脑衰蛋白反应调节蛋白-2参与低氧预适应减轻小鼠脑缺血损伤

目的 研究参与低氧预适应(HPC)的经典型蛋白激酶C II(cPKC II)相互作用的脑衰蛋白反应调节蛋白-2(CRMP-2) 对缺血脑是否有保护作用。方法 成年雄性BALB/c小鼠随机分为常氧(Nor)、HPC、常氧假手术(Nor+sham)、HPC假手术(HPC+sham)、常氧缺血(Nor+I)和HPC缺血(HPC+I)等6组(每组n=6)。应用小鼠整体HPC和脑中动脉梗死(MCAO)致脑局部缺血模型,结合免疫沉淀、双向凝胶电泳和质谱等技术,分离和鉴定与cPKC II相互作用蛋白;利用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白印迹(Western blot)技术,分析CRMP-2磷酸化和蛋白降解水平在脑HPC和缺血中的变化。结果 与Nor组比,HPC鼠脑皮层组织内有10种与cPKC? II相互作用蛋白的表达发生了明显变化,其中CRMP-2在膜相关蛋白组分中的表达量升高,而在胞质蛋白组分中的表达量降低。在脑缺血模型中,与Nor+Sham组相比,Nor+I组小鼠脑皮层缺血核心区(Ic)CRMP-2磷酸化水平明显降低(p<0.05, n=6);与Nor+I组相比,HPC+I组小鼠脑皮层Ic区内CRMP-2磷酸化水平明显增高(p<0.05, n=6)。脑缺血可导致CRMP-2发生水解并伴随着大量55-ku水解片段(BDP)的出现,但与Nor+I组相比,HPC+I组小鼠脑皮层缺血半影区(P)内CRMP-2水解片段减少,水解率明显降低(p<0.05, n=6)。结论 CRMP-2参与了 HPC缓解小鼠脑缺血Ic区内CRMP-2磷酸化水平的降低和减少P区内CRMP-2水解片段从而减轻缺血脑组织的损伤。     

自噬在肾移植中的研究进展

肾移植已成为目前治疗终末期肾脏病最有效的治疗手段,可显著提高受者的存活率并极大地改善其生活质量。但是肾移植手术过程中不可避免的缺血再灌注损伤及术后的排斥反应和感染等严重影响受者的预后和肾功能恢复。自噬是细胞"自我吞噬"的一种复杂的、进化保守的生命现象,有利于细胞在应激和压力下获得生存的优势。多个研究表明,自噬在肾移植中也发挥重要作用。据此,本文就自噬在肾移植中作用及研究进展做一简要概述,以期为临床自噬与肾移植相关研究提供参考和思路。     

以问题为基础的教学法对医学生创新能力培养的探讨

目的探讨以问题为基础的教学法（Problem based learning,PBL教学法）对医学生创新能力培养的效果。方法在诊断学教学中,将66名首都医科大学医学生随机分为两组,试验组（n=33）实施PBL法教学,根据其教学特点确立PBL教程,制作多媒体课件;对照组（n=33）实施传统方法教学。教学结束后对两组学生进行理论考试、操作考试和创新能力问卷调查,以评价教学效果和学生的创新能力。创新能力评价工具采用＂创新能力指数＂（creative ability index,CAI）。结果⑴两组学生在年龄、性别比例、创新能力评价各指标方面差异无统计学意义;⑵实施教学结束后,试验组学生理论考试、操作考试和综合成绩得分分别为53.5±2.7分、35.0±2.7分、88.5±3.8分,明显高于对照组学生,差异具有统计学意义（t值分别为6.311、6.617、8.837,P〈0.01）;⑶实施教学结束后,试验组学生CAI总分明显高于对照组;而且试验组学生在不墨守成规、能发现事物与现象的逻辑联系、能独立思考问题、发言直爽方面优于对照组,两组相比差异均具有统计学意义（χ2值分别为7.689、10.477、7.040、7.079,P〈0.05）。结论 PBL教学法能够提高医学生的学习成绩和创新能力。     

P38 MAPK磷酸化水平增高参与HPC降低MCAO所致小鼠缺血性脑损伤

目的 探讨p38丝裂原激活蛋白激酶(p38 MAPK)磷酸化和蛋白表达水平在低氧预适应(HPC)降低脑中动脉阻塞(MCAO)所致缺血性脑损伤中的变化情况。方法 利用已建小鼠HPC-MCAO模型,将健康雄性BALB/c小鼠随机分为常氧假手术(H0 Sham)、HPC假手术(H4 Sham)、常氧缺血(H0)和HPC缺血(H4)4组,应用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色、Nissl染色等方法观察脑损伤情况,应用Western blot并结合Gel Doc凝胶成像系统,定量检测小鼠脑组织内p38 MAPK磷酸化和蛋白表达水平的变化。结果 HPC可明显减小MCAO所致的脑梗死体积(P<0.05),与H0 sham相比,缺血组小鼠皮层缺血核心区和半影区p38 MAPK磷酸化水平显著升高(P<0.05, n=6),HPC可进一步增加缺血半影区和对侧皮层组织中p38 MAPK磷酸化水平(P<0.05, n=6)。各组间p38MAPK蛋白表达量水平无明显变化。结论 p38 MAPK可能参与了HPC降低MCAO所致小鼠缺血性脑损伤的作用。     

