局部针刺对莫诺苯宗诱导C57BL/6小鼠白癜风样模型的影响

【摘要】 目的 探讨外伤对莫诺苯宗诱导白癜风小鼠脱色的影响。 方法 将40只C57BL/6小鼠随机分为对照组、模型组、针刺组和针刺配合莫诺苯宗组4个组,每组10只。模型组应用40%莫诺苯宗乳膏诱导C57BL/6小鼠脱色,建立白癜风动物模型;针刺配合莫诺苯宗组通过针刺配合40%莫诺苯宗乳膏的方法,研究针刺对小鼠脱色的影响。实验过程中肉眼观察毛发颜色以及共聚焦激光扫描显微镜（RCM）观察皮肤脱色。实验结束后麻醉小鼠,取非用药部位脱色皮肤行组织学检查,HE染色检测淋巴细胞浸润情况,免疫荧光染色检测CD8+ T细胞表达。 结果 模型组小鼠在用药部位及非用药部位均有不同程度脱色。针刺配合莫诺苯宗组小鼠同样具有以上特点,且其脱色出现时间早,面积大并稳定。实验第65天,模型组和针刺配合莫诺苯宗组用药部位的脱色面积指数分别为3.45 ± 0.17和3.90 ± 0.25,两组比较差异有统计学意义,t = 7.433,P < 0.05;非用药部位分别为1.90 ± 0.12和2.85 ± 0.27,两组比较差异有统计学意义,t = 7.529,P < 0.05。免疫荧光显示非用药部位脱色区CD8+ T细胞荧光强度模型组为175.528 ± 10.711,针刺配合莫诺苯宗组为645.928 ± 12.652,两者比较差异有统计学意义,t = 8.105,P < 0.05。针刺配合莫诺苯宗组在非用药部位脱色斑局部淋巴细胞和CD8+ T细胞浸润更明显。 结论 局部皮肤屏障破坏可以促进莫诺苯宗诱导的白癜风小鼠脱色。     

犬小孢子菌膜蛋白PQ-LRP基因全长cDNA的克隆

目的 克隆犬小孢子菌膜蛋白PQ-LRP(PQ-loop repeat protein)基因全长cDNA,探讨在头癣发病机制中的作用.方法 选用犬小孢子菌头癣株(A518)为实验株,采用cDNA快速末端扩增法(RACE),克隆PQ-LRP基因的全长序列.结合生物信息学方法对获得的序列进行初步功能分析.结果 获得犬小孢子菌PQ-LRP全长序列为1522 bp,拥有一个1080 bp的开放阅读框,编码359个氨基酸,5 '非编码区为49 bp,3 '非编码区为393 bp;同源性比对与断发毛癣菌的PQ-LRP同源性达到81％,与红色毛癣菌PQ-LRP同源性达到79％.结论 克隆出犬小孢子菌膜蛋白PQ-LRP cDNA全长序列,为研究膜蛋白PQ-LRP基因在犬小孢子菌病中的功能奠定基础.     

重症多形红斑及中毒性表皮坏死松解症73例临床分析

目的 分析重症多形红斑(SJS)和中毒性表皮坏死松解症(TEN)的致病因素、临床特征及治疗与转归，为其临床防治提供依据。 方法 回顾性分析杭州市第三人民医院收治的73例SJS和TEN患者的临床资料，其中34例采用注射用甲泼尼龙琥珀酸钠联合静脉用人丙种球蛋白针(A组)，39例采用注射用甲泼尼龙琥珀酸钠联合血液透析进行治疗(B组)；对其一般资料、致病因素、临床特征、实验室检查结果及治疗与转归进行总结。 结果 58例患者有明确病因，其中57例为药物所致，占98.3%；致敏药物以别嘌呤醇和卡马西平为主，分别占34.5%、24.1%。SJS和TEN患者的常见临床特征为体温升高、电解质紊乱、白细胞、肝酶、尿素氮升高，发生率均在30%以上，也有部分伴有血糖升高者，发生率为20.5%；总病原菌检出率91.8%，其中皮肤病原菌检出率最高，占83.6%，菌种主要是金黄色葡萄球菌，占61.6%。A、B两组退热时间、住院时间、死亡率差异无统计学意义(P>0.05)，A组费用较低，差异有统计学意义(P<0.05)。 结论 本地区近2年引起SJS和TEN的常见药物为别嘌呤醇和卡马西平，在对症治疗的基础上，糖皮质激素联合静脉用人丙种球蛋白针或糖皮质激素联合血液透析均能取得较好疗效。      

白癜风动物模型的研究进展

白癜风是一种皮肤黏膜色素脱失性疾病,其病因及发病机制尚未明确.多种常规应用模式的白癜风动物模型存在局限性.随着现代科学技术的发展,许多新型白癜风动物模型的建立,如酪氨酸酶相关、CD8+T细胞相关和热休克蛋白70相关的白癜风动物模型等,这些模型与人白癜风相类似度、重复性和专一性等方面都有一定程度的提高,成为研究白癜风发病机制,治疗靶点和治疗药物等方面研究的主要基础.     

