围妊娠期小鼠胰岛细胞增殖及Survivin表达变化的研究

目的 观察围妊娠期小鼠胰岛β/α细胞量、细胞增殖、Survivin表达变化以及大鼠胰岛细胞瘤细胞株INS-1干扰Survivin表达后催乳素刺激细胞增殖的变化,探讨Survivin与妊娠期胰岛细胞扩增的关系.方法 采用免疫组化染色法检测C57 BL/6雌性小鼠非妊娠对照组（NP）和妊娠10.5、14.5、18.5 d（P10.5、P14.5、P18.5）、产后4、8 d（AP4、AP8）（每组各25只）胰岛β/α细胞量的变化.采用胶原酶消化法分离纯化小鼠胰岛,以流式细胞术检测细胞周期,实时定量聚合酶链反应及Western blotting法检测Survivin mRNA和蛋白的表达.采用脂质体转染siRNA方法干扰INS-1细胞Survivin的表达,催乳素刺激后检测细胞周期.多组数据组间比较采用单因素方差分析,两两比较采用最小差异显著性分析.结果 妊娠期胰岛β/α细胞量均显著增加,高峰在P18.5,与NP组相比,β细胞量增长2.1倍（3.84±0.38比1.81 ±0.09,t =4.75,P＜0.05）,α细胞量增长1.6倍（0.92±0.13比0.56 ±0.08,t =2.69,P＜0.05）,至AP8恢复至NP水平.妊娠期小鼠胰岛细胞增殖显著增加,高峰在P14.5,与NP组相比,增殖指数增长2.7倍（23.07±1.88比7.72±1.12,t=10.89,P＜0.05）,产后恢复正常.Survivin mRNA表达水平在妊娠期明显增高,高峰在P14.5,与NP组相比,增长6.7倍（6.69±1.61比1.00 ±0.00,t =4.57,P＜0.05）,产后恢复正常.P10.5时Survivin蛋白开始表达,高峰在P14.5,与P10.5相比增长3.6倍（3.63±0.26比1.00±0.00,t=9.98,P＜0.05）,P18.5时表达逐渐下降,P20.5时表达消失.催乳素可显著刺激INS-1细胞增殖,而siRNA干扰INS-1细胞Survivin表达后,细胞增殖受阻.结论 妊娠期小鼠胰岛细胞出现明显扩增,并伴有Survivin的动态表达.Survivin介导催乳素刺激的胰岛β细胞扩增作用.     

老年人外周血淋巴细胞CD28及CD95表达变化研究

目的通过对老年人与成年人外周血淋巴细胞CD28及CD95表达水平的比较性研究,观察淋巴细胞凋亡在免疫衰老中的作用。方法采用免疫荧光标记流式细胞术,分析成年组(20~59岁)与老年组(60~90岁)各20例的外周血淋巴细胞表型水平。结果老年组CD28 CD95-[(8.80±4.86)%]及CD28 细胞[(36.32±10.38)%]明显低于成年组[(23.09±3.48)%、(52.29±4.90)%](P<0.01),而CD28-CD95 [(53.23±8.28)%]、CD95 [(80.25±7.19)%]及CD28-细胞[(63.68±10.38)%]明显高于成年组[(33.58±4.72)%、(63.18±4.12)%、(47.71±4.90)%](P<0.01)。结论老年人CD28 表达随年龄增长而下降,CD28-及CD95 表达随年龄增长而上升。提示淋巴细胞凋亡在免疫衰老中可能具有重要作用。     

成人急性淋巴细胞白血病4种特异性靶抗原的特征研究

本研究针对成人急性淋巴细胞白血病(ALL)抗体免疫治疗的主要4种特异性靶抗原(CD19、CD20、CD22和CD33),深入探究其临床和预后特征,探讨针对这些靶抗原的新型靶向药物应用于成人ALL治疗的临床依据和价值。对220例成人ALL患者采用四色流式细胞仪进行免疫表型分析,采用常规细胞遗传学、荧光原位杂交、实时定量PCR和巢式PCR扩增及DNA测序等技术进行细胞学和分子遗传学、分子生物学指标检测。结果显示,CD19阳性(CD19+)组女性和60岁以上老年患者比例高于CD19阴性(CD19-)组(46.4%vs 23.4%,P=0.006)(14.4%vs.2.1%,P=0.022),CD19+伴CD33表达增高(47.8%vs.12.0%,P<0.01),遗传学高危组患者比例显著增高(55.8%vs.20.8%,P<0.01),Philadelphia染色体阳性(Ph+)发生率高(35.3%vs.7.9%)(P<0.01);CD20+组伴CD13+低于CD20-组(31.6%vs.67.1%,P<0.01),CD20+无显著预后意义;在B-ALL患者中,CD22+比CD22-组12月复发率增高(93.9%vs.57.1%,P<0.05);CD33+组Ph+率显著增高(43.5%vs.19.4%,P<0.01),CD33+与Ph+之间有显著相关性(相关系数=0.261,P<0.01)。结论:本研究对CD19、CD20、CD22和CD33这些特异性靶抗原特征的深入分析,有助于指导临床正确把握抗体免疫治疗的适应症和应用时机,使患者最大程度获益。     

