弓形虫虎源分离株ROPIO基因的克隆、序列分析及其表达研究

采用RT-PCR技术从弓形虫虎源分离株中扩增出ROP10基因，将其克隆入pMD18．T载体中进行测序和生物信息学分析，并将目的基因亚克隆到大肠杆菌表达载体pET28a中进行诱导表达。该基因全长1761bp，编码586个氨基酸，其中前28个氨基酸残基构成信号肽序列。与GenBank中报道的RH株相比，16个核苷酸存在变异，导致7个氨基酸发生改变，但两者N-联糖基化位点的数量和位置没有差异，两虫株核苷酸和推导氨基酸序列的同源性分别为99．2％和98．8％。转化重组质粒pETROP10的大肠杆菌B121（DE，）在IPTG的诱导下，可表达出分子量为67．6kDa的重组蛋白，表达量占菌体蛋白的13．8％。     

新型冠状病毒RBD区重组流感病毒的拯救及初步鉴定北大核心CSCD

目的利用流感反向遗传技术,以B型流感病毒B/Yamagata/16/88株作为骨架,表达新型冠状病毒(SARSCoV-2)S蛋白的受体结合域(RBD),构建以B型流感病毒为载体的新型冠状病毒疫苗候选株。方法基因合成新冠病毒参考株S蛋白上的RBD基因片段(318-541aa),对B型流感病毒B/Yamagata/16/88/的NS1片段进行设计改造并插入RBD序列,构建重组质粒NS110-RBD。将NS110-RBD与其余7个骨架株重组质粒共转染293T细胞和MDCK细胞,拯救表达新型冠状病毒RBD区重组流感病毒,对拯救出的毒株进行形态学、分子生物学鉴定及病毒滴度和Western blot检测。结果成功拯救出重组流感病毒株并命名为rIBV-NS110-RBD。PCR鉴定RBD目的基因大小正确,测序表明拯救病毒株的序列正确,在透射电镜下观察到拯救病毒株的病毒粒子具有流感病毒粒子的典型特征。经测定,拯救株rIBV-NS110-RBD在MDCK细胞上的病毒滴度为10^(5.5) TCID_(50)/ml,在鸡胚上的病毒滴度为10^(6.5) EID_(50)/ml,血凝效价最高达2_(5);Western Blot检测到RBD的表达,其分子质量为35ku。结论成功拯救出高表达新型冠状病毒RBD蛋白的高血凝效价的重组流感病毒株,该病毒具有流感病毒粒子的典型特征,为以B型流感病毒为载体作为新型冠状病毒疫苗的研发提供了新思路。     

老年甲状腺功能减退误诊为肝硬化1例

1病例资料 患者，男，90岁，病案号24993。因纳差、双下肢水肿半年，加重伴气短，腹胀1周于2001年12月21日入院。既往有慢性支气管炎、多囊肾、慢性肝炎病史。平素少量饮酒。查体：T36．5℃，P80次／min，BP130／70mmHg。皮肤、巩膜无黄染。双下肢皮肤可见针尖大小的出血点散在。双手可见肝掌。甲状腺不月肿大无结节。左下肺呼吸音减弱，可闻及少量小水泡音。心尖搏动位于第5肋间左锁骨中线外1cm，心音减弱，心率80次／min，律齐，各瓣膜听诊区未闻及病理性杂音。腹部饱满，腹围96cm，无腹壁静脉曲张。可叩出移动性浊音。双下肢轻度凹陷性水肿。     

甲状腺微小乳头状癌射频消融术与外科手术的比较

目的 比较射频消融(RFA)治疗和外科手术治疗在甲状腺微小乳头状癌患者手术情况、患者满意度与经济负担方面的差异.方法 选择2015年6月至2019年8月甲状腺超声检查发现小于1 cm单发可疑恶性结节的患者217例,以病理结果为金标准确诊为甲状腺乳头状癌.根据治疗方式不同分为RFA组(n=102)和外科手术组(n=115...     

百草枯中毒救治一例

患者女,44岁,2010年8月1日口服质量浓度为20％的百草枯原液20 ml,当即被家人送至当地县医院.给予大量清水灌胃、补液等治疗.因咽部不适、吞咽困难症状无明显改善,为进一步治疗于当日转入我院.     

