胰蛋白酶对皮肤鳞状细胞癌A431细胞生长的影响

目的 探讨胰蛋白酶对皮肤鳞状细胞癌A431细胞增殖、迁移和黏附能力等生物学行为的影响。方法 用不同浓度的胰蛋白酶处理A431细胞,通过CCK8法检测细胞活性,筛选胰蛋白酶作用的最佳浓度;流式细胞仪检测癌细胞增殖周期细胞百分率和增殖率;划痕和Transwell小室实验分别检测癌细胞在二维和三维空间的迁移能力;纤连蛋白粘附试验检测癌细胞的黏附潜能。 结果 用不同浓度胰蛋白酶处理A431细胞,通过检测细胞生长活性发现,随着胰蛋白酶浓度升高,A431细胞增殖活性增加;100 nmol/L胰蛋白酶处理A431细胞后,与对照组相比,G1期细胞比例减少,S期细胞比例增高,细胞增殖指数、细胞迁移能力和黏附潜能增加,差异均有统计学意义（均P < 0.05）。 结论 胰蛋白酶能促进A431细胞增殖、迁移和黏附。     

沙利度胺用于预防化疗患者恶心、呕吐的临床疗效分析

目的 通过研究探讨沙利度胺用于预防化疗患者恶心、呕吐的临床疗效以及用法用量等方面的问题.方法 选取该院从2016年1—10月期间收治的肿瘤患者60例为研究对象,随机的分成两组,即对照组和观察组各30例患者.对照组30例患者采用常规化疗及5-HT3受体拮抗剂联合治疗.观察组30例患者则在对照组的基础上加用沙利度胺联合治疗.该次研究两组患者的治疗方案均为21~28 d为1个疗程,在该次研究进行2个疗程后,对两组患者的恶心、呕吐的控制率、患者的生活质量以及患者发生的不良反应情况进行相应的统计分析,观察沙利度胺对化疗患者恶心、呕吐的临床疗效.结果 通过研究发现,实验组和对照组控制化疗所致恶心的有效率分别为90.0%和50.0%,控制呕吐的有效率为93.3%和60.0%,实验组均高于对照组(P<0.01).结论 沙利度胺具有预防化疗病人恶心、呕吐的临床疗效显著,不良反应低,价格低廉等优势,值得在临床上推广使用.     

沉默VEGF对胃癌细胞侵袭的影响

目的用RNA干扰技术抑制VEGF基因表达,探讨RNA干扰对胃癌细胞的侵袭的影响。方法设计合成VEGF shRNA,体外脂质体介导转染胃癌细胞株BGC-823,EL1SA检测细胞培养上清液中VEGF蛋白的表达,体外侵袭实验比较细胞侵袭能力变化。结果 VEGF shRNA明显下调VEGF基因的表达,VEGF表达下调后,胃癌细胞体外侵袭能力显著降低。结论VEGF shRNA显著抑制了VEGF的表达和胃癌细胞侵袭。     

FOLT方案与SOX方案治疗局部晚期胃癌的疗效和安全性及对血清TAM、DKK-1影响的对比

[目的]研究胃癌新辅助化疗方案(FLOT方案)与S-1+奥沙利铂方案(SOX方案)治疗局部晚期胃癌的疗效和安全性对比及对血清肿瘤相关物质(TAM)、分泌型糖蛋白(DKK-1)的影响。[方法]选取78例局部晚期胃癌患者,随机分为对照组(38例)和观察组(40例)。对照组患者给予SOX方案化疗,观察组患者给予FOLT方案化疗。评估患者临床疗效;采用酶联免疫双抗夹心法检测血清中TAM、癌胚抗原(CEA)和DKK-1水平;记录2组患者中位生存时间及患者安全性。[结果]观察组、对照组患者临床治疗总有效率分别为87.50%、68.42%,组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。治疗前,对照组与观察组患者血清TAM、CEA和DKK-1水平相当(P>0.05);治疗后,2组患者血清TAM、CEA和DKK-1水平均降低,且观察组降低幅度更大(P<0.05)。观察组患者中位生存时间为13.00个月(95%CI:11.73～13.48个月),对照组患者中位生存时间为9.00个月(95%CI:7.89～9.75个月),观察组患者中位生存期显著长于对照组,组间比较差异有统计学意义(P<...     

