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目的分析新生隐球菌(标准株WM148)干预人单核巨噬细胞(THP-1细胞)中miR-155-5p和核因子κB抑制蛋白E(IKBKE)基因的表达变化,验证其靶向关系,并研究其对肿瘤坏死因子细胞(TNF)-α和白细胞介素(IL)-6的调控作用。方法体外培养THP-1细胞,按照数量5∶1将热灭活新生隐球菌加入培养瓶内,分析0h、3h、6h、9h和12h这5个时间点的miR-155-5p和IKBKE的表达倍数变化以及TNF-α和IL-6的表达量变化;双荧光素酶报告系统验证miR-155-5p和IKBKE3'UTR的靶向关系;分别转染miR-155-5pmimics和IKBKEsiRNA,观察在6hmiR-155-5p和IKBKE的表达倍数变化以及TNF-α和IL-6的表达量变化。结果新生隐球菌干预THP-1细胞后,miR-155-5p表达增加,6h达到峰值,随后逐渐下降,而IKBKE在6h表达降低,TNF-α和IL-6的表达量随时间逐渐增加;双荧光素酶报告系统中miR-155-5p mimics作用后IKBKE3'UTR活性下降,将IKBKE3'UTR进行突变后,IKBKE3'UTR活性较野生型增加;分别转染miR-155-5pmimics和IKBKE siRNA后,在6h TNF-α和IL-6的表达量实验组均较对照组明显增加。结论 THP-1细胞中miR-155-5p可通过靶向降解IKBKE信使RNA(mRNA)促进TNF-α和IL-6的表达增加,表明其在THP-1细胞抗新生隐球菌中发挥着促炎作用,可作为将来隐球菌性脑膜炎的潜在治疗靶点。 相似文献
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新生隐球菌（Cryptococcus neoformans,C. neoformans）是一种酵母样真菌,既可引起肺组织感染,也可引起危及生命的脑膜脑炎。当新生隐球菌感染人体后,巨噬细胞作为第一道免疫防线,迅速识别、吞噬及破坏病原体。新生隐球菌与巨噬细胞相互作用的不同结果会导致疾病向不同的结局发展,了解这些作用机制对于隐球菌病的防治起到关键作用。本文就新生隐球菌感染期间与巨噬细胞的相互作用及内在分子机制作一综述,以期为疫苗研制及免疫疗法提供理论基础和方向。
相似文献4.
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