体外受精-胚胎移植助孕期间精子生化指标对妊娠结局的影响

目的 研究体外受精-胚胎移植(IVF-ET)助孕期间精子生化指标对妊娠结局的影响。方法 选取2019年7月至2022年3月邯郸市中心医院收治的139对接受IVF-ET助孕的夫妇作为研究对象。根据妊娠结局分为妊娠组(n=45)与未妊娠组(n=94)。检测两组男方精子形态、精子DNA碎片率与精浆锌水平,分析影响妊娠的因素,采用Pearson相关性分析精子生化指标与妊娠结局的相关性。结果 妊娠组正常形态精子率、精浆锌水平高于未妊娠组,畸形精子率、精子DNA碎片率低于未妊娠组(P<0.05)。Logistic回归分析结果显示,正常形态精子率、畸形精子率、精子DNA碎片率与精浆锌水平是妊娠结局的影响因素(P<0.05)。Pearson相关性分析结果显示,正常形态精子率、精浆锌水平与妊娠率呈正相关(P<0.05),畸形精子率、精子DNA碎片率与妊娠率呈负相关(P<0.05)。结论 IVF-ET助孕期间的精子形态、精子DNA碎片率、精浆锌水平是影响妊娠结局的重要因素,与妊娠结局密切相关,助孕期间应密切关注患者的精子状态。     

低氧预适应小鼠脑皮层内与nPKCe相互作用蛋白的鉴定

目的鉴定脑低氧预适(HPC)小鼠脑皮层组织内与新奇型蛋白激酶Cε(nPKCε)相互作用的蛋白。方法利用免疫沉淀(IP)和双向电泳(2-DE)技术分离小鼠脑皮层中与nPKCε相互作用的蛋白;以ImageMaster2D Platinum软件对双向电泳图谱进行差异表达分析;目标蛋白用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)及蛋白印迹(Western blot)进行鉴定分析。结果与对照组比较,HPC小鼠脑皮层内与nPKCε相互作用的胞质成分中有34个蛋白点上调,20个蛋白点下调,膜相关成分中有27个蛋白点上调,28个蛋白点下调;HPC后脑皮层胞质及膜相关成分中与nPKCε相互作用的热休克蛋白(HSP)70和14-3-3γ的蛋白表达量均升高,而HSP60仅在膜相关成分中升高(P<0.05,n=3)。结论nPKCε可能通过调节HSP60、HSP70和14-3-3γ等多种与其相互作用的蛋白参与脑HPC的形成。     

低氧预适应对小鼠缺血脑的保护及其p38 MAPK机制的实验研究

目的观察低氧预适应(hypoxic preconditioning,HPC)降低脑中动脉阻塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)所致小鼠缺血性脑损伤的作用,探讨在HPC脑保护作用中p38丝裂原激活蛋白激酶(p38MAPK)的变化。方法60只健康雄性BALB/c小鼠(18g～22g,8周～10周)分为:常氧假手术组(H0sham),常氧缺血组(H0),HPC假手术组(H4sham)和HPC缺血组(H4),每组15只。运用整体低氧预适应模型和脑中动脉梗死缺血模型,结合神经行为学评价、氯化三苯基四氮唑(TTC)染色、免疫组织化学和蛋白印迹(Westernblotting)技术,观察HPC对小鼠脑缺血损伤的影响以及皮质组织内p38MAPK磷酸化水平和蛋白表达量的变化。结果研究发现,HPC可明显改善小鼠缺血后神经行为学表现,减小MCAO导致的鼠脑梗死面积,减轻半影区神经元的丢失,降低缺血区水肿率和密度值;与H0假手术组相比,缺血组小鼠皮质半影区p38MAPK磷酸化水平显著增高;与常氧缺血组小鼠皮质半影区相比,HPC缺血组小鼠皮质半影区内p38MAPK磷酸化水平增高更加明显。结论p38MAPK信号转导通路可能参与了HPC对小鼠局灶性缺血脑的保护作用。     

胰激肽原酶治疗对夫精宫腔内人工授精反复失败患者IVF-ET助孕结果的影响

目的：探讨胰激肽原酶治疗对夫精宫腔内人工授精反复失败患者体外受精-胚胎移植(IVF-ET)助孕结果的影响。方法：选取本院2016年1月-2020年12月因男性因素夫精宫腔内人工授精反复失败的192例患者作为研究对象，按照随机数字表法分为对照组和观察组各96例。对照组给予维生素E治疗，观察组给予胰激肽原酶治疗，两组连续治疗3个月后行IVF-ET。比较两组治疗前后精子质量、患者配偶的促排卵相关指标、胚胎体外发育情况以及妊娠结局。结果：治疗后两组精液量、精子浓度均升高，但两组比较无差异(P>0.05);两组前向运动精子率、正常形态精子率均升高，且观察组高于对照组(P<0.05);DFI降低且观察组低于对照组(P<0.05)。两组患者配偶的Gn使用时间及用量、hCG日子宫内膜厚度及雌二醇水平，以及获卵数、MⅡ卵数均无差异(P>0.05)。观察组受精率、2PN率、卵裂率、优胚率、囊胚形成率均高于对照组(P<0.05)。两组流产率无差异(P>0.05);观察组新鲜移植和冷冻移植的临床妊娠率(90.9%、75.7%)、总累积活产/继续妊娠(74.0%)均高于对照组...