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1.
2.
目的用纯化结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,M.tb)ClpP1重组蛋白免疫新西兰白兔制备ClpP1多克隆抗体并检测其效价,间接ELISA法分析重组蛋白的抗原性,以初步评价其应用价值。方法通过SDS-PAGE确定ClpP1重组蛋白的主要表达形式,利用纯化包涵体方式对重组蛋白进行纯化;将纯化蛋白免疫新西兰白兔制备ClpP1多克隆抗体并检测其效价;再分别以纯化蛋白为抗原,制备抗体为一抗,间接ELISA法检测临床诊断结核病患者血清中抗M.tb抗体和M.tb抗原。结果 SDSPAGE显示ClpP1重组蛋白主要以包涵体表达形式存在,将纯化蛋白免疫新西兰白兔4次,取血测抗体效价为1∶64 000;Western blot结果显示制备抗体可较好的与ClpP1蛋白特异性结合;间接ELISA法结果表明,以重组蛋白为抗原测患者血清中抗M.tb抗体和以制备抗体为一抗测血清中的M.tb抗原的2实验组分别与对照组相比均具有显著性差异。结论制备了具有免疫原性的M.tb ClpP1重组蛋白及效价较高的多克隆抗体,并得出ClpP1多克隆抗体具有较好的免疫反应性,为进一步研究ClpP1重组蛋白的特性及其应用奠定了基础。 相似文献
3.
目的:体外检测人GLS活性肽和小鼠IL-12基因的共表达产物对黑色素瘤细胞B16的增殖及凋亡的影响.方法:用脂质体将含GLS活性肽和小鼠IL-12基因的共表达质粒转染黑色素瘤细胞B16并用RT-PCR检测其表达,再用MTT试验、Hoechst33258染色、AO/EB染色和Annexin V-FITC流式细胞分析检测基因表达产物对B16细胞的增殖抑制与促凋亡作用.结果:GLS活性肽和小鼠IL-12基因能在B16细胞中表达,MTT法观察到表达产物对B16有明显的细胞增殖抑制作用,经Hoechst33258染色、AO/EB染色和流式细胞分析观察到细胞核浓缩、深染、细胞膜改变等凋亡特征,凋亡指数明显高于对照组.结论:GLS活性肽和小鼠IL-12基因的共表达产物对黑色素瘤细胞B16具有明显的增殖抑制作用及促凋亡作用. 相似文献
4.
目的探讨胰腺囊肿的诊断与治疗方法,减少对胰腺囊性疾病的误诊和误治。方法对1998年-2006年我院收治的44例胰腺囊肿患者的临床资料进行回顾性分析。结果假性胰腺囊肿占36例,占81,8%(36/44);囊性肿瘤6例,占13.6%(6/44);潴留性囊肿2例。6例假性胰腺囊肿经保守治疗后消退,8例行经皮穿刺引流,其余均行手术引流或切除术。结论假性胰腺囊肿占全部囊肿大多数且多由急性胰腺炎所致。在诊断假性囊肿时应首先排除囊性肿瘤,术前ERCP检查和术中组织冰冻切片对胰腺囊肿的鉴别诊断和选择合理的治疗方案至关重要。对已诊断的囊性肿瘤,无论良、恶性应尽可能作根治性切除术。 相似文献
5.
