直接从外周血或骨髓进行定量RT－PCR

直接从外周血或骨髓进行定量ＲＴ－ＰＣＲ北京医科大学人民医院中心实验室颜世庆，白桃，王申五ＰＣＲ方法是基因表达定量和定性检测的简便方法，外周血和骨髓是临床检测和遗传研究中常用标本。通常是利用白细胞分离液从全血中制备白细胞，然后提取白细胞总ＲＮＡ，检测基...     

从同一外周血标本制备总RNA和DNA

在基因水平的临床研究中,常需要从人外周血白细胞中提取染色体DNA,以研究其基因的缺陷,或者制备细胞总RNA,以研究某基因的表达。需要同时了解基因的结构改变和功能异常时,从一份病人外周血或骨髓中同时分离出染色体DNA和细胞总RNA,无论从标本的来源、提取简便等方面考虑都是临床分子生物学研究的一个很实际的问题。 由细菌或培养细胞中同时分离DNA和PNA的方法已有报道。郭传海等介绍一种从小量样本同时提取RNA和DNA的方法,其提取总RNA采用异硫氰酸胍超离心法。最近我们参照汪洛等制备培养细胞总RNA的简便方法建立了由血细胞临床标本同     

多元药物抗性基因(mdr-1)在白血病细胞中的表达

多元药物抗性基因(multidrug resistance gene,mdr-1)编码 P 170膜蛋白,可使细胞对多种结构不同的细胞毒药物产生抗性。本文以 mdr-1 cDNA为探针,做白细胞总 RNA 斑点杂交分析了5例髓性白血病人mdr-1的mRNA水平。说明mdr-1基因在此类患者的白细胞中的表达有明显差异,同一病人治疗前后也有改变。所建立的观查临床标本中基因表达水平的方法,具广泛的应用价值。     

EXPRESSION OF THE MULTIDRUG RESISTANCE GENE IN LEUKEMIC CELLS

P-glycoprotein(Pgp; Mr=170,000) to encoded by a family of genes-Multldrug resistance gene. The Pgp has been demonstrated to mediate resistance to multiple structurally dissimilar drugs, which fuctions as an energy- dependent efflux pump so that a cell with high level of mdr expression can more effectively eliminate cytotoxic drugs. In this report, a simplified method for analysis of clinical samples and assess the level of gene expression was set up. Furthermore, by using 32P labelled mdr- 1 cDNA as the probe and RNA dot blotting the mdr-mRNAs from 5 cases of myeloblastic leukemia cells were analysed. It was shown that the level of mdr-1 expression In different myeloleukeic cells was various and reduced In one case after remission. The established method for mRNA analysis could be generalized for evaluating the level of mRNA in clinical samples.     

时间及会议管理联合SWOT分析在下肢深静脉血栓防治体系构建中的应用

目的探讨时间及会议管理联合SWOT分析在下肢深静脉血栓防治体系构建中的应用研究。方法选取阜外华中心血管病医院2022年2月至8月期间收治的110例下肢深静脉血栓患者作为研究对象, 采用随机数字表法将患者分为对照组和研究组, 各55例。研究组中, 男27, 女28例, 年龄(51.66±14.79)岁;对照组中, 男28例, 女27例, 年龄(50.91±15.74)岁。对照组接受常规管理方法, 研究组联合运用时间管理、会议管理、SWOT分析构建的防治体系。比较干预后3个月两组患者疼痛、肿胀、静脉扩张的发生率, D-二聚体(D-D)水平、血液流变学指标[血浆黏度(PV)、纤维蛋白原(FIB)]及患者满意度。采用t、χ2检验进行统计分析。结果干预后3个月, 研究组疼痛、肿胀及静脉扩张的发生率为9.09%(5/55), 对照组为27.27%(15/55), 两组比较差异有统计学意义(χ2=6.111, P=0.013);研究组的D-D、PV、FIB水平分别为(8.51±1.25)mg/L、(1.16±0.12)mPa/s、(2.29±0.34)g/L, 均低于对照组[(27.17±4.12)...     

活动性系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞白介素6信使RNA（IL－6mRNA）表达水平的研究

应用反转录／聚合酶链反应（ＲＴ／ＰＣＲ）方法检测了２１例ＳＬＥ患者及１４例正常人外周血单个核细胞（ＰＢＭＣｓ）中白介素６信使ＲＮＡ（ＩＬ－６ｍＲＮＡ）表达水平，结果表明活动性ＳＬＥＰＢＭＣｓ中ＩＬ－６ｍＲＮＡ表达明显高于非活动性患者及正常对照，而非活动期ＳＬＥ与正常组比较无显著统计学差异，提示ＩＬ－６可能参与活动性ＳＬＥ的发病机制。