新生儿医院产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌感染分离株耐药性及基因类型检测

目的 了解新生儿医院感染产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）肺炎克雷伯菌分离株的耐药状况及β-内酰胺酶编码基因TEM、SHV、OXA、PER、GES、VEB、CTX型存在状况。方法 将我院2004年7月新生儿病房感染的14株肺炎克雷伯菌用全自动微生物鉴定和药敏分析配套卡进行抗生素敏感性检测和ESBLs检测，并采用聚合酶链反应及序列分析方法分析菌株内的超广谱β-内酰胺酶基因型。结果 14株产ESBLs的肺炎克雷伯菌药敏结果一致，氨苄西林、头孢曲松、头孢唑林、头孢他啶均耐药对阿莫西林／克拉维酸、哌拉西林／三唑巴坦也耐药，对亚胺培南敏感。均检出blacTX-M和blaTEM基因，未检出blasm,、扰noxA、blaPER、扰nGES和blaVEB基因。对blarm和blacTX-M基因扩增产物测序，经BLAST程序分析基因为TEM-1和CTX-M-3型。结论 本院感染流行的ESBLs肺炎克雷伯菌耐第三代头孢菌素和耐酶抑制剂，基因类型为TEM-1和CTX-M-3。新生儿属于ESBLs的高危人群，新生儿病房产超广谱β-内酰胺酶菌感染应引起各方关注。     

淋病奈瑟菌青霉素、四环素耐药的分子检测

淋病奈瑟菌 (ＮｅｉｓｓｅｒｉａＧｏｎｏｒｒｈｏｅａｅ ,ＮＧ)的青霉素、四环素耐药表型研究 (即药敏分析 )国内已有较多文献报导。但不同的药敏检测方法其检出率的差异颇大。ＮＧ对青霉素、四环素耐药多数分别为获得ＴＥＭ基因和ＴｅｔＭ基因的质粒所致。为精确了解常州地区ＮＧ对青霉素、四环素的耐药状况 ,我们应用以ＴＥＭ基因为靶基因的套式聚合酶链反应 (ｎｅｓｔｅｄＰｏｌｙｍｅｒａｓｅＣｈａｉｎＲｅａｃｔｉｏｎ ,ｎＰＣＲ)和以ＴｅｔＭ基因为靶基因的ＰＣＲ技术对分离自常州地区的 5 0株ＮＧ进行了分析检测 ,现将结果报告如下…     

淋病奈瑟球菌药敏检测及耐药分子机制研究

目的：从表型和基因型水平了解常州地区淋病奈瑟球菌(Ng)流行株对青霉素、四环素和环丙沙星耐多药(MDR)状况，并为筛选其治疗药物提供依据。方法：以纸片扩散法进行青霉素、四环素、环丙沙星和大观霉素4种药物的敏感性检测；以套式-聚合酶链反应(nested-PCR)及：PCR技术进行TEM-1基因、TetM基因检测和gyrA基因、penA基因PCR加DNA测序分析。结果：①常州地区Ng对青霉素、四环素、环丙沙星表型耐药分别为65．5％、53．0％和73．3％；基因耐药分别为78．2％、53．3％和100％。而对大观霉素较为敏感(97．6％)。②50株Ng均存在gyrA基因双位点突变。③2株药敏检测结果为青霉素耐药，但β内酰胺酶、TEM—1基因均为阴性的Ng都存在penA基因突变。④基因研究发现：常州地区青霉素、四环素、环丙沙星三重耐药占38％，青霉素与环丙沙星，四环素类与环丙沙星二重耐药分别占26％和10％，即MDR菌株总数已达74％。结论：在常州地区青霉素、四环素、环丙沙星对淋病的治疗作用已较差，大观霉素可作为治疗MDR Ng的有效药物。     

头孢噻肟与阿奇霉素对大肠埃希菌的联合药敏研究

目的:研究头孢噻肟(CTX,β-内酰胺类抗生素)与阿奇霉素(AZI,大环内酯类抗生素)联合用药,对临床分离的大肠埃希菌的体外抗菌效应.方法:应用微量肉汤稀释法,采用棋盘法设计,测定不同浓度组合的抗菌药物对25株临床分离的大肠埃希菌的最低抑菌浓度(MIC),并计算抑菌指数(FJC)判断联合效应.结果:头孢噻肟与阿奇霉素联用对大肠埃希菌表现为协同和相加作用,协同作用为35.7%,相加作用为57.1%,无关作用为7.1%,无拮抗作用.结论:头孢噻肟与阿奇霉素联用对临床分离的大肠埃希菌的体外抗菌效应增强,主要表现为相加和协同作用     

