肺炎合并心衰患儿血浆内源性洋地黄素水平的变化及其临床意义

本采用放射免疫法测定１５例肺炎和２２例肺炎合并心衰患儿血浆内源性洋地黄素水平，心衰组患儿血浆内源性洋地黄素水平明显低于肺炎组，心衰纠正后再恢复至０．３５±０．０８ｎｇ／ｍｌ，提示内源性洋地黄素分泌不足可能是肺炎合并心衰的发病机理之一。肺炎患儿测定血浆内源性洋地黄素水平，对早期预防和判断心衰发生、安全有效地应用洋地黄制剂均有指导意义。     

肌钙蛋白T对急性心肌梗塞诊断及溶栓疗效判断的价值

心肌钙蛋白T（TnT）是一种反映心肌损伤的血清标志物。我们选择了1997年10月～1998年IO月在我院住院的急性心肌梗塞（AMI）患者,通过测定血清TnT的动态变化,以探讨TnT对AMI的早期诊断及溶栓疗效判断的价值。对象与方法对象：对照组ZO例,男15例,女5例,年龄26～53岁,平均41．2岁,均无心血管病史的健康体检者。AMI组3O例,均符合WHO诊断标准,男24例,女6例,平均年龄SO．8士84岁。其中对符合溶栓条件持续胸痛＞半小时,含硝酸甘油不能缓解,相邻两个导联ST段抬高＞O．lmv,发病＜6／J‘时,年龄＜7O岁的24例立即予以尿激…     

血清FABP、cTnT联合检测在急性心肌梗塞诊断中的应用

目的探讨血清脂肪酸结合蛋白(FABP)、心肌肌钙蛋白T(cTnT)联合检测在急性心肌梗塞(AMI)诊断中的作用。方法26例AMI患者、40例骨骼肌损伤及40例健康者采用酶免疫一步法检测血清FABP、cTnT,竞争抑制法检测CK-MB。结果AMI患者早期(1h～25h)FABP增高,随后(3h～2w)cTnT增高。同时测定FABP和cTnT最少一项增高,其阳性率为100%(26/26),诊断窗口时间明显高于其它各种组合检测。结论血清FABP、cTnT联合检测在AMI诊断中具有重要意义。     

不同引物标记物在显色法芯片检测结核分支杆菌利福平和异烟肼耐药基因中应用比较

目的比较不同标记物在显色法芯片检测结核分支杆菌利福平和异烟肼耐药基因中的影响。方法分别采用地高辛、荧光素和生物素标记引物,建立地高辛-抗地高辛、荧光素-抗荧光素和生物素-亲和素酶呈色法芯片检测结核分支杆菌利福平(RFP)和异烟肼(INH)耐药基因方法,同时用3种方法检测46株结核分支杆菌临床分离株、19种非结核分支杆菌标准株、9种非分支杆菌标准株和结核分支杆菌H37Rv标准株,并对3种方法的敏感性和重复性进行比较。结果经3种方法平行检测,46例结核分支杆菌临床分离株结果完全一致;19种非结核分支杆菌标准株、9种非分支杆菌标准株结果均为阴性,结核分支杆菌H37Rv标准株结果均为野生型;地高辛系统和荧光素系统敏感度为2.0×103拷贝/ml,生物素-亲和素系统敏感度为2.0×104拷贝/ml;3种方法均有良好的重复性。结论3种方法均具有良好的重复性和特异性,生物素系统敏感度略低于地高辛系统和荧光素系统。     

温度和时间对Ⅴ、Ⅷ凝血因子活性的影响

目的探讨温度、时间对Ⅴ、Ⅷ凝血因子活性的影响。方法对同份血浆留多个样本,每种标本留2份(其中1份离心处理),分别置于4℃24 h、72 h,室温24 h,测其Ⅴ、Ⅷ凝血因子活性。结果①Ⅴ、Ⅷ凝血因子标本在4℃、室温放置24h、4℃放置72 h,标本间离心前与离心后,其活性Ⅷ因子平均下降1.1%(IU/m l),Ⅴ因子平均下降1.9%。②Ⅷ因子4℃24 h后与新鲜相比活性下降7.8%,72 h后下降11.2%,Ⅴ因子24 h后下降了3.3%,72 h后下降18.2%。③置4℃24 h与72 h,Ⅷ因子平均下降3.4%,Ⅴ因子下降14.8%。④4℃与室温24 h比较,Ⅷ因子活性平均下降了0.73%,Ⅴ因子活性平均下降了1%。⑤血型之间差异,4℃24 h后Ⅷ和Ⅴ因子活性分别为:A型下降了8%和2%,B型下降了8%和5%,O型下降了7%和3%,AB型下降了8%和3%;4℃72 h后Ⅷ和Ⅴ因子活性分别为:A型下降10.5%和19.5%,B型下降11%和20.1%,O型下降11.3%和20.3%,AB型下降12%和11.8%。结论①血浆在4℃放置24 h与在室温放置24 h相比较,对Ⅴ、Ⅷ凝血因子活性影响差异很小。②4℃和室温下,同份标本在放置同样的时间离心前后Ⅴ、Ⅷ凝血因子活性下降很小。③Ⅷ因子活性在标本置24 h检测时下降相对较大,Ⅴ因子活性在72 h检测时下降相对较大。④Ⅷ因子活性在4℃24 h和72 h后下降程度,ABO血型间相差很小;Ⅴ因子活性在4℃24 h后下降程度,ABO血型间相差相对较大,72 h后A、B、O下降在20%左右,而AB型下降相对较少,为12%左右。     