儿童头皮与包皮组织诱导前后犬小孢子菌FSH1的表达

目的 探讨丝氨酸水解酶（FSH1）在犬小孢子菌致病中的意义。方法 半定量RT-PCR检测30株犬小孢子菌头癣株和30株犬小孢子菌体癣株经沙氏液体培养基传代及儿童头皮、包皮诱导前后FSH1的表达。结果 头癣株犬小孢子菌FSH1mRNA表达水平明显高于体癣株（P < 0.01）,经沙氏液体培养基传至第5代的菌株FSH1mRNA表达水平较第一代差异无统计学意义（P > 0.05）。经儿童头皮或包皮诱导后,FSH1mRNA表达水平较诱导前明显升高（F = 2025.713、1833.139,P 值均 < 0.01）,且不同皮肤组织（儿童头皮、儿童包皮）诱导后的菌株其表达水平差异有统计学意义（P < 0.01）。结论 不同感染部位的犬小孢子菌FSH1mRNA表达水平不同;局部组织对该菌的FSH1mRNA表达存在诱导作用,且儿童头皮的诱导作用明显。     

儿童头皮及光滑皮肤组织对体外培养犬小孢子菌PQ-LRP表达水平的影响

目的探讨儿童头皮与光滑皮肤组织对体外培养犬小孢子菌膜绑定蛋白编码基因(PQ-LRP)表达水平的影响。方法以18SrRNA基因为内参,应用RT-PCR方法检测SDA培养基中自患儿皮损处分离的头癣株、体癣株第1代及第5代PQ-LRP的mRNA水平;检测体外经儿童头皮及光滑皮肤组织诱导培养后头癣株及体癣株PQ-LRP的mRNA水平。结果 IODPQ-LRP/IOD18S rRNA(SDA第1代头癣株)为1.0352±0.11279,IODPQ-LRP/IOD18S rRNA(SDA第5代头癣株)为1.1157±0.11530,二者差异无统计学意义(P>0.05);IODPQ-LRP/IOD18S rRNA(头皮组织诱导后头癣株)为2.1375±0.11093,与未经诱导者相比差异有统计学意义(P<0.01);IODPQ-LRP/IOD18S rRNA(SDA第1代体癣株)为0.5921±0.12025,IODPQ-LRP/IOD18S rRNA(SDA第5代体癣株)为0.6712±0.12177,二者差异无统计学意义(P>0.05);IODPQ-LRP/IOD18S rRNA(光滑皮肤诱导后体癣株)为1.4734±0.13125,与未经诱导者相比差异有统计学意义(P<0.01)。结论 PQ-LRP在犬小孢子菌中有活性表达,且在头癣株中表达活性明显高于体癣株。SDA培养基中犬小孢子菌PQ-LRP呈稳定表达状态,而儿童头皮组织与光滑皮肤组织对PQ-LRP表达水平存在诱导作用,以头皮组织尤为显著。     

