三种方法检测孕妇血清IgG抗A(B)效价的结果比较

目的:比较经典法、改良法和微柱凝胶法抗人球蛋白试验检测孕妇血清中IgG抗A(B)效价的差异。方法:用经典法、改良法和微柱凝胶法分别检测136例孕妇血清中IgG抗A(B)效价,计算其阳性率,再以经典法为标准计算改良法和微柱凝胶法的特异性和敏感性。结果:经典法、改良法和微柱凝胶法检测孕妇血清中IgG抗A效价的阳性率分别为22.8%、25.0%和33.8%,IgG抗B效价的阳性率分别为19.1%、20.5%和31.6%。与经典法比较,改良法敏感性为98.1%,特异性为96.3%;微柱凝胶法敏感性为100%,特异性为63.4%。经统计学比较,,改良法和经典法的阳性率无统计学意义(P>0.05),而微柱凝胶法阳性率明显高于经典法(P<0.01)。结论:改良法和经典法检测孕妇血清中IgG抗A(B)效价的结果具有良好的一致性,而微柱凝胶法阳性率明显高于经典法,需重新设定临床意义决定值。     

猪囊尾蚴跨膜蛋白T24基因的克隆及序列分析

目的 寻找猪囊尾蚴病新的免疫学候选诊断分子.方法 设计合成引物,用PCR法从猪囊尾蚴cDNA文库中扩增出猪囊尾蚴跨膜蛋白T24基因编码序列,将其与线性克隆载体PMD-18T连接,分别进行酶切和PCR鉴定及DNA测序证实.结果 PCR法扩增出一条长度约678 bp的特异性片段,将重组质粒PMD-18T-T24作BamHⅠ和XhoⅠ双酶切,均能得到一个大小与PCR扩增产物一致的插入片段,对插入片段的测序结果表明,T24具有一个长度为678 bp的完整开放阅读框,编码225个氨基酸,理论分子量为23.91 kDa,与GenBank收录的猪囊尾蚴T24基因(编号为AY211879)具有高度的同源性(99.85%).结论 猪囊尾蚴跨膜蛋白T24编码基因克隆成功,为进一步的表达、鉴定及免疫诊断研究奠定了基础.     

艰难梭菌婴幼儿分离株毒力及基因型分布研究

目的明确深圳地区婴幼儿粪便中分离出的艰难梭菌的毒力及其基因型。方法收集深圳市宝安区妇幼保健院2014-2015年分离出的49株艰难梭菌菌株,PCR检测其毒素A、B的编码基因tcd A、tcd B的携带状况,数字化PCR-核糖体分型方法进行基因分型。结果 49株艰难梭菌tcd A、tcd B携带率分别为44.9%(22/49)和59.2%(29/49),其中22株tcd A、tcd B均为阳性,7株为tcd A阴性、tcd B阳性;49株菌可分为22种核糖体型,最常见的核糖体型为RT017(7/49,14.3%),BA03(5/49,10.2%),BA16(5/49,10.2%)和BA13(4/49,8.2%)。7株RT017菌株均为tcd A-tcd B+,而最常见的tcd A~+tcd B~+菌株(44.9%,22/49)则来自RT017以外的15种核糖体型。结论深圳地区婴幼儿中分离出的艰难梭菌半数以上为产毒株,且产毒株多同时携带tcd A、tcd B基因;基因型则以RT017为主,且均为产毒素B而不产毒素A菌株。     

猪囊尾蚴抗原基因GP50的表达及鉴定

目的为了寻找猪囊尾蚴病新的免疫学候选诊断分子,克隆猪囊尾蚴抗原GP50编码基因,并进行表达、鉴定。方法设计合成引物,用PCR法从猪囊尾蚴cDNA文库中扩增出猪囊尾蚴抗原GP50基因编码序列,将其克隆入pGEM-T载体,然后在真核表达载体pBKCMV中亚克隆,用IPTG诱导表达,SDS-PAGE和Westernblot观察表达结果。结果RT-PCR法扩增出一条大小约897bp的特异性片段,克隆质粒pGEM-GP50和真核表达质粒pBKCMV作BamHⅠ和XhoⅠ双酶切和以重组质粒为模板进行PCR扩增,均可获得一条与PCR产物一致的DNA片段。诱导表达后,经SDS-PAGE可见一条约36kDa大小的融合蛋白条带,Western blot结果显示其可与猪囊尾蚴病人血清起反应。结论本实验成功地克隆了猪囊尾蚴抗原GP50编码基因,并在原核细胞中进行了表达及鉴定,为进一步的免疫诊断研究奠定了基础。     