生物素-亲和素系统用于DNA芯片显色分析乙型肝炎病毒基因多态性

目的 利用生物素-亲和素系统使DNA芯片显色,用于乙型肝炎病毒基因(HBV DNA)多态性分析。方法 将标记生物素的dUTP在双重聚合酶链反应(PCR)时掺入DNA样品目的断片,并将目的断片杂交于含HBV核苷酸序列(1896、1814、1762、1764、P区552)的野生型及突变型探针的DNA芯片上,用亲和素-碱性磷酸酶进行显色,并转印于尼龙膜上,再用光学扫描仪读取结果。结果 42例乙型肝炎患者HBV核苷酸序列1896、1814、1762、1764、P区552位点突变率分别为40％、31％、50％、50％、10％;该法检测敏感度为5.6×10~2病毒考贝数/ml;特异性高;强、弱阳性批内变异系数(CV)分别为15.1％和19.8％。结论 生物素-亲和素系统用于HBV DNA多态性芯片显色,方法简便,不需特殊设备,易于推广应用。     

328例血清TT病毒DNA及其IgG抗体的检测

目的 了解不同人群中TT病毒（TTV）感染情况。方法 根据Okamoto报道的TTV全序列设计引物,建立TTV DNA套式聚合酶链反应,利用该法对81例正常人、92例献血员、123例甲－庚型肝炎,32例非甲－庚型肝炎病人进行TTV DNA检测,同时用ELISA法检测抗TTV IgG。结果 TTV在以上四种人群中阳性率分别为2．5％、2．2％、19．5％、28．1％,抗TTV IgG的阳性率分别为1．2％、3．7％、26．8％、34．4％。前者与后者两者比较差异存在显著性（P＜0．05）;重叠感染中TTV合并HBV的二重感染率最高为75．0％。结论 不同人群匀存在TTV感染;正常人群和职业献血员存在健康携带状态;甲－庚型肝炎和非甲－肝炎病人为高危人群;TTV可与各型肝炎存在重叠感染;TTV除经血传播外,存在其他传播途径,抗TTV IgG可作为TT病毒感染的检测手段。     

脂肪酸结合蛋白在急性心肌梗死诊断中的应用

目的本研究旨在评价血清脂肪酸结合蛋白(FABP)定量检测对急性心肌梗死(AMI)患者早期诊断价值.方法采用酶联免疫吸附试验一步夹心法对20名健康体检者、26例AMI患者进行血清FABP检测,同时测定心肌肌钙蛋白T(cTnT)、肌酸激酶同工酶MB(CK-MB),并对其中9例AMI胸痛发作后6h内入院患者血清进行动态分析.结果20名健康体检者FABP、cTnT、CK-MB血清浓度分别为(1.8±0.9)μg/L、(0.16±0.10)μg/L、(15.2±3.8)U/L,26例AMI患者血清浓度分别为(38.6±21.8)μg/L、(2.5±2.4)μg/L和(90.5±83.5)U/L,阳性率为100%、84.5%和80.8%.9例动态观察的患者中,有4例1h内入院时血清中FABP浓度开始升高[(14.1±4.1)μg/L],9例患者血清升高达峰值时间为(7.0±3.2)h,比cTnT、CK-MB早(P<0.001),24～48h恢复正常.结论FABP可作为急性心肌梗死早期诊断或排除的血清标志物.     

样品不同处理方法对PCR-微孔板杂交法检测TTV DNA的影响

自1997年底日本学者Nishizawa等[1]报道从输血后肝炎病人血清中分离出TTV以来 ,不少学者做了大量有关TTV的检测工作.目前国内外用PCR方法检测TTV的报告较多,但不同实验室检测的结果存在较大差异,可能与其检测方法特别是样品处理方法不同有关.我们比较了8种常规的DNA抽提方法,并建立了适合于PCR-微孔板杂交法检测TTV DNA的标本处理方法.     

显色法芯片检测结核分枝杆菌利福平和异烟肼耐药基因

目的建立显色法芯片检测结核分枝杆菌耐药基因的方法。方法设计4对地高辛标记引物,扩增结核分枝杆菌rpoB、katG、inhA和ahpC 4个基因部分片段,根据结核分枝杆菌利福平(RFP)和异烟肼(INH)4条耐药相关基因上8个位点的25种单核苷酸多态性设计探针制作芯片,扩增产物与芯片杂交,显色法判断结果;用该法检测46株结核分枝杆菌临床分离株。结果扩增产物琼脂糖电泳可见4条大小分别为165、181、245、315 bp DNA条带;结核分枝杆菌菌液浓度为1．6×103／ml时,该法仍可检测到各位点野生及突变信号;19种非结核分枝杆菌标准株和9种非分枝杆菌标准株扩增产物无DNA条带,与芯片杂交亦无信号,H37Rv结核分枝杆菌标准株芯片检测各位点均为野生型;5株结核分枝杆菌临床分离株重复检测5次,结果完全一致;6份PCR产物的测序结果与芯片检测结果完全一致;46株结核分枝杆菌临床分离株中,RFP耐药株28株,芯片检出突变株24株,突变率为85．7％,RFP敏感株18株,芯片检出突变株2株。INH耐药株31株,芯片检出突变株20株,突变率为64．5％,INH敏感株15株,芯片检出突变株4株。结论显色法芯片检测结核分枝杆菌耐药基因具有较高的敏感性和特异性,无需特殊仪器设备,有一定的推广应用价值。