咖啡酸衍生物WSY6对黑素细胞氧化应激损伤的保护作用及机制研究

目的 探讨咖啡酸衍生物WSY6对过氧化氢（H2O2）诱导的黑素细胞氧化损伤的保护作用和潜在分子机制。方法 体外培养原代人表皮黑素细胞,分为对照组（不做任何处理）、H2O2组（1 mmol/L H2O2处理）和6.25、12.5、25 μmol/LWSY6组（分别用6.25、12.5、25 μmol/L WSY6预处理1 h后再用1 mmol/L H2O2处理1 h）。继续培养24 h后,用MTS法测定黑素细胞存活率,乳酸脱氢酶（LDH）试剂盒检测LDH释放量。部分黑素细胞分为抑制剂组（用p38抑制剂预处理1 h,再用1 mmol/L H2O2处理1 h）和H2O2组（直接用1 mmol/L H2O2处理1 h）,处理完成后继续培养24 h,用试剂盒检测LDH的释放量。部分黑素细胞用25 μmol/L WSY6预处理1、2、4 h后,再用H2O2处理1 h,流式细胞仪检测细胞内活性氧（ROS）水平;部分黑素细胞用6.25、12.5、25 μmol/L WSY6处理1 h后,再用H2O2处理1 h,Western印迹法检测细胞色素C（cyto?c）、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3（caspase?3）、caspase?9和磷酸化丝裂原活化的蛋白激酶（p?p38 MAPK）、细胞外调节蛋白激酶（p?ERK）及c?Jun氨基末端激酶（p?JNK）的表达。结果 与对照组相比,H2O2组黑素细胞存活率明显降低（29.22% ± 1.31%,P < 0.05）,细胞内LDH释放量增加（47.19% ± 4.85%,P < 0.05）,ROS水平明显升高（18.37 ± 1.59,P < 0.05）,caspase?3和caspase?9的表达亦均升高。与H2O2组相比,6.25、12.5、25 μmol/L WSY6组细胞存活率明显增加（52.48% ± 1.17%、60.21% ± 0.25%、78.32% ± 1.73%,P < 0.05）,LDH释放量明显下降（21.99% ± 0.22%、15.38% ± 0.45%、13.18% ± 0.38%,均P < 0.05）,25 μmol/L WSY6处理1、2、4 h组细胞内ROS显著下降（7.59 ± 1.00、6.22 ± 0.52、5.15 ± 0.48,均P < 0.05）。同时p38抑制剂组黑素细胞LDH释放量较H2O2组显著下降（P < 0.05）。Western印迹法显示,WSY6预处理后,与H2O2组相比,caspase?3和caspase?9表达明显降低,p?p38表达下降,但p?ERK和p?JNK表达无明显变化;同时WSY6组p38 MAPK下游产物p?p53表达也下降,且WSY6浓度越高,下降越明显。结论 WSY6对H2O2诱导的黑素细胞氧化应激损伤有显著的保护作用,可能通过p38 MAPK途径发挥作用。     

387例节段型白癜风患者的临床分析

目的 探讨节段型白癜风的病情发展特征。方法 问卷调查方法收集2011年10月至2012年10月于我科门诊就诊的387例节段型白癜风患者的资料,进行分析。结果 387例中329例（85.0%）发病由局限型发展为节段型,58例首发为节段型。在局限型发展为节段型患者中, 220/329例（66.9%）在发病前3个月进展最快,进展3年趋于稳定。在58/387例（15.0%）直接以节段型发病的患者中,40/58例（69.0%）在1个月内进展最快,1年后基本稳定。107/387例（27.6%）发病数年后病情仍不稳定。333/387例（86.0%）以单一神经节段发病,其中三叉神经分布区发病的患者173/333例（52.0%）。稳定长达1年的患者中,62例接受自体黑素细胞移植治疗,56例（90.3%）达到80%以上的复色效果。结论 节段型发病快于局限型发病,半数以上患者病情进展3年后稳定。自体黑素细胞移植治疗是稳定期节段型白癜风有效的治疗方法之一。     

大疱性类天疱疮合并胰头癌1例

患者男,86岁。躯干及四肢散在分布红斑和水疱,水疱呈半球形,疱壁紧张,较厚,尼氏征阴性。皮损组织病理检查示:表皮下水疱形成,疱内可见纤维素及嗜酸性粒细胞,真皮内散在嗜酸性粒细胞及中性粒细胞浸润。15个月后检查腹部CT示:胰头增大,胆总管扩张明显,内有占位影。诊断:大疱性类天疱疮;胰头癌。     

茶多酚、吡美莫司、他克莫司外用对莫诺苯宗诱导白癜风样模型小鼠的疗效比较

目的 探讨茶多酚、吡美莫司、他克莫司对莫诺苯宗诱导的白癜风样模型小鼠的疗效差异。 方法 45%莫诺苯宗诱导C57BL/6三周龄雌小鼠脱色,建立白癜风样动物模型。并研究他克莫司、吡美莫司、茶多酚对白癜风样模型小鼠脱色的治疗效果。通过肉眼观察毛发脱色及脱色面积,实验结束后取非用药部位脱色皮肤行组织学检查,HE染色检测淋巴细胞浸润情况,共聚焦激光扫描显微镜（RCM）观察小鼠皮肤的黑素和黑素细胞,免疫荧光检测CD8+ T细胞 。 结果 模型组小鼠在用药部位及非用药部位均有脱色现象。他克莫司组、吡美莫司组、茶多酚组小鼠脱色减少,出现时间晚和面积指数均较模型组低;且用药部位脱色斑局部淋巴细胞和CD8+ T细胞浸润减少。其中他克莫司组疗效优于其他组。 结论 他克莫司、吡美莫司、茶多酚对白癜风样模型小鼠均有疗效。