湖南农村地区6～23月龄婴幼儿血红蛋白水平对发热和腹泻影响

目的探讨婴幼儿血红蛋白水平对发热和腹泻的影响,并分析其剂量反应关系。方法采用多阶段分层随机抽样方法,于2017年10—12月,在湖南省农村地区随机抽取3 630名6～23月龄婴幼儿为研究对象进行问卷调查,并检测其指尖末梢血血红蛋白,采用多因素非条件logistic回归模型控制潜在混杂因素来分析婴幼儿血红蛋白水平对发热和腹泻的影响。结果湖南省农村地区6～23月龄婴幼儿贫血患病率为28.7%(1 042/3 630),血红蛋白水平为<100、100～109、110～119、120～129、≥130 g/L的比例分别为8.8%(319/3 630)、19.9%(723/3 630)、33.9%(1 229/3 630)、25.2%(916/3 630)、12.2%(443/3 630)。婴幼儿发热和腹泻两周患病率分别为15.1%(547/3 630)和14.0%(509/3 630)。多因素logistic回归分析显示,贫血是婴幼儿发热和腹泻的独立危险因素,其调整OR值分别为1.57(95%CI=1.29～1.91)和1.40(95%CI=1.14～1.71);血红蛋白水平对婴幼儿发热...     

儿科医生人才队伍萎缩的原因探析

国务院最近颁布的《中国儿童发展纲要(2011-2020年)》指出:"儿童发展是国家经济社会发展与文明进步的重要组成部分,促进儿童发展,对于全面提高中华民族素质,建设人力资源强国具有重要战略意义。"然而,我国儿童医疗卫生条件建设的现状与纲要精神有很大差距。最为突出的问题就是儿科医生     

肾癌引起反复高热及C反应蛋白(CRP)异常增高1例

正0引言肾癌是泌尿系统常见的恶性肿瘤,发病人群以50-70岁男性居多,男女发病比例约为2:1。由于多数患者发病早期缺乏典型临床表现,容易造成误诊、漏诊。而C反应蛋白(CRP)长期以来作为反应炎症的一个灵敏指标,在用于判断感染性疾病的同时,对非感染性疾病的辅助诊断同样有着非常重要的指导意义。本文通过对临床实际病例的分析,进一步证实了CRP对非感染性疾病诊治的重要性。     

重症手足口病患儿血清ACTB、SAA表达变化及临床意义

目的　检测重症手足口病（hand, foot and mouth disease, HFMD）患儿血清人β-肌动蛋白（β-actin, ACTB）、血清淀粉样蛋白A（serum amyloid A, SAA）表达变化，并探讨其临床意义。方法　选取2019年2月—2020年2月在我院接受治疗的42例重症HFMD患儿作为试验组；选取同期体检的42例健康儿童作为对照组。收集研究对象的临床资料；ELISA法检测研究对象血清中ACTB、SAA表达水平；Pearson法分析重症HFMD患儿血清中ACTB、SAA表达的相关性；二元Logistic回归分析重症HFMD患儿的影响因素；ROC曲线分析血清中ACTB、SAA表达水平对重症HFMD的诊断效能。结果　与对照组相比，试验组LDH、AST、CK、CK-MB、BUN、尿视黄醇结合蛋白水平均升高（P均＜0.05），并出现发热、皮疹症状，部分患儿出现嗜睡、惊厥、头痛、躁动症状，70%以上患儿CRP＞8 mg/L，Cox A16阳性11例（26.19%），EV 71阳性31例（73.81%）。试验组血清ACTB、SAA表达水平均升高（P均＜0.05）。Pearson分析结果显示，重症HFMD患儿血清ACTB与SAA表达水平呈正相关（r=0.565，P=0.000）。二元Logistic回归分析结果显示，血清ACTB、SAA水平偏高是重症HFMD的独立危险因素（P均＜0.05）。患儿血清ACTB、SAA联合检测诊断重症HFMD的AUC为0.862，敏感度为75.2%、特异度为91.6%。结论　重症HFMD患儿血清ACTB、SAA表达水平均显著升高，是影响重症HFMD发生的独立危险因素，且联合检测对临床诊断具有一定的参考价值。