环孢素A糖皮质激素治疗成人获得性纯红细胞再生障碍疗效对照研究

目的评估环孢素A(CsA)、糖皮质激素(CS)治疗成人获得性纯红细胞再生障碍(PRCA)疗效。方法回顾性分析2009年10月至2017年4月南京医科大学第一附属医院收治的42例PRCA接受CsA(16例)、CS(13例)、CsA联合CS(6例)及其他免疫抑制剂(4例)治疗临床资料。结果接受CsA、CS、CsA联合CS及其他免疫抑制剂初始有效率分别为75.0%,46.2%,66.7%,75.0%(P=0.456),累积有效率分别为69.6%(16/23),50.0%(7/14),71.4%(5/7),42.9%(6/14)(P=0.376),累积完全缓解(CR)率分别为26.1%(6/23),28.6%(4/14),57.1%(4/7),14.3%(2/14)(P=0.284)。27例难治复发PRCA,17例改为CsA或CS方案中11例(64.7%)有效,10例改为其他免疫抑制剂3例有效(30%)(P=0.120)。结论 CsA和CS治疗PRCA疗效相似。难治复发PRCA患者,CsA和(或)CS无效后尚无满意的治疗方法。     

慢性淋巴细胞白血病外周血免疫球蛋白异常研究

为了解慢性淋巴细胞白血病（CLL）患者外周血免疫球蛋白（Ig）异常与年龄、性别、疾病分期及预后的关系,运用免疫速率比浊法测定83例CLL患者血清中IgG、IgA和IgM水平,用多参数流式细胞术（FCM）检测患者外周血CD38、ZAP－70表达水平。结果表明：83例CLL患者中IgG减低12例（14．5％）;IgA减低26例（31．3％）,IgM减低34例（41．0％）。BinetC期组Ig减低发生率明显高于BinetA和B期组（P=0．011）,Rai分期高危组的Ig减低发生率明显高于低危组（P=0．011）。Ig减低组CD38和ZAP－70表达阳性率明显较Ig正常组高（P＝0．033和P=0．038）。CD38和ZAP－70在疾病晚期患者表达阳性率更高,其中BinetC期组ZAP－70表达阳性率明显高于BinetA和B期组（P=0．047）。而年龄和性别与Ig异常没有明显相关性（P〉0．05）。结论：CLL患者体液免疫功能与疾病分期密切相关,检测CLL患者外周血Ig水平的变化,对了解CLL患者免疫功能状态,从而判断病情及预后具有重要作用。     

Ikaros和Helios异构体在白血病中的表达特征及机制的初步研究

本研究旨在阐明对造血调控中起重要作用的Ikaros家族成员Ikaros和Helios的两个异构体Ik-6和He-i的表达特征、发生机制、临床意义和关联性。对163例白血病患者的骨髓细胞进行了PCR分析。结果显示,Ik-6和He-i高表达于不同的白血病亚型,Ik-6高表达于BCR/ABL融合基因阳性的急性淋巴细胞白血病,而He-i则高表达于T细胞急性淋巴细胞白血病。克隆和测序结果显示,异构体Ik-6和He-i具有不同的遗传学改变。本研究未观察到Ik-6和He-i之间具有统计学意义的关联性。结论:虽然Ikaros和Helios是具有极其相似锌指结构的同一家族成员,但其异构体Ik-6和He-i在白血病中的表达特征、发生机制和临床意义有差异。Ik-6和He-i缺失的外显子分别含有或不含有DNA结合功能域,这种差异可能导致两者具有不同的生物学功能。两者之间的相互作用和关联性有待深入研究。     

慢性淋巴细胞白血病外周血T细胞亚群及免疫球蛋白研究

 目的　分析慢性淋巴细胞白血病（CLL）患者的免疫状态及其与疾病分期的关系。方法　应用流式细胞术（FCM）分析60例B-CLL患者外周血T淋巴细胞亚群的变化，用免疫速率比浊法分析其中37例患者血清中IgG、IgA和IgM的变化，比较各Binet分期患者免疫功能的变化。结果　与正常对照组相比，60例B-CLL患者外周血中CD+3、CD+4和CD+8细胞比率均明显降低（P＜0.01），Binet B、C期组患者CD+4／CD+8比值也明显低于Binet A和正常对照组（P＜0.01）。37例B-CLL患者中有21例患者（56.8 %）出现有免疫球蛋白（Ig）减低的情况。Binet C期组Ig减低发生率高于Binet A和B期（P＜0.05），Binet C期组IgG、IgA、IgM的平均水平明显低于Binet A和B期组（P＜0.05）。结论　CLL患者存在细胞免疫和体液免疫功能的低下，与CLL病程密切相关。检测CLL患者外周血T细胞亚群及Ig水平的变化，对了解CLL免疫功能状态，从而判断病情具有重要作用。     

