泰山产草乌中总生物碱的提取工艺研究

目的研究乌头总生物碱的提取工艺,优化得到乌头总生物碱的最佳提取工艺条件。方法分别采用回流法、索氏法、碱化索氏法、超声波法4种提取方法提取乌头总生物碱,根据正交实验的得率,优化乌头总生物碱的提取工艺条件;结果碱化索氏法提取为最佳方法,最佳提取条件是提取溶剂氯仿,体积为250 m l,提取时间为5h。结论碱化索氏法提取具有提取时间短、产率高、简单等优点。     

水蛭素促尿激酶纤溶作用研究

目的研究水蛭素对尿激酶诱导的纤溶作用的影响,并分析可能的机制。方法采用尿激酶为纤溶激酶,复钙柠檬酸钠抗凝血浆为纤溶酶原来源的体外溶栓模型,通过测定纤溶产物D-D imm er生成量,微孔板分光光度法跟踪纤溶过程,比较水蛭素与肝素对纤溶的影响。运用土豆羧肽酶抑制剂(CPI)对TAFIa的专一性抑制作用,分析水蛭素与肝素对TAFI活化的影响。结果水蛭素组D-D imm er较肝素组高(P<0.01),水蛭素加CPI组较水蛭素组更高(P<0.01);微孔板分光光度法跟踪纤溶过程,肝素组有明显的纤溶停止和血栓再形成倾向,水蛭素组则可观察到明显的溶栓现象,水蛭素加CPI组效果最好。结论对尿激酶诱导的纤溶,水蛭素比肝素有更好的间接促纤溶作用,其原因主要是水蛭素能有效抑制再次血凝的发生,减少了尿激酶和纤溶酶原的短暂性耗竭。在这一过程中,水蛭素不能彻底抑制TAFI活化,表明对TAFI活化的抑制可能不是水蛭素促尿激酶纤溶作用的主要原因。     

泰山白花丹参提取物对人脐血内皮祖细胞增殖、黏附及分泌NO的影响

目的:观察单味中药泰山白花丹参提取物(SBE)对人脐血内皮祖细胞(EPCs)增殖、黏附及分泌一氧化氮(NO)的影响。方法:采用密度梯度离心法从脐血获得单个核细胞,将其接种在人纤维连接蛋白包被的培养板上,培养7d后收集贴壁细胞,加入不同浓度SBE继续培养24h;分别采用MTT比色法、黏附能力测定实验和硝酸还原酶法测定EPCs的增殖、黏附和分泌NO能力。结果:与对照组比较,SBE组EPCs增殖、黏附能力提高,培养上清中NO浓度增加(P<0.05),其作用在一定范围内随SBE浓度增加而增强。结论:白花丹参显著改善EPCs功能,这可能是其内皮保护的新机制。     

医学生性观念、性教育状况的调查与分析

目的:了解医学大学生的性知识、性观念状况,寻求性教育的内容和方式。方法:采用问卷调查的方法,对山东泰山医学院231名大学生进行性知识、性观念及对性教育的需求调查。结果:多数医学大学生(67.3%)没有接受过正规的性教育;绝大多数学生(94.7%)认为性教育应包括"性知识和性病知识"的内容;不同性别的大学生在性教育的内容、途径及性观念等方面存在显著性差异。结论:大学生的性观念正在发生变化,对性教育的需求较高,为保证医学大学生的健康成长,建议应加强大学生的性教育工作。     

马铃薯中羧肽酶抑制剂的放射免疫分析

从马铃薯中提取、纯化了羧肽酶抑制剂(CPI),免疫家兔后产生CPI抗血清.用氯胺-T法制备125Ⅱ-CPI,采用双抗体聚乙二醇混合法建立了CPI放射免疫分析方法,批内和批间RSD分别为10.2%和7.4%,检测灵敏度为1.5μg/L,平均回收率104%,ED50为16.4μg/L.     

