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重组人载脂蛋白A5原核表达载体的构建及分析鉴定 总被引:1,自引:0,他引:1
目的构建重组人载脂蛋白A5(apoA5)原核表达载体,为进一步制备抗apoA5的单/多克隆抗体奠定基础。方法从人肝癌组织中抽提总RNA,以此为模板,逆转录降度PCR扩增载脂蛋白A5编码区基因全长,构建含有目的片段的克隆载体pPCR-ScriptampSK(+)-apoA5及原核表达载体pET16B-apoA5,通过酶切、测序及诱导表达等验证重组质粒的准确性。结果PCR扩增出1.1kb特异性片段,克隆至pPCR-ScriptampSK(+)后测序,结果表明序列同源性与genebank报道一致,重组质粒pET16B-apoA5经双酶切后电泳显示约为5.7kb和1.1kb的片段,酶切图谱与预期一致,诱导表达蛋白的大小与预期一致。结论成功构建了重组人载脂蛋白A5的原核表达载体。 相似文献
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目的 了解不同厂家HCV-RNA定量检测试剂盒测定结果的可比性.方法 采用RT-PCR技术对4种HCV-RNA试剂精密度(批内、批间)、线性、阳性检出率、试剂间可比性进行评价.结果 本方法评价表明各厂家试剂盒批内变异系数(CV)均小于10%、批间变异系数(CV)均小于12%、线性r>0.97、阳性检出率均大于81%、试... 相似文献
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目的:探讨美托洛尔对脓毒症大鼠心肌细胞凋亡的抑制作用及机制。方法:72只大鼠随机分为对照组(n=24)、脓毒症组(n=24)及治疗组[n=24,脓毒症模型基础上美托洛尔0.05mg冲击量后0.2mg/(kg·h)静脉泵入]。于术后3、6、12、24h测定血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α),心肌髓过氧化物酶(MPO)和半胱氨酸天冬氨酸酶-3(caspase-3)活性,TUNEL法检测心肌细胞凋亡,光镜下观察心肌组织病理改变。结果:脓毒症组和治疗组大鼠各时点血浆TNF-α,心肌MPO、caspase-3活性、心肌细胞凋亡指数均较对照组显著升高(P<0.05),以术后12h最显著。应用美托洛尔后,上述指标与脓毒症组各时点相比均有不同程度降低,其中血浆TNF-α和心肌MPO活性在12、24h有统计学差异(P<0.05),心肌caspase-3活性和心肌细胞凋亡指数在6、12和24h有统计学差异(P<0.05),且心肌损害病理改变较脓毒症组显著减轻。结论:美托洛尔具有对抗脓毒症大鼠心肌细胞凋亡的作用,可能与抑制细胞因子、减轻心肌炎症反应、降低caspase-3活性有关。 相似文献
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摘要:目的:观察冠状动脉粥样硬化性心脏病(CHD)患者血清心肌肌钙蛋白I(cardiac troponin I,cTnI)自身抗体的阳性率和临床意义。 方法:病例对照研究。收集2015年9月至2016年5月南京大学医学院附属鼓楼医院心内科CHD患者200例和健康体检者200例,用间接ELISA法检测抗cTnI自身抗体(anti-cardiac troponin I antibodies,anti-cTnI),并分析其一般资料、相关临床生化指标和冠脉血管病变情况。 结果:CHD患者anti-cTnI阳性率10.5%(21/200),健康体检者阳性率为2.0%(4/200),CHD患者高于健康体检者(P<0.01);根据抗体检测结果将研究对象分为冠心病患者抗体阳性组,冠心病患者抗体阴性组和健康对照者抗体阳性组。冠心病患者抗体阳性组中位年龄、Glu水平高于健康对照者抗体阳性组(P均<0.05),HDL-C、apoAⅠ水平低于健康对照者抗体阳性组(P均<0.01);CHD患者抗体阳性组中位年龄与Gensini评分高于抗体阴性组,而HDL-C水平低于抗体阴性者(P均<0.05)。 结论:Anti-cTnI更可能出现在年龄较高且冠脉狭窄病变较严重的冠心病患者中,血清低HDL-C和apoAⅠ水平可能与anti-cTnI产生有关。 相似文献
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家族性再生障碍性贫血(简称再障)临床罕见。1986年以来,我院发现一个家族中同胞姐弟患再障,现报告如下。例1,女,14岁。因乏力、心悸9个月,月经量多1个月于1986年8月14日入院。否认放射线及特殊药物接触史,父、母、兄健在,有弟一人。体温37.4℃,极重度贫血貌,前胸及双下肢散在出血点,心尖部闻及Ⅲ级吹风样收缩期杂音,肝脾不大。血红蛋白16g/L,网织红细胞0.1%,白细胞2.1×10~9/L,中性38%,淋巴60%,血小板23×10~9/L。骨髓增生减低,粒系23%,红系6%,淋 相似文献