慢性淋巴细胞白血病的免疫表型研究

目的 结合ZAP-70、CD38探讨免疫表型在B慢性淋巴细胞白血病（B—CLL）诊断和预后评价中的应用价值。方法 采用多参数流式细胞术检测45例B-CLL患者CD5、CD10、CD19、CD20、CD22、CD23、FMC7、CD38及ZAP-70的表达。结果 45例B-CLL均高表达CD19、CD20，其中有43例（95．6％）表达CD5，42例（93．3％）表达CD23，30例表达CD22（66．7％），无一例表达FMC7和CD10。将所有病例分为两组，ZAP-70^＋CD38^＋／ZAP-70^-CD38^-组占84．4％（38／45）．ZAP-70^＋CD38^-／ZAP-70^-CD38^＋占15．6％（7／45），两组所占比例差异有统计学意义（P〈0．05）。结论 同时表达CD5、CD23、CD19是诊断B-CLL的特征性免疫表型，CD5^-见于不典型B-CLL，CD38和ZAP-70的表达存在相关性。     

伴复杂染色体异常的套细胞淋巴瘤-例并文献复习

报道伴复杂染色体异常的套细胞淋巴瘤(MCL)1例并复习相关文献.患者男,58岁.发现全身肿块1年余,常规染色体核型为92,XXYY,7q ×2,9q ×2,t(11;14)×2,13q-×2,15q ×2/46,XY[8].I-FISH示t(11;14),M-FISH示89,XXYY, 1, 1, 2, 2, 3, 3, 4, 4, 5, 5, 6, 6, der(6)t(6;8), 7, der(7)t(7;9), 8, 8,der(9)t(9;15)×2. 10, 10, del(11)(q?)×2, 12, 12, der(13)t(3;13)×2, der(14)t(11;14)×2, 16, 16, 17, 17, 18, 18, 19, 19, 20, 20, 21, 21, 22, der(22)t(4;22)[20]/46,XY[11].骨髓涂片示原始淋巴细胞22.8%,幼稚淋巴细胞10.0%,免疫表型示原幼淋巴细胞占39.9%,CD19 90%;二次摄门CD19 细胞表达:CD5 89.5%,CD20 100%,CD23阴性;淋巴结免疫组化Cyclin Dl 、CD43 、CD10-.Hyper-CVADA及B方案交替化疗后全身肿决消失,复查骨髓:原幼琳占0.8%,流式细胞检查未见微小病灶残留(MRD),FISH结果示t(11;14)阳性细胞0/200.初步研究结果提示,对少见复杂表现的小细胞淋巴瘤可以先借助组织学和免疫表型改变来诊断大部分的病例.     

伴复杂染色体异常的套细胞淋巴瘤一例并文献复习

报道伴复杂染色体异常的套细胞淋巴瘤（MCL）1例并复习相关文献。患者男，58岁。发现全身肿块1年余，常规染色体核型为92，XXYY，7q^＋&#215;2，9q^＋&#215;2，t（11；14）&#215;2，13qˉ&#215;2，15q^＋&#215;2／46，XY[8]。I-FISH示t（11；14），M—FISH示89，XXYY，＋1，＋1，＋2，＋2，＋3，＋3，＋4，＋4，＋5，＋5，＋6，＋6，＋der（6）t（6；8），＋7，＋der（7）t（7；9），＋8，＋8，der（9）t（9；15）&#215;2，＋10，＋10．＋del（11）（q？）&#215;2，＋12，＋12，＋der（13）t（3；13）&#215;2，＋der（14）t（11；14）&#215;2，＋16，＋16，＋17，＋17，＋18，＋18，＋19，＋19，＋20，＋20，＋21，＋21，＋22，＋der（22）t（4；22）E20]／46，XY[11]。骨髓涂片示原始淋巴细胞22．8％，幼稚淋巴细胞10．0％；免疫表型示原幼淋巴细胞占39．9％，CD1990％；二次摄门CD19^＋细胞表达：CD589．5％，CD20100％，CD23阴性；淋巴结免疫组化Cyclin D1^＋、CD43^＋＋＋、CDIOˉHyper-CVADA及B方案交替化疗后全身肿块消失，复查骨髓：原幼淋占0．8％，流式细胞检查未见微小痛灶残留（MRD），FISH结果示t（11；14）阳性细胞0／200。初步研究结果提示，对少见复杂表现的小细胞淋巴瘤可以先借助组织学和免疫表型改变来诊断大部分的病例。