一种快速分离纯化土豆中羧肽酶抑制剂的方法

土豆中含有一种羧肽酶抑制剂（carboxypeptidase inhibitor，CPI），它极有可能成为一种辅助溶栓药物，因此建立一条土豆中CPI的快速分离纯化路线是很有必要的。土豆去皮匀浆后，所得CPI粗提液经离子交换和分子筛层析得到纯品。产品通过放射免疫分析和Lowry法定蛋白，其相对纯度达到89．38％，320g土豆收获19．92mgCPI，回收率达到50％左右，提取周期小于3d，整个工艺路线为CPI的产业化奠定了基础。     

超临界CO_2萃取黄伞脂溶性成分及其GC-MS分析

目的:采用超临界CO_2萃取技术对黄伞脂溶性成分进行萃取并利用GC-MS联用技术对其化学成分进行分析。方法:采用单因素试验、正交试验方法,以萃取温度、萃取压力、萃取时间及夹带剂浓度为考察因素,以黄伞脂溶性成分得率为指标,确定黄伞的超临界CO_2萃取最佳提取工艺。利用GC-MS技术对其化学成分进行分析,采用面积归一化法确定其百分含量。结果:超临界CO_2萃取黄伞脂溶性成分的最佳工艺条件为:萃取温度40℃,萃取压力30 MPa,夹带剂乙醇浓度95%,萃取时间2 h。此试验条件下,黄伞脂溶性成分的得率为1.43%。利用GC-MS技术,从黄伞萃取物中共鉴定出35种化合物,其中组分含量较高的依次为:1-异丙烯基-3-丙烯基环戊烷(35.96%)、反式-1,2-双(1-甲基乙烯基)-环丁烷(17.99%)、石竹烯(11.31%),这几个成分占黄伞脂溶性成分总量的65.26%。结论:用超临界CO_2提取可较好的获得黄伞脂溶性成分。     

泰山白花丹参提取物对H2O2诱导的人脐血内皮祖细胞损伤的保护作用及机制

目的:研究泰山白花丹参提取物对过氧化氢(H202)诱导的人脐血内皮祖细胞(EPCs)氧化应激损伤的保护作用及机制.方法:通过密度梯度离心分离人脐血单个核细胞,EBM-2完全培养基诱导分化培养EPCs.以0.001％H2O2诱导EPCs损伤,以泰山白花丹参提取物干预,以eNOS抑制剂L-NMMA定位泰山白花丹参对EPCs的作用靶位.通过光镜观察细胞形态,以四甲基偶氮噻唑蓝比色法检测细胞活力,用流式细胞仪AnnexinV/PI双染法检测细胞凋亡变化,取各实验组上清行丙二醛(MDA)含量检测.结果:EPCs受到氧化损伤后,细胞活力明显降低,细胞凋亡明显增加,上清MDA含量明显增加,加入白花丹参提取物可明显改善上述结果,而1 mmol·L-1 L-NMMA+0.6 g·L-1白花丹参制剂+H2O2处理组与H2O2组比较细胞活力和细胞凋亡率都没有显著差异.结论:泰山白花丹参提取物对H2O2损伤后内皮祖细胞有显著保护作用,eNOS抑制剂L-NMMA能抵消这种保护作用,说明泰山白花丹参可能是通过eNOS途径对EPCs氧化应激损伤起保护作用(eNOS是白花丹参的作用靶点之一).     

高效液相色谱法测定白花丹参3种炮制品中5种酚酸类成分的含量

目的: 建立同时测定白花丹参生品、酒制品和炒炭3种炮制品中5种酚酸类成分丹参素、原儿茶酸、原儿茶醛、迷迭香酸和丹酚酸B含量的高效液相色谱法,并探讨不同炮制方法对白花丹参中主要酚酸类成分的影响。 方法: 大连依利特C₁₈(4.6 mm×250 mm, 5 μm)柱;流动相甲醇-5%冰醋酸,梯度洗脱;流速1.0 mL·min^-1,检测波长286 nm,进样量20 μL。 结果: 丹参素、原儿茶酸、原儿茶醛、迷迭香酸和丹酚酸B的线性范围分别是7.31~234 (R2=0.999 5),6.75~216 (R²=0.999 9), 52.8~1.65 (R²=0.999 0),4.67~149.50 (R²=0.999 8),42.25~1 352 mg·L^-1 (R²=0.999 9);样品中5种酚酸类成分的平均加样回收率均>98%,RSD均<1.6%。 结论: 该方法简便快速,重复性好,灵敏度高,可作为白花丹参类药材的酚酸类成分含量的定量方法。测定结果显示,3种炮制品种均不含原儿茶酸,其余4种成分的含量均表现为生品<酒制品<炒炭。