莫西沙星耐药的艰难梭菌多重聚合酶链反应检测和基因分型

目的：建立一种多重 PCR 方法用于莫西沙星耐药的艰难梭菌鉴定和初步基因分型。方法根据艰难梭菌 slpA 可变区间核苷酸序列的差异设计5种 slpA 基因型（gr、hr、fr、gc08和078）的特异性 PCR 引物,同时加入检测艰难梭菌管家基因磷酸甘油醛异构酶基因 tpi 的种特异性引物,构建多重PCR 方法;利用9种肠道常见的正常或致病菌验证多重 PCR 方法的特异性,利用46株分属于11个slpA 基因型的艰难梭菌参考菌株来验证方法的检测和分型能力;利用建立的多重 PCR 方法检测39株莫西沙星耐药的临床菌株,以 slpA 测序分型法为参照方法,评估该方法的临床实用性。结果多重PCR 检测9种肠道常见的正常或致病菌 tpi 和5种 slpA 基因型均为阴性;46株艰难梭菌参考菌株 tpi均为阳性,36株分属于5种靶 slpA 基因型（gr、hr、fr、gc08和078）的菌株被正确分型,10株分属于其他6种基因型的参考菌株均无法分型。39株莫西沙星耐药的艰难梭菌临床菌株 tpi 均为阳性,32株检出具体基因型,其中22株为 slpA 基因型 gc08,6株为 hr,2株为 fr,2株为078,与 slpA 测序分型结果一致;7株多重 PCR 无法分型,slpA 测序分型结果显示其基因型均不包含在多重 PCR 分型范围内。结论成功建立一种简单、快捷、临床实验室适用的艰难梭菌检测,且能够分辨出5种 slpA 基因型的多重PCR 方法;莫西沙星耐药的艰难梭菌主要为 slpA 基因型 gc08。     

运用近红外光谱相似系数法对牛黄解毒片中异性有机物的检测

通过运用NIR对牛黄解毒片中异性有机物进行检查,得出结论：建立的应急检验模型具有方法简单、易操作等特点,适用于药品检测车对牛黄解毒片中异性有机物的快速筛查。     

鸡血藤的研究进展

鸡血藤为传统中药,主要含有黄酮类、酚类、三萜及甾醇类等成分,从化学成分、药理作用以及临床应用3个方面对鸡血藤的研究作一总结,认为鸡血藤有多方面的作用,对多种疾病有较好的临床治疗效果,为进一步开发利用鸡血藤提供了参考。     

NIR法对中成药大蜜丸中非法添加西地那非的定性分析

目的运用近红外光谱法对中成药大蜜丸中非法添加西地那非进行快速筛查。方法对中成药大蜜丸进行近红外光谱扫描并经液相色谱—质谱联用法确证后,将法定检验结果与近红外光谱结合,建立NIR相似系数法检验模型。结果检验模型对实验室判定为合格与不合格的样品进行筛查,准确率达到50%。结论建立的相似系数法检验模型具有方法简单、易操作等特点,适用于药品检测车对中成药大蜜丸中是否添加西地那非的快速筛查。     

缺血性脑血管病患者FLAIR血管高信号征三种评分方法的一致性研究

目的探讨比较缺血性脑血管病患者FLAIR序列血管高信号征(FLAIR vascular hyperintensity,FVH)三种评分方法评分者间的一致性。材料与方法搜集2016年6月至2017年6月间扬州大学附属医院神经内科拟诊缺血性脑血管病患者的MR图像资料,由3名影像科医师分别采用3种FVH评分方法对入组179例患者(358侧大脑中动脉供血区)FVH征象进行评分。采用Kappa系数及Kendall系数评价评分者间的一致性。结果 Lee评分法、Olindo评分法、Olindo评分法(分组)、ASPECT改良评分法、ASPECT改良评分法(分组)评分者间评分的符合率分别为68.7%、26.0%、51.1%、41.1%、60.1%,评分者间一致性平均Kappa系数分别为0.652、0.304、0.530、0.427、0.612(P0.001),各评分法评分者间相关系数Kendall系数值分别为0.882、0.924、0.900、0.920、0.909(P0.001)。结论 Lee评分法的评分者间的一致性最高(高度)。Olindo和ASPECT改良评分法评分者间的一致性相对较差(低度和中度),此二种评分法分组后一致性均提高(中度及高度)。临床应根据具体的评价目的和区分度需求选择合适的FVH评分方法。