低分子肝素对A431细胞株生物学行为的干预研究

目的 研究低分子肝素对体外培养的皮肤鳞状细胞癌A431细胞株生物学行为的影响.方法 通过不同浓度的低分子肝素处理A431细胞,筛选出最佳实验浓度.用最佳浓度低分子肝素处理A431后,分别用细胞活力检测试剂盒(CCK-8)检测细胞活性,用流式细胞仪检测细胞增殖;用划痕、Transwell小室和黏附试验分别检测A431细胞的迁移和黏附;实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应、Western印迹和双抗体夹心酶联免疫吸附法检测细胞内血管内皮细胞生长因子(VEGF)表达水平,进行方差分析与t检验.结果 低分子肝素影响癌细胞活力的最佳浓度为200 IU/ml,用其处理A431细胞后,细胞活性降低,细胞周期阻滞,GI期细胞比率显著增加,S期细胞比率明显降低;低分子肝素组A431细胞增殖指数在48 h和72 h分别为23.41±5.51和11.76±5.13,均显著低于相应未处理组(分别为48.62±4.50和46.86±3.51,两组比较,t值分别为6.14和9.78,P值均＜0.05).低分子肝素组A431细胞中VEGF mRNA表达(48 h和72 h分别为10.16±0.07和4.11±0.01)显著少于相应未处理组(分别为18.77±0.11和17.39±0.05,两组比较,t值分别为114.38和451.10,P值均＜0.05),VEGF蛋白表达(分别为0.16±0.01和0.12±0.01)、VEGF分泌量(分别为67.17±3.34 ng/L和28.14±3.14 ng/L)亦显著少于相应未处理组(分别为0.20±0.01和0.21±0.01,122.63±23.17 ng/L和86.76±1.18 ng/L,P值均＜0.05).低分子肝素组A431细胞黏附率在48 h和72 h分别为29.7％±1.92％和17.5％±0.79％,均显著低于相应未处理组(分别为36.9％±0.35％和34.6％±0.96％,P值均＜0.05),并在24h、48 h和72 h后显著抑制了细胞迁移.结论 低分子肝素通过降低A431细胞活性、减少细胞VEGF表达,抑制A431细胞的增殖、迁移和黏附.     

甲磺酸阿帕替尼治疗晚期卵巢癌的临床效果及对人附睾蛋白4、血清甲胎蛋白、糖类抗原724和糖类抗原125的影响

目的：探究甲磺酸阿帕替尼治疗晚期卵巢癌的临床效果及对人附睾蛋白4、血清甲胎蛋白、糖类抗原724和糖类抗原125的影响。方法：选取2016-07～2021-04本院收治的晚期卵巢癌患者46例作为研究对象,按照随机数表法分为对照组(n=23)和观察组(n=23),对照组给予紫杉醇联合卡铂化疗,观察组在对照组基础上给予甲磺酸阿帕替尼治疗,观察两组的临床效果及人附睾蛋白4(HE4)、血清甲胎蛋白(AFP)、糖类抗原724(CA724)和糖类抗原125(CA125)变化。结果：治疗后两组HE4、AFP、CA125、CA724水平相较治疗前均有所降低,且观察组明显低于对照组(P<0.05)。观察组客观缓解率明显高于对照组(P<0.05)。结论：应用甲磺酸阿帕替尼治疗晚期卵巢癌,可有效改善血清肿瘤标志物水平,提高客观缓解率,临床治疗效果显著,具有一定参考价值,值得推广应用。     

靶向VEGF的shRNA对皮肤鳞癌A431细胞的作用

 目的 构建靶向VEGF的shRNA（psilencer-VEGF1-shRNA,VEGF-s1;psilencer-VEGF2-shRNA,VEGF-s2）干预皮肤鳞癌细胞（A431）的一系列生物学行为,探讨VEGF-s1和VEGF-s2干预作用的意义。方法 构建psVEGF-shRNA真核表达质粒干预体外培养的A431细胞, 同时构建含随机靶序列的阴性对照表达质粒(psilencer-Target-off-shrank,T-off)。RT-QPCR,western blot 和ELISA检测细胞内VEGFmRNA和蛋白表达水平的变化;CCK-8法检测细胞活性;流式细胞仪检测癌细胞增殖周期细胞百分比与细胞凋亡;划痕试验和Transwell小室试验别检测癌细胞二维和三维空间的迁移能力;FN黏附试验检测癌细胞的黏附潜能。结果 A431细胞转染psVEGF-shrank后活性降低,细胞周期发生阻滞,与对照组相比细胞在G1期比率显著增加(P<0.05),在S期比率明显降低,细胞调亡增加(均P<0.05),细胞内VEGFmRNA和蛋白表达水平下降,细胞迁移和黏附潜能均受到抑制。结论 VEGF是人皮肤鳞癌细胞生长相关的重要基因,干扰VEGF基因能有效抑制人皮肤鳞癌细胞的生物学行为。     

