm^3;而实验组荷瘤小鼠,肿瘤的平均体积由0.5158cm^3增长到1.5080cm^3。对照1组和对照2组荷瘤小鼠的平均生存时间分别为24.1d和24.7d,而实验组荷瘤小鼠的平均生存时间为27.8d。13d内,两对照组和实验组小鼠血清IFN-γ的含量均有所上升（对照1组、对照2组和实验组分别上升至26.3ng/L、23.0ng/L和25.2ng/L）,随后两对照组小鼠血清IFN-γ的含量均呈下降趋势（对照1组和对照2组分别下降至19.3ng/L和18.3ng/L）,而实验组小鼠血清IFN-γ的含量则呈上升趋势（上升至46.5ng/L）。13d内,两对照组和实验组小鼠血清IL-4的含量均有轻微升高,随后逐渐下降,但3组小鼠血清IL-4含量的变化差异不明显。结论：接种B16/pcDNA3-Ag85B细胞的实验组小鼠血清中IFN-γ的含量明显增高,并可抑制荷瘤小鼠体内肿瘤的生长,延长荷瘤小鼠生存的时间。     

Ag85B诱发抗肿瘤免疫效应

目的：探讨Ag85B在荷瘤小鼠体内诱发抗肿瘤免疫效应。方法：C57BL／6小鼠静脉接种B16细胞，8d后于对照组和实验组分别输入经照射的B16／pcDNA3细胞和B16／pcDNA3-Ag85B细胞，观测肿瘤结节和体积。结果：对照组小鼠在第18d肺部开始出现2个肿瘤结节，在第23d肺部出现6个直径3mm的肿瘤结节；而实验组小鼠在第23d肺部出现2个直径3mm的肿瘤结节。结论：Ag85B对小鼠肺部转移肿瘤治疗有一定的疗效。     

重组人白细胞介素-18的高浓度复性、纯化和活性检测

目的摸索大规模生产重组人白细胞介素 18(rhIL 18)高效简便、成本低廉的生产工艺。优化rhIL 18高浓度下最优复性、纯化方案 ,建立快速准确的活性检测方法。方法采用液相色谱和光谱学方法检测复性效率 ,筛选确定rhIL 18最优复性条件 ,再用SepheroseFFANX阴离子交换柱结合分子筛HiPrepSephacrylS 10 0进行纯化。采用3 H 掺入法检测rhIL 18产品对人外周血单个核细胞的促增殖作用 ,用流式细胞术检测其促γ 干扰素生成能力。结果建立了一套rhIL 18复性、纯化、活性检测方案。结论液相色谱和光谱学方法相结合 ,可用于检测rhIL 18的复性效率 ,流式细胞术也可用于检测rhIL 18的生物活性。