目的:探讨携带编码人天然颗粒溶素(GLS)和小鼠IL-12基因质粒(pZM03)的重组耻垢分枝杆菌经鼻粘膜免疫在小鼠体内的分布与表达。方法:将携带绿色荧光蛋白(GFP)基因质粒(pUV15)的重组耻垢分枝杆菌滴鼻BALB/c小鼠后2周,处死小鼠,观察肺、脾组织中荧光蛋白和耻垢分枝杆菌的分布;将携带GLS和IL-12质粒(pZM03)的重组耻垢分枝杆菌滴鼻免疫BALB/C小鼠3次,第1次免疫后4周,处死小鼠,用免疫组化检测肺、脾组织中GLS表达,用ELISA检测血清IL-12和肺泡灌洗液特异性SIgA的水平。结果:在BALB/c小鼠肺、脾组织中均检测到绿色荧光蛋白和耻垢分枝杆菌的分布,以及GLS的表达,并有血清IL-12水平升高和粘膜特异性SIgA的产生。结论:携带GFP的重组耻垢分枝杆菌可在肺和脾组织分布;携带GLS和IL-12的重组耻垢分枝杆菌经鼻粘膜免疫小鼠后,可引起呼吸道粘膜特异性抗菌免疫,以及GLS和IL-12的体内表达,为新型疫苗的研究奠定了基础. 相似文献
6.
靶向递送人颗粒溶素与小鼠单链IL-12真核共表达质粒耻垢分枝杆菌的构建及鉴定 总被引:2,自引:1,他引:2
目的:构建携带编码人天然颗粒溶素(GLS)和小鼠单链IL-12基因的真核共表达载体pZM03,并构建可将其靶向递送入巨噬细胞中进行表达的重组耻垢分枝杆菌菌苗.方法:将人GLS,小鼠单链IL-12基因和分枝杆菌复制子OriM同时克隆进多启动子真核共表达载体pBudCE4.1中,得到穿梭质粒pZM03.以pZM03电转化耻垢分枝杆菌mc2-155,通过PCR方法检测重组菌中携带的真核共表达质粒;通过与小鼠巨噬细胞株RAW264.7共孵育检测重组菌的靶向性.结果:成功得到了可靶向递送GLS/IL-12真核共表达质粒pZM03进入巨噬细胞的新型重组菌.结论:利用耻垢分枝杆菌作为减毒生物体载体向巨噬细胞中靶向递送真核表达质粒是可能的. 相似文献
7.
8.
老年急性重症胆管炎外科治疗85例分析 总被引:1,自引:1,他引:0
我院从 1 996~ 2 0 0 1年共收治 65岁以上符合急性重症胆管炎 (ACST)诊断标准 [1 ] 的 85例 ,现分析如下。1 临床资料本组男 31例 ,女 54例 ,年龄最大 88岁 ,平均年龄 72 .3岁 ,发病至入院时间 3h~ 8d。t超过 39℃或低于 36℃共 45例 ,HR>1 2 0次 /min50例 ,血 WBC>1 5× 1 0 9/L 40例 ,发生中毒性休克 62例。既往行胆囊切除术者 1 1例 ,胆囊切除、胆道探查 9例。术前合并症 58例 ,其中心血管疾病 32例 ,呼吸系统疾病 1 1例 ,糖尿病 1 0例 ,肾功能不全 5例。 2 4 h以内手术 58例 ,2 4~ 72 h手术 7例 ,择期手术 1 6例 ,4例因各种原因… 相似文献
9.
成人Dandy-walker畸形少见,我院发现一例,报告如下。 患者女,27岁,因头痛收入院,查体,头颅增大畸形,身高1.5米,走路轻度摇摆,眼球微颤,智力低、反应迟钝,心肺未见异常。 相似文献
10.
慢性肝病可引起机体多器官或多系统的病理改变和功能障碍 ,其对骨骺系统的影响也极为明显 ,轻者引起骨量减少 ,重者导致骨质疏松。本资料总结 19例慢性乙肝患者的骨矿物质含量检测结果 ,以对肝源性骨质疏松作初步探讨。1 对象与方法1·1 病例 全部病例为 1999年 4月后因肝病而住院患者 ,排除甲状腺功能亢进、甲状旁腺功能亢进、糖尿病、慢性肾病。男 16例 ,年龄 2 2~ 67岁 ,平均 39 5岁。女 3例 ,年龄 2 7~ 4 5岁 ,平均 36 7岁。慢性乙肝13例 ,活动性肝硬化 (HBV感染所致 ) 6例。诊断标准按 95年全国病毒性肝炎会议所订标准。1·2 … 相似文献