50株淋病奈瑟菌喹诺酮耐药决定区的DNA测序研究

目的　从基因水平了解淋病奈瑟菌 (NeisseviaGonorrhoeae ,NG )对喹诺酮类药物的耐药状况。方法　对收集自常州地区的 5 0株NG喹诺酮作用靶位酶 (DNA回旋酶 )GyrA基因进行PCR检测 ;并对喹诺酮耐药决定区 (quinoloneresis tance—determingregion ,QRDR )进行测序研究。结果　 5 0株NG菌经GyrA基因扩增均出现 372bp清晰明亮的荧光带 ,其产物经双脱氧末端终止法测序经与 (gi:5 2 940 7)序列比对 ,5 0株NG菌均存在第 91位和第 95位密码子的突变 ,第 91位密码子均由TTC→TCC ;第 95位密码子由GAC→GGC、GCC和AAC三种形式。结论　本文基因研究显示喹诺酮类抗生素对我国淋病的治疗已失去作用 ,在喹诺酮类新型药物研制中要加强对突变株的作用     

新生儿肺炎链球菌苯唑西林耐药与pbp2B基因突变分析

目的了解新生儿肺炎链球茵（streptococcus pneumoniae，SP）青霉素耐药基因突变及体外苯唑西林耐药状况。方法对分离自新生儿呼吸道的20株肺炎链球茵用纸片扩散法（K—B法）进行青霉素耐药性试验。用套式聚合酶链反应（nPCR）扩增PbP2B基因，对PCR产物进行DNA测序。结果20株肺炎链球茵体外苯唑西林耐药，耐青霉素PbP2B基因突变为点突变，分A、B两类各占95％和5％。结论新生儿肺炎链球茵耐青霉素株pbp2B基因突变类型与DUPLESSIS等报道的不完全相同应引起高度重视。     

哺乳期妇女血清钙和乳汁钙的调查分析

哺乳期妇女血清钙和乳汁钙的调查分析常州市妇产医院张一鸣，郑亚芬，承晓京，范雪琴ＷＨＯ提倡６个月以山婴儿进行纯母乳喂养，因此，乳汁的质量对婴儿的生长发育起着举足轻重的作用。由丁婴儿骨骼发育快，需要大量的钙，而乳汁是婴儿所需钙的唯一来源，因而乳汁钙的含量...     

阿奇霉素与头孢噻肟对肺炎克雷白杆菌联合药敏研究

目的：研究阿奇霉素与头孢噻肟对30株临床分离肺炎克雷白杆菌的联合抗茵效应。方法：采用棋盘法设计,微量肉汤稀释法测定。测定不同浓度组合的两种抗菌药物对30株肺炎克雷白杆菌的最低抑菌浓度,计算FIC指数,并观察两药不同加药顺序对效应的影响。结果：阿奇霉素与头孢噻肟联合应用后对肺炎克雷白杆菌的浓度一累积抑菌百分率均比单独应用有较大提高。FIC指数结果表明,阿奇霉素与头孢噻肟联合应用后对肺炎克雷白杆菌20％为协同作用,63％为相加作用,10％为无关作用,7％为拮抗作用。先后联用与同时应用抗菌效应无显著性差异（P〉0．05）。结论：一般情况下,对临床分离肺炎克雷白杆菌,阿奇霉素与头孢噻肟联合应用是合理的。     

淋病奈瑟菌青霉素耐药基因研究

淋病奈瑟菌(Neisseria gonorrhoeae,Ng)青霉素耐药率逐年上升。Ng青霉素耐药机制包括获得含TEM-1基因质粒和染色体上penA基因突变,前者产青霉素酶水解青霉素形成耐药,后者导致其青霉素结合蛋白2(penicillin—binding protein 2,PBP2)结构异常,与青霉素结合力下降而引起耐药。为探讨可能存在的Ng青霉素耐药机制,我们对43株Ng进行了TEM基因聚合酶链反应(PCR),