荷人皮肤鳞状细胞癌裸鼠移植瘤模型中干扰血管内皮生长因子的实验研究

目的 在沉默血管内皮生长因子(VEGF)的荷人裸鼠皮肤鳞状细胞癌(鳞癌)移植瘤中观察肿瘤生长,探讨靶向VEGF小发夹核酸(shRNA)的作用.方法 生物合成靶向人VEGF基因的shRNA干扰真核表达质粒(psilencer-VEGFl -shRNA、VEGF-s1;psilencer-VEGF2-shRNA、VEGF-s2),同时合成含随机靶序列的阴性对照表达质粒(psilencer-Target-off-shrank,T-off).将构建的质粒分别转染于筛选的人皮肤鳞癌细胞株(A431),获得稳转细胞株.实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应、双抗体夹心酶联免疫吸附法分别检测稳转细胞株中VEGF mRNA和VEGF蛋白的表达.用稳转细胞株制备荷人皮肤鳞癌裸鼠移植瘤模型,观察裸鼠体内肿瘤生长,6周后(20d)处死裸鼠进行肿瘤病理学研究,免疫组化染色检测瘤组织VEGF、增殖细胞核抗原( PCNA)和CD34蛋白的表达.应用stata 7.0统计学软件进行统计学处理.组间比较采用t检验.结果 转染VEGF-s1和VEGF-s2的A431细胞中VEGF mRNA表达分别为27.85±3.95和24.69±2.83,表达量显著低于未转染组(54.06±6.38,t值分别为6.05和7.29,P值均＜0.01);VEGF蛋白表达分别为32.67±2.52和29.27±1.10,亦显著低于未转染组(52.85±2.23,t值分别为8.04和11.53,P值均＜0.01).用转染VEGF-s1和VEGF-s2的A431细胞制备荷人皮肤鳞癌裸鼠移植瘤模型,裸鼠肿瘤体积分别为( 192.50±10.90) mm3和(203.67±3.21) mm3,明显小于未转染组(272.00±21.07 mm3,t值分别为5.80和5.55,P值均＜0.01);裸鼠肿瘤重量分别为(0.05±0.03)g和(0.13±0.04)g,与未转染组(0.25±0.02 g)比较明显减轻(t值分别为9.60和4.64,P值均＜0.01);裸鼠肿瘤细胞中VEGF蛋白表达率分别为52.00％±2.00％和56.67％±3.06％,PCNA阳性率分别为37.01％±2.41％和33.94％±3.25％,CD34阳性血管数分别为2.05±0.07和1.72±0.10,与未转染组(70.00％±2.00％、72.11％±3.02％和4.01±1.27)比较,均显著降低(P值均＜ 0.01).各项指标中,转染VEGF-s1和VEGF-s2组间、未转染组和T-off组间差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 靶向VEGF基因的shRNA能有效抑制A431细胞和荷人裸鼠皮肤鳞癌移植瘤中VEGF的表达,导致肿瘤生长受抑,肿瘤恶性表型减弱.     

针对VEGF的shRNA对宫颈癌细胞株细胞生物学行为的影响

目的用VEGF-shRNA真核表达载体干预体外培养的宫颈癌细胞（Hela）的一系列生物学行为,探讨这些干预的作用机制。方法设计合成VEGFshRNA,体外脂质体介导转染宫颈癌Hela细胞株,RT-QPCR转染前后VEGF的表达变化。MTT法检测转染前后细胞的生长速度,体外侵袭实验及体外迁移实验比较细胞侵袭、迁移能力变化。结果 VEGFshRNA明显下调VEGF基因的表达。VEGF表达下调后,Hela细胞生长出现明显的抑制,体外侵袭能力、迁移能力显著降低。结论 VEGFshRNA明显地抑制了Hela细胞的生长、体外侵袭和迁移运动。     

张力蛋白1抑制非小细胞肺癌细胞增殖和侵袭

目的: 探讨张力蛋白1(tensin1,TNS1)在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达水平、与NSCLC患者预后的关系及其对NSCLC细胞生物学功能的影响。方法: 收集56例NSCLC患者的临床病理资料,通过电话方式进行随访,了解患者生存情况。荧光实时定量PCR(qRT-PCR)检测56例NSCLC标本和对应癌旁组织中TNS1 mRNA表达水平,分析其与NSCLC患者临床病理特征的关系。采用Kaplan-Meier法绘制生存曲线,分析TNS1 mRNA与NSCLC患者预后的关系。采用qRT-PCR和蛋白质印迹法分别检测NSCLC细胞A549、H1299与正常肺支气管上皮16HBE细胞中TNS1 mRNA和蛋白表达水平;将A549、H1299细胞各分为2组,分别转染TNS1过表达质粒(pcDNA3.1/TNS1组)和相应的空载质粒(阴性对照pcDNA3.1组);MTT实验、克隆形成实验、细胞划痕、Transwell实验分别检测细胞增殖、迁移、侵袭能力;蛋白质印迹法检测细胞上皮间质转化相关分子蛋白水平。结果： 与癌旁组织相比,NSCLC组织中TNS1 mRNA表达明显降低(P<0.05)。TNS1 mRNA表达量与NSCLC患者淋巴结转移及术后肿瘤转移相关(P<0.05),与年龄、性别、吸烟、病理分型、肿瘤大小、TNM分期无明显相关性(P>0.05)。TNS1 mRNA高表达患者的3年累积无病生存率和累积总体生存率均高于TNS1 mRNA低表达患者(P均<0.05)。A549和H1299细胞中TNS1 mRNA和蛋白表达量均明显低于16HBE 细胞(P均<0.01)。与对照组相比,pcDNA3.1/TNS1组A549和H1299细胞增殖、迁移、侵袭能力降低,E-钙黏蛋白表达明显上调(P<0.01),波形蛋白表达明显下调(P<0.01)。结论： TNS1在NSCLC组织及细胞中表达下调,与NSCLC患者预后相关,可抑制NSCLC细胞增殖和迁移。